一、猪繁殖与呼吸综合征的研究进展(论文文献综述)
宋健颖[1](2021)在《规模化母猪场五种疫病血清学监测及部分病原鉴定、免疫程序调整》文中进行了进一步梳理随着我国养猪业的规模化发展,猪瘟、圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征、口蹄疫和猪伪狂犬五种主要疾病防控尤为重要,一旦发病就会造成重大经济损失。本研究通过对新疆南疆某地区3个规模化母猪场母猪群的猪瘟、圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬和口蹄疫等五种主要疫病进行抗体水平监测、病原检查,了解规模化母猪场抗体水平、是否存在野毒感染、野毒基因型,更好地评价免疫程序是否合理,以期提高免疫效果。1.2018年至2020年,对新疆南疆某地区3个规模猪场(A~C)采集的1604份血液进行了猪瘟、伪狂犬、猪繁殖与呼吸综合征、口蹄疫和圆环病毒2型的抗体检测。检测结果显示,猪瘟抗体阳性率分别为:A场92.30%(2018)、97.74%(2019)和89.22%(2020);B场95.27%(2018)、93.04%(2019)和86.81%(2020);C场91.67%(2018)、86.50%(2019)和90.80%(2020);伪狂犬病抗体分阳性率别为:A场100.00%(2018)、99.25%(2019)和97.06%(2020);B场98.82%(2018)、93.67%(2019)和94.44%(2020);C场98.12%(2018)、84.00%(2019)和96.55%(2020);猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为:A场86.15%(2018)、75.19%(2019)和55.88%(2020);B场86.39%(2018)、88.61%(2019)和88.89%(2020);C场91.94%(2018)、96.50%(2019)和95.40%(2020)。口蹄疫抗体阳性率分别为:A场90.77%(2018)、100%(2019)和98.04%(2020);B场100%(2018)、97.47%(2019)和96.53%(2020);C场95.97%(2018)、97.50%(2019)和96.55%(2020);圆环病毒2型抗体阳性率分别为:A场80.00%(2018)、100.00%(2019)和92.16%(2020);B场95.27%(2018)、97.47%(2019)和96.53%(2020);C场97.04%(2018)、97.50%(2019)和98.85%(2020)。2.以“发现疫病或证明无疫”的抽样策略采集A规模化母猪场血清样本,采用圆环病毒2型抗原ELISA检测,检测结果阳性率为4.4%,证明A场存在圆环病毒2型感染。3.对A规模化母猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征发病猪的样本,采用猪繁殖与呼吸综合征ORF5基因序列特异性引物经RT-PCR扩增、测序、核苷酸同源性比较、系统进化树分析,结果证明,该样本测序结果与NADC30毒株同源性最高,为93.5%,属于类NADC30毒株。4.猪繁殖与呼吸综合征免疫程序进行调整初探,调整后母猪每年普免3次,每次免疫间隔4个月,采集调整后试验的猪群50份血清,进行猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA检测,抗体阳性率达到96%以上。
耿世晴[2](2021)在《14种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用研究》文中进行了进一步梳理猪繁殖与呼吸综合征(Porine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是因猪感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)后引起的以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸系统症状为主要特征的一种传染病。PRRSV感染后,致炎因子的过量表达,会引起机体组织器官损伤。目前没有特效药物,主要的防治手段为疫苗免疫和生物安全防控。近年来,研究发现中药具有较强的抗病毒活性,不仅能直接抑制或杀灭病毒,还能增强机体免疫力。为探究鱼腥草、忍冬藤、天花粉等14味中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用,通过建立Marc-145细胞模型,测定其在Marc-145细胞上最大安全浓度的基础上,运用MTT法,通过阻断、抑制、杀灭3种作用方式探究其对PRRSV的抑制作用效果。进一步通过荧光定量PCR测定药物与病毒作用后的细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α的转录水平,探讨中药抗PRRSV的机制。药物毒性试验显示中药的安全浓度都在0.78mg/m L和25mg/m L之间,其中玄参最高,为25mg/m L,紫草和虎杖最低,为0.78mg/m L。病毒的TCID50试验显示,PRRSV-JXA1毒株的TCID50为10-6.8/0.1m L。体外抗病毒试验表明,对PRRSV阻断作用最强的为虎杖、甘草、鱼腥草、射干、紫花地丁;对PRRSV直接杀灭作用最强的为射干、紫花地丁、虎杖、鱼腥草、玄参;对PRRSV抑制作用最强的为蒲公英、马齿苋、鱼腥草、紫草、虎杖。综合3种作用方式,鱼腥草、虎杖等对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制作用较强。运用q PCR法,探究三种作用方式下鱼腥草和虎杖对IL-6、IL-8、TNF-α的转录水平的影响。试验结果表明,同细胞对照组相比,病毒对照组IL-6、IL-8、TNF-α转录水平显着升高,而三种作用方式下,IL-6、IL-8、TNF-α的转录水平随药物浓度增加而降低,差异性变化不一致。但同病毒对照组相比,三种作用方式下鱼腥草和虎杖可显着(p<0.05)或极显着(p<0.01)的降低IL-6、IL-8、TNF-α的转录水平。结果表明鱼腥草和虎杖可减少PRRSV感染Marc-145细胞的促炎细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α的产生。
王玥[3](2021)在《2019~2020年我国部分地区PRRS流行病学调查及PRRSV嵌合病毒pMLV+NADC30的构建》文中研究指明猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起猪的一种急性、高度传染性疫病。2014年,我国南方地区分离到NADC30-like PRRSV毒株,随后几年该毒株流行率迅速攀升。直至今日,该毒株已成为我国PRRSV新的优势流行毒株。针对PRRSV流行毒株研发特异高效的疫苗是进行PRRS防控的关键措施。为了解近年我国部分地区PRRSV流行情况和遗传演化规律,并为新型疫苗候选毒株的研究提供试验基础,本研究对2019年~2020年我国部分地区PRRSV流行毒株进行病原学检测和遗传演化分析;针对主要流行毒株,通过反向遗传技术构建PRRSV经典毒株以及嵌合毒株的感染性克隆并拯救病毒。主要结果如下:1.2019年~2020年我国PRRSV流行株研究。对2019年~2020年收集的4,238份样品,利用RT-PCR法进行病原学检测,结果表明2019年和2020年PRRSV阳性率分别为7.02%和10.57%。空间分布显示,2019年PRRSV在东北地区(10.00%)和华东地区(10.78%),2020年在西北地区(13.43%)和华南地区(27.17%)的阳性率都较高。进一步对PRRSV ORF5进行测序和遗传进化分析,结果表明近两年的主要流行毒株是MLV-like毒株(亚群1)和NADC30-like毒株(亚群5),尤其是NADC30-like毒株,2019年和2020年的阳性占比分别为67.61%和45.95%。2.PRRSV嵌合病毒株pMLV+NADC30的构建。以MLV-like毒株基因组为模板,将全长分四个片段扩增,依次连接至p WSK29-CMV载体上,构建出全长质粒pMLV,经转染Marc-145细胞成功拯救出感染性克隆。在此基础上,进一步将NADC30-like毒株的结构蛋白部分(ORF2-7)替换入pMLV相应编码区,构建出pMLV+NADC30嵌合质粒,转染后成功拯救出活病毒。两个拯救病毒生物学特性分析结果显示,pMLV和pMLV+NADC30的生长曲线与亲本毒株MLV相似。3.PRRSV嵌合病毒株pMLV+NADC30稳定性检测。分别测序嵌合质粒及嵌合病毒F5、F10代Nsp2、ORF3、ORF5序列并比对,结果显示嵌合病毒在Marc-145细胞上稳定传代,未发现突变。将嵌合病毒pMLV+NADC30分别与MLV-like毒株、NADC30-like毒株以及HP-PRRSV毒株以不同比例接种Marc-145细胞进行共感染实验,传至F10后病毒噬斑纯化并对Nsp2、ORF3、ORF5测序分析。比对结果显示嵌合病毒与三种不同亚群的毒株共感染时,未发现重组现象,且嵌合病毒pMLV+NADC30复制能力强于MLV-like毒株和HP-PRRSV毒株,弱于NADC30-like毒株。综上所述,分子流行病学发现MLV-like毒株和NADC30-like毒株是近两年我国主要流行毒株,且NADC30-like毒株占比最高;拯救病毒pMLV和pMLV+NADC30能在Marc-145细胞上稳定传代,且具有与亲本MLV毒株相似的增殖动态;嵌合病毒与三种亚群的流行毒株在细胞水平上共感染后较为稳定,未发现毒株间重组现象,且嵌合病毒复制能力强于MLV-like毒株和HP-PRRSV毒株,弱于NADC30-like毒株。
戴鑫鑫[4](2020)在《昌吉地区规模化猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征的调查及分析》文中研究说明猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种导致仔猪产生呼吸道疾病和母猪繁殖障碍的烈性传染病,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),是世界动物卫生组织(OIE)必须通报的传染病之一。该病呈现全球流行趋势,给养猪业造成巨大经济损失。目前该病防控措施效果不够理想,严重影响了养猪业的发展。新疆昌吉地区三个规模化养猪场存在PRRSV的感染,但其流行毒株特征、流行规律以及免疫防控效果尚不明确。。目的:本项研究通过现场流行病学调查、分子生物学和血清学检测,探明新疆昌吉地区三个规模化猪场PRRS疾病的发病特征和流行规律,分析免疫防控措施的应用效果,为本地区该病的防控提供理论基础。方法:(1)对昌吉地区玛纳斯县、呼图壁县、佃坝乡三个规模化猪场不同阶段的猪群采用现场流行病学调查和PCR检测,主要调查内容包括阳性率、发病季节、发病日龄、疫苗免疫现状等方面。(2)对呼图壁县规模猪场78份样品进行不同毒株PRRS病毒美洲株和类NADC-30毒株)的实时荧光定量PCR检测。(3)对三个规模化猪场免疫猪群的1316份血清样本进行ELISA抗体检测,分析疫苗免疫效果,为制定猪场免疫程序提供理论依据。结果:(1)经现场临床观察和PCR检测,三个猪场PRRS的平均确诊率为6.32%(377/5963),其中玛纳斯县猪场为5.05%(93/1842)、佃坝乡猪场为5.45%(117/2146)和呼图壁县猪场为8.46%(167/1975)。在377份的确诊样品中夏季阳性率38.72%(146/377)和秋季阳性率24.40%(92/377)高于春季18.83%(71/377)和冬季18.03%(68/377)。保育猪发病率10.42%(197/1891),哺乳母猪发病率4.90%(31/632),哺乳仔猪发病率4.90%(135/2753),繁殖母猪发病率为4.67%(14/300)。(2)荧光定量检测呼图壁猪场PRRSV阳性率3.85%(3/78),3份阳性样品中1份样品检测出类NADC-30毒株。(3)三个猪场疫苗免疫后抗体检测阳性率为92.3%(1215/1316)。其中佃坝猪场为92.3%(454/492),四个季度分别为春季89.80%(97/108),夏季100%(51/51),秋季93.60%(161/172),冬季90.10%(145/161);玛纳斯猪场为88.5%(379/428),四个季度分别为春季80.40%(74/92),夏季100%(85/85),秋季93.00%(120/129),冬季82.00%(100/122);呼图壁猪场为96.46%(382/396),春夏季为97.10%(132/136),秋季97.90%(139/142),冬季94.10%(111/118);根据我国农业部2016年动物疫病免疫要求,猪蓝耳病抗体阳性率在70%以上为合格,说明三个场对猪群蓝耳病的免疫合格。其中佃坝猪场四个季度(S/P大于2.5)为14.81%(16/108)、37.25%(19/51)、20.35%(35/172)和6.83%(11/161);玛纳斯县猪场四个季度(S/P大于2.5)为9.78%(9/92)、37.65%(32/85)、2.33%(3/129)和5.74%(7/122);呼图壁猪场(S/P大于2.5)春夏季度为37.50%(51/136)、秋季为35.92%(51/142)和冬季为10.17%(12/118),将PCR检测数据和ELISA数据结合分析可得知当抗体阳性率大于80%,S/P平均值在1.07至1.71之间,离散度在50以下时猪群受PRRSV感染的概率较小。结论:新疆昌吉地区3个规模化猪场均存在PRRS的感染,在各个季节呈现散发的情况。呼图壁某规模化猪场存在PRRSV美洲株和类NADC-30毒株感染,应注意加强防控。三个猪场最优的免疫程序是,母猪和种公猪使用灭活苗进行免疫,仔猪的免疫则是使用弱毒苗(JXA1-R株)。免疫程序为春秋两季普免(妊娠后期母猪禁免),产后母猪和断奶仔猪进行一次补免。
马铭[5](2020)在《新疆三个规模化猪场CSF、PR、PRRS及PCV2免疫抗体的动态检测及免疫程序优化》文中研究指明目的:猪群的健康稳定是规模化猪场长远持续发展的必要条件,是保障猪群健康的主要手段之一。猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)和猪圆环病毒相关疾病(PCVD)是目前对养殖场猪群健康造成影响的重要疾病,猪群若被感染,其死亡不但会造成一定程度的经济损失,还能够损害养殖场的进一步发展。本次实验从猪场病毒病的预防着手,为新疆三个不同地区规模化猪场提供积极有效的疫苗免疫程序,进一步为猪场构建更加完善的免疫程序奠定了一定的理论基础。方法:分析新疆三个不同地区规模化猪场猪瘟、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征以及猪圆环病毒的免疫水平,再通过疫苗免疫抗体的消长规律对免疫程序进行一定的调整,从而确保猪群的健康,防止疾病发生。本研究以哈密、克拉玛依、博乐的三个规模化猪场的3万余头猪为研究对象,在2019年春秋两季采用抽样调查的方法,选择不同日龄的猪血清作为样品,通过ELISA法进一步测定CSFV、PRV、PRRSV和PCV2中的免疫抗体,再通过其消长规律进一步调整相应的免疫程序。结果:1.新疆三个不同地区规模化猪场2019年全年CSFV、PRV、PRRSV以及PCV2的抗体总阳性率为83.90%、71.57%、86.17%、87.25%,均超过了国标要求70%的合格率,其中CSFV抗体阳性率最高的为A场,其次为C场、B场,PRV抗体阳性率最高为C场,其次为B场、A场,PRRSV抗体阳性率最高为A场,其次为B场、C场,PCV2抗体阳性率最高为A场,其次为B场、C场。2.2019年秋季相比较于春季,根据抗体阳性率及变异系数发现A场猪群在413周龄、B场710周龄及C场4-7周龄仔猪存在猪瘟野毒感染的风险;A、B、C三个场的能繁母猪、后备母猪及公猪等均存在PR野毒感染的风险;PRRS方面,A场秋季S/P值大于2.5的猪群较多,病毒活跃,感染风险大,B场春秋两季检测S/P值均小于2.39,维持阳性稳定状态,C场秋季10周龄后的仔猪S/P值均大于3.0,说明此阶段PRRS感染风险大;PCV2方面,A、B、C三个场的抗体阳性率及S/P值均分布均匀,免疫效果好。3.通过抗体消长规律、变异系数、感染风险分析,对各场疫苗程序进行调整,其中母猪按现有的免疫程序严格执行,仔猪按照以下程序操作:A场:0-3日龄(PR,0.5头份,滴鼻),14日龄(PCV2+PRRS,各1头份,左右颈部肌肉注射),23日龄(CSF,1头份,肌肉注射),40日龄(PR,1头份,肌肉注射),60日龄(CSF,2头份,肌肉注射),50日龄(PR,1头份,肌肉注射);B场:0-3日龄(PR,0.5头份,滴鼻),14日龄(PCV2+PRRS,其中PCV2肌注1头份,PRRS肌注0.5头份),28日龄(CSF,1头份,肌肉注射),45日龄(PR,1头份,肌肉注射),60日龄(CSF,1头份,肌肉注射),70日龄(PR,1头份,肌肉注射);C场:0-3日龄(PR,1头份,滴鼻),14日龄(PCV2,PRRS各肌注0.5头份),21日龄(CSF,1头份,肌肉注射),45日龄(CSF,1头份,肌肉注射),50日龄(PR,1头份,肌肉注射),70日龄(PR,1头份,肌肉注射)。结论:根据试验结果对新疆三个不同地区规模化猪场猪的CSFV、PRV、PRRSV、PCV2免疫程序进行了优化,为科学免疫及综合防控奠定了理论基础。
高小静[6](2020)在《PRRSV的IPMA和IFA临床抗体检测方法的建立及应用》文中认为猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种呼吸道传染疾病,传播速度快,死亡率高,严重危害养猪业的发展。本研究旨在建立一种稳定的PRRSV免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)和间接免疫荧光方法(IFA)的临床血清检测方法,利用建立的IFA方法检测临床PRRSV血清的抗体效价和中和抗体效价,研究抗体与中和抗体效价之间的关系,对抗体进行免疫评价分析,为疾病的预防和疫苗评价、免疫评价提供一定技术支持。本实验将过滤的PRRS病毒液接种到Marc145细胞,48h后用预冷的无水乙醇固定,加入PRRSV标准阳性血清,37℃孵育1h,然后加入1:700稀释的羊抗猪Ig G-HRP(IFA加入1:200稀释的Ig G-FITC荧光抗体),37℃孵育1h,最后DAB显色5min,置显微镜下观察结果(IFA直接在荧光显微镜下观察即可),即建立了PRRSV的IPMA和IFA临床血清抗体检测方法。IPMA和IFA中和抗体检测方法则是在上述方法的基础上将等体积的PRRSV和临床血清37℃孵育1h,然后接种到Marc145细胞上,其它步骤和上述方法一样。本研究成功建立了PRRSV的IPMA和IFA临床血清抗体和中和抗体检测方法,经过对IFA反应条件的优化,最终确定以100个TCID50的病毒接种Marc145细胞,培养48h后在﹣20℃用预冷无水乙醇固定30 min,制备成IFA细胞反应板,待检血清以1:50开始,可根据抗体强弱情况在此基础上进行连续倍比稀释检测抗体效价,羊抗猪Ig G-FITC工作浓度为1:200。IFA抗体检测方法与IDEXX试剂盒的检测结果比较,总符合率达到96.5%。且该方法只与PRRSV标准阳性血清发生抗原抗体特异性反应,和其它常见猪病毒标准阳性血清无交叉反应,血清稀释倍数在1:400时仍可检测出抗体,说明该方法的特异性和敏感性较高。利用建立的IFA检测方法分别检测两个猪场血清的抗体效价和中和抗体效价,发现抗体效价是中和抗体效价的6.25、12.5、25、50、100倍,确定抗体效价和中和抗体效价是正相关的关系,中和抗体和抗体的比值大概在1:10到1:100之间,其中25倍的最多,占48%,可根据抗体效价大概预测中和抗体效价,为PRRS的预防和疫苗评价、免疫评价提供一定技术支持。IPMA和IFA抗体检测方法具有特异性强、敏感性高、操作简单的特点,不仅能检测抗体,还能用于病毒等抗原的检测。
苗灵燕[7](2020)在《红茴香注射液对PRRSV和PRV的抗病毒作用及其初步机制研究》文中进行了进一步梳理猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)和伪狂犬病(pseudorabies virus,PR)分别是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和伪狂犬病病毒(PRV)引起的急性传染性疾病,是我国当前规模化猪场常见的病毒性疾病,严重危害养猪业的发展。红茴香注射液(Honghuixiang Injection,HHXI)是由木兰科八角属植物红毒茴(Illicium lanceolatum A.C.Smith)根皮提取制备而成的无菌水溶液,具有活血化瘀、消肿止痛的功效。临床上常用于治疗腰肌劳损,关节损伤或肌肉韧带拉伤及风湿性疼痛等疾病。本课题评价HHXI对PRRSV和PRV的抗病毒作用,并初步探讨其作用机制。1.红茴香注射液对PRRSV的抗病毒作用以MTT法测定HHXI对非洲绿猴胚胎肾Marc-145细胞增殖的影响。利用PRRSV感染Marc-145细胞模型,通过细胞病变(CPE)观察、MTT法以及流式细胞术,检测HHXI对PRRSV的体外抗病毒作用。结果表明,HHXI不仅能直接杀灭PRRSV、阻断PRRSV吸附Marc-145细胞以及抑制PRRSV在Marc-145细胞中复制,还可降低PRRSV感染Marc-145细胞的凋亡率,呈现显着的抗PRRSV作用,半数有效浓度(EC50)范围为生药浓度0.1-0.571 mg/mL,效果优于阳性对照药利巴韦林。同时,HHXI可显着下调感染Marc-145细胞中PRRSV N基因和蛋白表达水平(P<0.01),降低PRRSV感染细胞中炎性因子基因表达水平。这些结果显示:HHXI可以通过直接与病毒作用以及干预PRRSV诱导的炎症反应发挥保护细胞的作用。2.红茴香注射液对PRV的抗病毒作用以MTT法测定HHXI对非洲绿猴肾细胞Vero细胞增殖的影响。采用PRV感染Vero细胞模型,通过CPE观察、MTT法以及流式细胞术,评价HHXI对PRV的体外抗病毒作用。结果表明:HHXI不仅能显着直接杀灭PRV、阻断PRV吸附Vero细胞、抑制PRV在Vero细胞中复制,降低PRV感染Vero细胞的坏死率,而且可下调PRV感染Vero细胞中PRV gD基因和蛋白表达水平,呈显着的抗PRV作用,其EC50范围为生药浓度0.1-0.508 mg/mL。同时,鉴于PRV的神经嗜性,采用小鼠神经小胶质BV2细胞模型,研究HHXI对PRV诱导BV2细胞炎症反应的影响。结果表明,HHXI可显着降低PRV感染BV2细胞产生NO,下调IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1、COX-2、iNOS和IFN-β等炎性因子基因表达水平,抑制NF-κB、细胞外信号相关激酶(ERK)、p38和c-Jun N-末端激酶(JNK)磷酸化,说明HHXI可以通过NF-κB和MAPKs通路抑制PRV诱导BV2细胞产生的炎症反应,从而起到保护细胞作用。最后,以PRV感染小鼠模型评价HHXI对PRV的体内抗病毒作用。结果显示,HHXI可显着提高PRV感染小鼠的存活率以及延长感染小鼠的生存时间,具有预防和治疗作用,效果优于阿昔洛韦(ACV)。脑组织检测结果显示:HHXI可显着减轻PRV感染小鼠脑组织病理变化,降低脑组织病毒载量,下调脑组织中炎性因子基因表达水平,从小鼠体内的角度证明了 HHXI对PRV具有抗病毒活性的作用。综上所述,HHXI对PRRSV和PRV具有显着的抗病毒作用,其确切机制有待进一步深入研究。
马振乾[8](2019)在《猪瘟免疫群抗体与病毒变异监测及病毒亚单位疫苗的免疫效果评价》文中进行了进一步梳理猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、败血性的高度接触性传染病,为国家法定的一类动物疫病和OIE通报性疫病之一,严重影响养猪业健康发展。近年来发现,母猪感染后呈现繁殖障碍、流产和产死胎和弱胎,有些早产仔猪呈持续性感染和先天性震颤。目前,国内应用猪瘟疫苗控制猪瘟虽然取得了很大成效,但是免疫猪群依然时常存有猪瘟的发生与流行。造成免疫猪群发生猪瘟的原因比较复杂,其中免疫程序不尽合理、疫苗质量存在问题,尤其是对免疫猪群免疫效果缺乏监测与追踪是导致猪瘟时常发生的主要原因。因此,及时跟踪与监测猪瘟免疫猪群的抗体水平,确定猪群的猪瘟疫苗免疫效果及猪瘟病毒的感染情况,发现猪瘟病毒流行毒株的遗传变异趋势,将为有效防控猪瘟的发生与流行提供有效的理论依据。本研究应用免疫学、分子生物学和病毒学等技术手段对我国2015-2017年部分地区猪瘟疫苗免疫猪群的抗体水平、猪瘟病毒的感染情况及猪瘟病毒的遗传变异进行了研究,并对猪瘟基因工程亚单位疫苗的免疫效果进行了监测与分析。同时对国内近年来新发的仔猪非典型瘟病毒感染进行了初步研究,取得了如下主要结果。一、应用ELISA方法对采自国内26个省、直辖市和自治区的2009个不同规模的养猪场共计48731份猪瘟疫苗免疫血清进行了抗体检测,结果发现在2015-2017年期间,各区域样品猪瘟抗体阳性率在68.30%82.94%之间,平均阻断率在55.60%65.60%之间;不同生长阶段猪群的猪瘟抗体监测结果显示,种猪群(后备母猪、公猪和母猪)抗体水平最好,其阳性率在79.92%88.93%之间,平均阻断率在62.48%71.55%之间;保育阶段的猪群抗体水平最差,猪瘟抗体阳性率在48.19%57.41%之间,平均阻断率在41.34%46.84%之间。在2015-2017年间,每年采集的样品猪瘟抗体平均阻断率在50.00%90.00%之间的数量所占比例都最高,在57.14%62.12%之间;采集于不同月份及年份的样品,其猪瘟抗体水平监测结果显示没有明显的变化规律。二、对采集的3069份病料应用RT-PCR方法进行猪瘟病毒核苷酸序列检测,结果表明,2016年猪瘟阳性率最高为16.40%,其次为2015年,猪瘟阳性率为13.30%,2017年猪瘟阳性率最低,为12.80%。比较采自各季度样品的猪瘟病毒检测结果,显示第二季度猪瘟病毒的检出率最高,为14.80%24.40%。对猪群猪瘟病毒及其他三种常见病毒混感进行了检测,结果显示混合感染的比例为0.98%9.24%,其中,与猪繁殖障碍与呼吸道综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)混感比例最高,在6.70%9.24%之间,与猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)混合感染比例最低,在0.98%1.20%之间。三、应用RT-PCR技术,对采自山东和河南的18株猪瘟流行毒株进行分子生物学分析,结果发现这18株毒株与国内外参考毒株E2核苷酸同源性在79.7%99.0%之间,与标准毒株Shimen株E2核苷酸同源性在81.0%94.7%之间,其中SD11株与疫苗毒株E2核苷酸同源性最低为79.9%,SD05株与疫苗毒株E2核苷酸同源性最高为99.2%。18株毒株E2基因推导的氨基酸与参考毒株氨基酸序列同源性在50.2%98.5%之间,与标准毒株Shimen株氨基酸序列同源性在52.1%86.9%之间,与疫苗毒株C株氨基酸序列同源性在52.1%97.7%之间,其中SD10株与疫苗毒株氨基酸序列同源性最低,HN02株与疫苗毒株氨基酸序列同源性最高。病毒序列与进化树分析发现,分离的18株流行毒株主要属于1.1亚群和2.1亚群,但以2.1亚群为主,且2.1b为优势流行毒株,占到72.22%,这表明我国猪瘟流行毒株存在遗传变异多样性。四、应用分子生物学等技术方法对河南省规模化猪场近年发生的临床上以新生仔猪震颤为主要特征的疫病进行了研究,结果从发病猪群检测出非典型瘟病毒的基因序列。扩增与测定的病毒基因序列与GenBank中的现有非典型瘟病毒进行比对分析,发现该非典型瘟病毒(Atypical porcine pestivirus,APPV)毒株(Xuchang2018)与国外APPV分离株同源性在89.5%94.2%之间,其中与美国USA2013株同源性最高为94.2%;而与国内江西分离的七个APPV毒株的同源性最高,在90.2%97.6%之间;与国内广东三个分离株的同源性相对较低,在85.4%86.3%之间。苏木素伊红染色显示,发病猪小脑白质中有大量的空泡变性,小脑中的髓磷脂含量减少,感染动物的脑部血管周围的局部神经胶质细胞有显着的减少。本研究确定出河南省猪群存在APPV感染,该结果为本地区本病的防控打下了基础。五、对猪瘟基因工程亚单位疫苗与传统猪瘟弱毒活疫苗进行对比试验,确定了基因工程亚单位疫苗抗体维持时间。选择400头仔猪,随机分为试验组(猪瘟亚单位疫苗)与对照组(细胞苗),每组200头仔猪,分别在免疫后0天、30天、60天、90天、125天,即30日龄、60日龄、90日龄、120日龄和155日龄进行采样,每组每次随机采血10份;试验组仔猪在30日龄颈部肌肉注射1头份猪瘟基因工程亚单位疫苗,对照组仔猪分别在30日龄和60日龄颈部肌肉注射各1头份高效猪瘟弱毒活疫苗。结果发现,试验组猪瘟抗体水平在免疫后90天达到最高,阻断率达到88.23%,随后开始下降,但155日龄仍处于较高水平,维持时间较长,并且受猪繁殖障碍与呼吸道综合征影响较小。
毕峻龙[9](2019)在《云南省部分地区猪繁殖与呼吸综合征分子流行情况调查及防治措施研究》文中进行了进一步梳理猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起一种猪的重要传染病,如何有效地控制该病流行是当前面临的严峻挑战和重大课题。在调查分析云南省部分地区猪场PRRSV流行情况和基因遗传进化的基础上,进一步通过细胞实验和动物实验评价中药“黄氏蓝瘟康”抑制PRRSV增殖效果及作用机制,并在实验猪场对PRRS防治措施进行应用效果评价,以期为该病防控提供理论依据。研究结果如下:1、2013-2018年间,对云南省不同地区规模猪场收集的2234份样品进行疫病检测,发现594份样品为PPRSV阳性,阳性率为26.59%。阳性样品中,二重混合感染率为38.72%,三重混合感染率为11.11%,四重混合感染率为1.35%;其中PRRSV、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)和猪瘟病毒(CSFV)三重混合感染率为6.06%;PRRSV、PCV2和伪狂犬病毒(PRV)三重混合感染率为3.37%;PRRSV、PCV2、CSFV和PRV四重混合感染率为1.68%。将部分阳性病料通过Marc-145和PAM细胞进行病毒分离与鉴定,分离得到20株云南PRRSV流行毒株,并完成病毒感染力(TCID50)测定。2、将获得的20株PRRSV云南流行毒株进行全基因组测序,发现全基因序列长度在15230 bp到15437 bp之间,与JXA1毒株的核苷酸同源性最高,为93.3%99.1%。遗传进化分析表明,20株PRRSV云南毒株均属于国内优势流行毒株sublineage8.7谱系,其中6株云南毒株形成一个独立分支,介于subgroupⅠ和subgroupⅡ之间,属于Intermediate亚群;6株毒株和subgroupⅢ亲缘关系较近,属于高致病性JXA1-like毒株亚群;8株毒株和subgroupⅤ亲缘关系较近,属于HP-PRRSV vaccine-like亚群。与参考毒株相比,部分关键氨基酸位点存在不同程度的突变和缺失。3、以Marc-145细胞为模型,体外评价中药“黄氏蓝瘟康”对PRRSV的抑制作用,结果表明药物最大无毒浓度(TC0)为1.56 mg/ml,半数毒性浓度(TC50)为38.3 mg/ml。中药通过治疗、预防和直接抑制三种给药方式均能抑制病毒增殖,半数抑制浓度(IC50)分别为0.265 mg/ml、0.300 mg/ml和0.282 mg/ml,选择指数(SI)分别为144.53、127.67和135.82,能够使病毒毒力(TCID50)下降2个滴度以上,以治疗作用方式给药效果最佳。实时荧光定量PCR检测结果表明,药物三种作用方式均显着抑制了PRRSV核蛋白基因(ORF7)的表达,间接免疫荧光实验进一步证明PRRSV核蛋白表达被抑制。中药对NF-κB信号通路相关蛋白表达变化的结果表明,“黄氏蓝瘟康”能够抑制NF-κB信号通路相关蛋白p-IκBα、p-p65、整合素β3和RACK1蛋白表达。动物实验发现,中药治疗组临床症状评分低于接毒对照组,中药治疗组肺组织PRRSV ORF7基因和N蛋白表达明显低于接毒对照组;组织病理学观察发现,中药治疗组肺脏病理变化相对于接毒组病理变化较轻;免疫组织化学实验表明,中药治疗组中所有仔猪的肺部PRRSV阳性信号显着低于接毒对照组。4、应用以中药“黄氏蓝瘟康”为主要的临床防控措施一年后,三个实验场疫苗免疫抗体水平相对于实施前得到显着提高,其中PRRSV免疫合格率上升28.04%;CSFV免疫合格率上升17.48%,PRV免疫合格率上升15.89%。四种疫病阳性率相对于实施前显着下降,其中PRRSV总阳性率下降6.65%,CSFV总阳性率下降6.35%,PCV2总阳性率下降10.64%,PRV总阳性率下降3.03%。母猪平均产仔数为11.8头/胎,相对于实施前提高0.43头/胎,平均窝产活仔数为10.5头/窝,相对于实施前提高1.57头/窝,仔猪断奶成活率为93.38%,相对于实施前提高11.61%。A场经综合措施防控后,生猪疫病的综合发生率下降了9.00%,病死率下降了16.48%,单头新增纯收益为141.26元/头,总经济效益和年经济效益为31.30万元。B猪场经综合措施防控后,生猪疫病的综合发生率下降了7.44%,病死率下降了26.44%,单头新增纯收益为114.44元/头,总经济效益和年经济效益为16.01万元;C猪场经综合措施防控后,生猪疫病的综合发生率下降了9.36%,病死率下降了9.93%,单头新增纯收益为135.41元/头,总经济效益和年经济效益为35.71万元。综上所述:2013-2018年间,PRRSV是云南地区规模养殖场发生疫病的主要病原,多种病原混合感染为主要临床表现。分离获得PRRSV流行毒株20株,PRRSV云南毒株以Intermediate亚群、JXA1-like亚群和HP-PRRSV vaccine-like亚群为主要流行毒株。中药“黄氏蓝瘟康”能够在体外有效抑制PRRSV增殖,其可能的作用机制是通过影响整合素β3与RACK1蛋白相互作用,调控NF-κB信号通路的激活,达到抑制PRRSV增殖的效果。应用中药“黄氏蓝瘟康”的防治措施能够提高养殖场疫苗免疫抗体水平,控制主要流行疫病,提高平均窝产活仔数和仔猪断奶成活率,产生明显的经济效益。
刘晓东[10](2019)在《2015~2017年国内部分地区PRRSV分子流行病学调查及PRRSV-TJ毒株疫苗评价》文中进行了进一步梳理猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是以母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道疾病为主要症状的一种高度接触性、高死亡率传染病,由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起,属于国家规定的一类动物疾病。20世纪80年代末,美国猪群首次暴发猪繁殖与呼吸综合征,随后席卷北美、亚洲、欧洲的养猪国家,给当时世界生猪养殖行业带来了巨大的经济损失。1996年郭宝清等从国内猪群的阳性血清中分离到PRRSV。随后,疾病在我国北方和东北地区的大部分养殖场迅速蔓延。本研究对我国2015~2017年间部分地区的PRRSV分子流行病学情况、PRRSV野毒株遗传学特性、抗体水平及高致病性蓝耳病活疫苗(TJM-F92株)的安全性及有效性进行系统研究。2015~2017年间,不同年份的猪繁殖与呼吸综合征检出率表明:2017年检出率最低为27.5%,2016年检出率最高为36.2%;不同季度检出率:第三季度>第一季度>第四季度>第二季度;不同地区检出率:西北地区连续三年检出率最低,华南与华中地区的检出率在三年内均位于前三名;在不同阶段猪群的阳性病料中,保育仔猪感染率最高(64.9%68.3%),种猪感染率最低(12.6515.6%)。对猪繁殖与呼吸综合征与猪瘟、伪狂犬病、猪圆环二型病毒及猪圆环三型病毒等病毒性疾病混合感染情况进行调查发现:与猪圆环二型病毒混合感染比例最高(12.4%20.7%),与伪狂犬的混感比例最低(0.60%1.47%),并在2016年首次发现猪圆环三型病毒感染,猪圆环三型病毒与猪繁殖与呼吸综合征的混感比例为(1.89%2.83%)。上述流行病学调查数据表明,虽然近几年来猪繁殖与呼吸综合征多为点状散发,但仍应该保持对此疫病的高度警惕。2015~2017年间,在国内部分地区先后分离得到58株PRRSV野毒株,将其核苷酸序列与标准毒株进行同源性对比分析发现:我国存在至少六个PRRSV亚群,属于第一亚群6株野毒株与第一亚群同源性为93.7%99.3%,与其他亚群同源性为83.1%91.4%;属于第四亚群的35株野毒株与第四亚群核苷酸同源性为94.9%99.7%,与其他亚群同源性为83.3%94.4%;NADC30为代表的第五亚群同属一分支的11株野毒与第五亚群核苷酸同源性为94.2%99.7%,与其他82.3%90.2%;6株新亚群之间的同源性为93.7%99.2%,与其他亚群同源性为82.1%85.6%。对上述58株PRRSV野毒株进行基因序列分析发现,不同亚群的毒力及中和保护位点存在差异,甚至同一亚群的不同毒株之间在毒力及保护位点也存在差异,为该类疫病防控带来较大压力。同时与2014年所分离毒株进行比较发现:2014年所检测的36株分离株均属于第四亚群,自2015年后新的亚群不断出现,并表现出明显向新亚群变异的趋化性,说明PRRSV的变异是不断地。因此进行PRRSV防疫时,必须先进行田间毒株的检测和基因分析,再选择相应种类的疫苗进行准确免疫。2015~2017年间,对来源于国内2012个猪场PRRSV抗体监测表明:PRRSV平均抗体阳性率呈逐年递增趋势,由75.6%逐步升至81.3%;根据不同区域检测发现,华东地区PRRSV抗体阳性率平均值最高(82.9%),西南最低(74.1%);不同阶段猪群PRRSV抗体阳性率检测显示,种猪群抗体阳性率最高,约在83.7%87.6%之间。对2015~2017年间,不同分布区间猪繁殖与呼吸综合征抗体比例分析显示,其S/P值主要分布于0.42.0区间内,小于0.4的区间比例次之,大于3.5区间比例最小。基于上述PRRSV抗体监测数据,我们可以推测,随着养殖场对猪繁殖与呼吸综合征的重视,我国对该类疫病的整体防控水平也在逐年提高。对高致病性蓝耳病弱毒疫苗(TJM-F92株)的安全性及有效性研究发现,该弱毒疫苗免疫种猪后,对其采食量、体温、反情率、死胎与木乃伊胎数均无显着影响,且免疫后各阶段猪群PRRSV抗体均可达到合格水平。上述数据表明,TJM-F92株弱毒疫苗具有良好的安全性。此外,TJM-F92株弱毒疫苗与猪瘟脾淋苗联合免疫不会对猪瘟疫苗抗体产生抑制,因此可以更合理优化猪场免疫程序。
二、猪繁殖与呼吸综合征的研究进展(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、猪繁殖与呼吸综合征的研究进展(论文提纲范文)
(1)规模化母猪场五种疫病血清学监测及部分病原鉴定、免疫程序调整(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第1章 绪论 |
1.1 猪瘟的研究概况 |
1.1.1 概述 |
1.1.2 病原学 |
1.1.3 猪瘟流行病学和临床症状 |
1.1.4 诊断方法 |
1.2 伪狂犬的研究概况 |
1.2.1 概述 |
1.2.2 病原学 |
1.2.3 伪狂犬流行病学和临床症状 |
1.2.4 诊断方法 |
1.3 猪繁殖与呼吸综合征的研究概况 |
1.3.1 概述 |
1.3.2 病原学 |
1.3.3 猪繁殖与呼吸综合征流行病学和临床症状 |
1.3.4 诊断方法 |
1.4 口蹄疫病的研究研究概况 |
1.4.1 概述 |
1.4.2 病原学 |
1.4.3 口蹄疫病流行病学和临床症状 |
1.4.4 诊断方法 |
1.5 圆环病毒2 型的研究概况 |
1.5.1 概述 |
1.5.2 病原学 |
1.5.3 圆环病毒2型病流行病学和临床症状 |
1.5.4 诊断方法 |
1.6 本研究的目的及意义 |
第二章 3 个规模化母猪场5 种疫病抗体检测与分析 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 实验样品来源 |
2.1.2 仪器设备 |
2.1.3 实验试剂 |
2.1.4 样品处理 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 猪瘟病毒抗体ELISA检测 |
2.2.2 伪狂犬病毒抗体ELISA检测 |
2.2.3 猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA检测 |
2.2.4 口蹄疫病毒抗体ELISA检测 |
2.2.5 圆环病毒2 型抗体ELISA检测 |
2.3 试验结果 |
2.3.1 规模母猪场猪瘟病毒抗体ELISA检测 |
2.3.2 规模母猪场伪狂犬病毒抗体ELISA检测 |
2.3.3 规模母猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA检测 |
2.3.4 规模母猪场口蹄疫病毒抗体ELISA检测 |
2.3.5 规模母猪场圆环病毒2 型抗体ELISA检测 |
2.4 讨论与分析 |
2.4.1 猪瘟病毒抗体ELISA检测结果分析 |
2.4.2 伪狂犬病毒抗体ELISA检测结果分析 |
2.4.3 猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA检测结果分析 |
2.4.4 口蹄疫病毒抗体ELISA检测结果分析 |
2.4.5 圆环病毒2 型抗体ELISA检测结果分析 |
第三章 A规模化母猪场圆环病毒2 型抗原检测 |
3.1 实验材料 |
3.1.1 实验样品来源及抽样原则 |
3.1.2 仪器设备 |
3.1.3 实验试剂 |
3.1.4 样品处理 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 圆环病毒2 型抗原ELISA检测 |
3.3 检测结果 |
3.4 讨论与分析 |
第四章 A规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒基因型鉴定及分析 |
4.1 实验材料 |
4.1.1 病料采集 |
4.1.2 主要试剂 |
4.1.3 仪器 |
4.1.4 引物设计与合成 |
4.1.5 样品处理 |
4.1.6 病毒核酸提取 |
4.1.7 PCR产物纯化回收、测序 |
4.1.8 序列分析 |
4.2 试验结果 |
4.2.1 PCR扩增结果 |
4.2.2 基因核苷酸同源性分析 |
4.2.3 基因遗传进化树分析 |
4.3 .讨论 |
第五章 A规模化母猪场猪繁殖与呼吸综合征免疫程序调整试验 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 材料 |
5.1.2 方法 |
5.2 试验结果 |
5.2.1 调整后母猪抗体检测结果 |
5.2.3 调整前后母猪抗体合格率对比 |
5.3 讨论与分析 |
第六章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(2)14种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用研究(论文提纲范文)
缩略词 |
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1.1 PRRS的病原学和流行病学特点 |
1.1.1 PRRS的病原学特点 |
1.1.2 PRRS的流行病学特点 |
1.2 PRRS的主要临床症状和病理变化 |
1.2.1 PRRS的主要临床症状 |
1.2.2 PRRS的病理变化 |
1.3 PRRS的诊断方法 |
1.3.1 抗原诊断 |
1.3.2 抗体诊断 |
1.4 PRRS的中兽医发病机理 |
1.5 抗病毒药物概述 |
1.5.1 抗病毒药物的分类 |
1.5.2 抗病毒药物的作用机理 |
1.6 中草药抗病毒的研究进展 |
1.7 炎症因子概况 |
1.8 PRRSV的疫苗防控 |
1.9 研究的目的和意义 |
第二章 14 种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 细胞和毒株 |
2.1.2 主要试剂与耗材 |
2.1.3 试验仪器 |
2.1.4 试剂的配制 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 中草药药液的制备 |
2.2.2 Marc-145 细胞的培养 |
2.2.3 中药的毒性试验 |
2.2.4 PRRSV的增殖与TCID50 的测定 |
2.2.5 中药水提物体外抗PRRSV效果的测定 |
2.2.6 数据处理及药物评价 |
2.3 结果和分析 |
2.3.1 中草药的最大安全浓度 |
2.3.2 PRRSV的 TCID50 测定结果 |
2.3.3 中草药抗PRRSV作用效果 |
2.4 讨论 |
2.5 小结 |
第三章 荧光定量PCR试验检测细胞因子 |
3.1 试验材料 |
3.1.1 细胞和毒株 |
3.1.2 主要试剂和耗材 |
3.1.3 主要仪器 |
3.1.4 试剂的配制 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 中药的阻断作用(先加药物后加病毒)试验 |
3.2.2 中药的抑制作用(先加病毒后加药物)试验 |
3.2.3 中药直接杀灭作用(药物与病毒同时加)试验 |
3.2.4 RNA的提取及RT-PCR扩增目的片段 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 先加药物后加病毒(阻断作用) |
3.3.2 药物与病毒同时加(直接杀灭作用) |
3.3.3 先加病毒后加药物(抑制作用) |
3.4 讨论 |
3.5 小结 |
第四章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
(3)2019~2020年我国部分地区PRRS流行病学调查及PRRSV嵌合病毒pMLV+NADC30的构建(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 猪繁殖与呼吸综合征病毒研究进展 |
1.1 PRRSV基因组与蛋白 |
1.2 PRRSV的遗传进化 |
1.3 PPRSV疫苗的研究进展 |
1.3.1 MLV疫苗 |
1.3.2 灭活疫苗 |
1.3.3 DNA疫苗 |
1.3.4 亚单位疫苗 |
1.3.5 活载体疫苗 |
1.3.6 重组嵌合疫苗 |
1.4 小结 |
1.5 本研究的目的与意义 |
第二章 我国部分地区PRRSV分子流行病学调查 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1 样品来源 |
2.1.2 主要试剂、仪器与耗材 |
2.1.3 主要所需溶液配制 |
2.1.4 PRRSV参考毒株 |
2.1.5 试验方法 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 样品PRRSV GP5 基因的检测 |
2.2.2 核苷酸同源性分析 |
2.2.3 氨基酸同源性分析 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 PRRSV pMLV+NADC30 嵌合病毒的构建及鉴定 |
3.1 材料和方法 |
3.1.1 主要试剂、仪器与耗材 |
3.1.2 主要细胞与毒株 |
3.1.3 主要溶液的配制 |
3.1.4 参考毒株 |
3.1.5 试验方法 |
3.2 结果 |
3.2.1 pMLV感染性克隆的构建和病毒拯救 |
3.2.2 嵌合病毒pMLV+NADC30 的构建和拯救 |
3.2.3 拯救病毒的鉴定 |
3.2.4 拯救病毒在Marc-145 细胞的生长曲线 |
3.2.5 嵌合病毒的遗传稳定性 |
3.2.6 嵌合病毒与主要流行株共感染 |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
个人简介 |
附录 |
(4)昌吉地区规模化猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征的调查及分析(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
英文缩略词表 |
引言 |
第一章 文献综述 |
1.PRRS的起源 |
2.病原学 |
2.1 PRRSV的形态结构 |
2.2 PRRSV的基因组结构 |
2.3 PRRSV的理化特点 |
2.4 PRRSV的流行病学 |
2.5 临床症状 |
3.诊断及防治 |
3.1 PRRS的诊断 |
3.2 PRRS防治措施 |
4.本项研究的目的及意义 |
第二章 昌吉地区猪繁殖与呼吸综合征的现场流行病学调查 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
1.2.1 PRRS 的诊断 |
1.2.2 现场调查及内容 |
1.2.3 数据处理 |
2 结果 |
2.1 PRRS的发病情况调查结果 |
2.2 猪场的基本环境情况调查结果 |
3 讨论与分析 |
3.1 PRRS的发病率与季节的关系 |
3.2 PRRS的发病率与猪阶段的关系 |
3.3 PRRS的发病率与疫苗免疫的关系 |
3.4 PRRS的发病率与环境的关系 |
4 小结 |
第三章 呼图壁某规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒部分流行毒株的检测 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果 |
2.1 通用美洲PRRSV的 RT-q PCR方法的评价及样品检测结果 |
2.2 类NADC-30 毒株的RT-q PCR方法的评价及样品检测结果 |
3 讨论与分析 |
3.1 美洲型PRRSV毒株的检测分析 |
3.2 类NADC-30型毒株的检测分析 |
4.小结 |
第四章 昌吉地区猪繁殖与呼吸综合征的血清学调查 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果 |
2.1 不同季度抗体检测结果汇总分析 |
2.2 不同猪群的抗体阳性率及离散度分析 |
3 讨论与分析 |
3.1 PRRS的抗体检测数据总体分析 |
3.2 三个猪场PRRS的抗体检测数据分析 |
3.3 猪群的免疫与抗体水平之间的关系分析 |
4 小结 |
全文总结 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 |
(5)新疆三个规模化猪场CSF、PR、PRRS及PCV2免疫抗体的动态检测及免疫程序优化(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略词 |
引言 |
第一章 文献综述 |
1 猪瘟的研究现状 |
1.1 病原学 |
1.2 流行病学 |
1.3 致病机理 |
1.4 临床症状 |
1.5 病理变化 |
1.6 诊断与防控 |
2 猪伪狂犬病的研究现状 |
2.1 病原学 |
2.2 流行病学 |
2.3 发病机理 |
2.4 临诊症状 |
2.5 病理变化 |
2.6 诊断及防治 |
3 猪蓝耳病的研究现状 |
3.1 病原学 |
3.2 流行病学 |
3.3 致病机理 |
3.4 临床症状 |
3.5 病理变化 |
3.6 诊断及防治 |
4 猪圆环病毒相关疾病研究现状 |
4.1 病原学 |
4.2 流行病学 |
4.3 致病机理 |
4.4 临诊症状 |
4.5 临床诊断 |
4.6 防治措施 |
5 我国当前规模化养猪场病毒性传染病的现状 |
5.1 流行病学 |
5.2 疫苗免疫 |
5.3 免疫程序 |
6 本文的研究目的与意义 |
第二章 试验研究 |
实验一 新疆不同地区三个规模化猪场CSF抗体的检测测及免疫程序优化 |
1 材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
2 实验结果 |
2.1 三个不同地区猪场猪瘟免疫抗体检测结果 |
2.2 2019 年春季猪瘟免疫抗体检测结果 |
2.3 2019 年秋季猪瘟免疫抗体检测结果 |
2.4 免疫程序优化 |
3 讨论 |
3.1 A猪场猪瘟抗体的分析 |
3.2 B猪场猪瘟抗体的分析 |
3.3 C猪场猪瘟抗体的分析 |
实验二 新疆不同地区三个规模化猪场PR抗体的检测及免疫程序优化 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 实验方法 |
2 实验结果 |
2.1 三个不同地区猪场猪伪狂犬免疫抗体检测结果 |
2.2 2019 年春季猪伪狂犬免疫抗体检测结果 |
2.3 2019 年秋季猪伪狂犬免疫抗体检测结果 |
2.4 免疫程序优化 |
3 讨论 |
3.1 A猪场伪狂犬抗体的分析 |
3.2 B猪场伪狂犬抗体的分析 |
3.3 C猪场伪狂犬抗体的分析 |
实验三 新疆不同地区三个规模化猪PRRS抗体的检测及免疫程序优化 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 实验方法 |
2 实验结果 |
2.1 三个不同地区猪场猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体检测结果 |
2.2 2019 年春季猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体检测结果 |
2.3 2019 年秋季猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体检测结果 |
2.4 猪繁殖与呼吸综合征免疫程序优化调整 |
3 讨论 |
3.1 A猪场PRRSV抗体结果分析 |
3.2 B猪场PRRSV抗体结果分析 |
3.3 C猪 PRRSV抗体结果分析 |
实验四 新疆不同地区三个规模化猪PCV2 抗体的检测及免疫程序优化 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 实验方法 |
2 实验结果 |
2.1 三个不同地区猪圆环病免疫抗体检测结果 |
2.2 2019 年春季猪圆环病免疫抗体检测结果 |
2.3 2019 年秋季猪圆环病抗体检测结果 |
2.4 猪圆环病毒病免疫程序优化调整 |
3 讨论 |
3.1 A猪场圆环抗体结果分析 |
3.2 B猪场圆环抗体结果分析 |
3.3 C猪场圆环抗体结果分析 |
全文总结 |
参考文献 |
致谢 |
附录 猪瘟抗体检测方法 |
作者简介 |
在学校期间参与的研究课题 |
在校期间发表的文章 |
附件 |
(6)PRRSV的IPMA和IFA临床抗体检测方法的建立及应用(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略词表 |
第一章 文献综述 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒概况 |
1.2 猪繁殖与呼吸综合征检测方法 |
1.2.1 临床及病理诊断方法 |
1.2.2 病毒分离检测方法 |
1.2.3 血清学检测方法 |
1.2.4 分子生物学检测技术 |
1.3 PRRSV疫苗研究进展 |
1.3.1 PRRS传统常规疫苗 |
1.3.2 PRRS新型疫苗 |
1.4 PRRSV中和抗体的保护作用 |
1.5 研究目的及意义 |
第二章 猪繁殖与呼吸综合征IPMA和IFA抗体检测方法的建立及应用 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 毒株,细胞系和抗病毒血清 |
2.1.2 主要试剂 |
2.1.3 主要溶液配制 |
2.1.4 试验仪器 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 PRRSV病毒分离及鉴定 |
2.2.2 细胞培养与接毒 |
2.2.3 建立IPMA和 IFA临床抗体检测方法 |
2.2.4 建立IPMA和 IFA临床中和抗体检测方法 |
2.2.5 IFA抗体检测方法的反应条件优化 |
2.2.6 IFA检测方法的特异性及敏感性实验 |
2.2.7 IFA检测方法的批内批间重复性,保质期实验 |
2.2.8 IDEXX ELISA试剂盒检测临床抗体 |
2.2.9 PRRSV临床抗体及效价检测 |
2.2.10 PRRSV临床中和抗体及效价检测 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 PRRSV的 PCR鉴定结果 |
2.3.2 IPMA和 IFA临床抗体检测方法的建立 |
2.3.3 IPMA和 IFA临床中和抗体检测方法的建立 |
2.3.4 IFA抗体检测方法的反应条件优化 |
2.3.5 IFA的特异性及敏感性实验 |
2.3.6 IFA的批内批间重复性,保质期实验 |
2.3.7 IFA与 IDEXX试剂盒检测方法的比较 |
2.3.8 IFA检测临床抗体效价的结果 |
2.3.9 IFA检测临床中和抗体效价的结果 |
2.3.10 抗体效价和中和抗体效价关系分析 |
2.4 讨论 |
2.5 结论 |
参考文献 |
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 |
致谢 |
(7)红茴香注射液对PRRSV和PRV的抗病毒作用及其初步机制研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
主要缩略词表 |
第一部分 文献综述 |
第一章 红茴香及红茴香注射液研究进展 |
1. 化学成分 |
2. 药理作用 |
3. 临床应用 |
4. 结语 |
第二章 PRRSV及中药抗PRRSV活性相关研究进展 |
1. PRRSV病原学 |
2. 中药体外抗PRRSV作用 |
3. 结语 |
第三章 伪狂犬病及其防治研究进展 |
1. PRV病原学 |
2. 伪狂犬病流行病学 |
3. 伪狂犬病临床表现和病理变化 |
4. 伪狂犬病的诊断 |
5. 伪狂犬病的防控 |
6. 抗伪狂犬病毒的药物 |
7. 结语 |
参考文献 |
第二部分 实验研究 |
第一章 前言 |
第二章 红茴香注射液抗PRRSV作用及其初步机制研究 |
1. 材料与仪器 |
1.1 仪器设备 |
1.2 主要试剂 |
1.3 供试药品 |
1.4 实验细胞 |
1.5 实验病毒 |
2. 实验方法 |
2.1 Marc-145细胞的复苏 |
2.2 Marc-145细胞的传代及培养 |
2.3 细胞接种与培养 |
2.4 PRRSV CH-1R株TCID_(50)测定 |
2.5 HHXI对Marc-145细胞毒性测定 |
2.6 HHXI对PRRSV的杀灭作用 |
2.7 HHXI对PRRSV的阻断作用 |
2.8 HHXI对PRRSV的抑制作用 |
2.9 流式细胞术(Flow cytometry,FCM) |
2.10 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) |
2.11 免疫荧光分析(IFA) |
2.12 免疫蛋白印迹(Western blot) |
2.13 数据分析 |
3. 实验结果 |
3.1 PRRSV毒力测定 |
3.2 HHXI对Marc-145细胞增殖的影响 |
3.3 HHXI对PRRSV的杀灭作用 |
3.4 HHXI对PRRSV吸附细胞的阻断作用 |
3.5 HHXI对PRRSV增殖的抑制作用 |
3.6 HHXI对PRRSV感染Marc-145细胞凋亡和坏死的影响 |
3.7 HHXI对感染Marc-145细胞PRRSV N蛋白mRNA表达的影响 |
3.8 HHXI对PRRSV感染Marc-145细胞PRRSVN蛋白阳性细胞数的影响 |
3.9 HHXI对PRRSV感染Marc-145细胞N蛋白表达的影响 |
3.10 HHXI对PRRSV感染Marc-145细胞炎性因子mRNA表达的影响 |
4. 分析与讨论 |
第三章 红茴香注射液抗PRV作用及其初步机制研究 |
1. 材料与仪器 |
1.1 仪器设备 |
1.2 主要 |
1.3 供试药品 |
1.4 实验细胞 |
1.5 实验病毒 |
2. 实验方法 |
2.1 细胞的复苏、传代及培养 |
2.2 细胞接种与培养 |
2.3 PRV的TCID50测定 |
2.4 HHXI对Vero细胞和BV2细胞增殖的影响 |
2.5 HHXI对PRV的杀灭作用 |
2.6 HHXI对PRV的阻断作用 |
2.7 HHXI对PRV的抑制作用 |
2.8 流式细胞术(FCM) |
2.9 HHXI对PRV诱导产生的NO的影响 |
2.10 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) |
2.11 免疫荧光分析(IFA) |
2.12 免疫蛋白印迹(Western blot) |
2.13 HHXI体内抗PRV作用评价 |
2.14 数据分析 |
3. 实验结果 |
3.1 PRV对Vero细胞和BV2细胞的毒力 |
3.2 HHXI对Vero细胞和BV2细胞增殖的影响 |
3.3 HHXI对PRV的杀灭作用 |
3.4 HHXI对PRV吸附细胞的阻断作用 |
3.5 HHXI对PRV增殖的抑制作用 |
3.6 HHXI对PRV感染Vero细胞凋亡和坏死的影响 |
3.7 HHXI对PRV gD基因表达的影响 |
3.8 HHXI对PRV感染Vero细胞病毒阳性细胞数的影响 |
3.9 HHXI对PRV感染Vero细胞病毒蛋白表达的影响 |
3.10 HHXI对PRV诱导BV2细胞产生NO的影响 |
3.11 HHXI对PRV感染BV2细胞炎性因子mRNA表达的影响 |
3.12 HHXI对PRV感染BV2细胞MAPK和NF-κB蛋白表达的影响 |
3.13 HHXI对小鼠的毒性反应 |
3.14 HHXI体内抗PRV作用 |
3.15 HHXI对PRV感染小鼠脑组织病理变化的影响 |
3.16 HHXI对PRV感染小鼠脑组织病毒载量的影响 |
3.17 HHXI对PRV感染小鼠脑组织中炎性因子mRNA表达的影响 |
4. 分析与讨论 |
结论 |
参考文献 |
硕士期间发表论文 |
致谢 |
(8)猪瘟免疫群抗体与病毒变异监测及病毒亚单位疫苗的免疫效果评价(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
英文缩略词 |
引言 |
第1章 文献综述 |
1.1 猪瘟(CSFV)流行情况概述 |
1.1.1 国外猪瘟流行情况 |
1.1.2 国内猪瘟流行情况 |
1.2 CSFV特征与变异 |
1.2.1 CSFV生物学特性 |
1.2.2 CSFV基因组结构及功能 |
1.2.3 我国CSFV遗传变异多样性 |
1.3 猪非典型瘟病毒 |
1.3.1 CT类型 |
1.3.2 APPV流行情况 |
1.3.3 临床症状及病理变化 |
1.3.4 防治措施 |
1.4 猪瘟疫苗研究进展 |
1.4.1 核酸疫苗 |
1.4.2 基因缺失疫苗 |
1.4.3 活载体疫苗 |
1.4.4 基因工程亚单位技术 |
1.5 CSFV实验室检测方法研究进展 |
1.5.1 血清学检测 |
1.5.2 分子生物学检测 |
1.6 猪瘟防控技术与策略展望 |
1.7 本研究的目的意义 |
第2章 2015-2017 年国内猪场猪瘟抗体监测与初步分析 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 材料 |
2.1.2 方法 |
2.2 结果 |
2.2.1 调查猪场数量及区域分布 |
2.2.2 调查猪场不同规模数量 |
2.2.3 国内调查猪场各区域样品猪瘟抗体监测结果 |
2.2.4 调查猪场不同生产阶段样品猪瘟抗体监测结果 |
2.2.5 调查猪场样品猪瘟抗体平均阻断率各水平比例结果 |
2.2.6 调查猪场不同月份样品猪瘟抗体监测结果 |
2.2.7 调查猪场不同年份样品猪瘟抗体监测结果 |
2.3 讨论 |
2.3.1 调查猪场不同区域样品猪瘟抗体监测分析 |
2.3.2 调查猪场不同生产阶段样品猪瘟抗体监测结果 |
2.3.3 调查猪场不同月份样品猪瘟抗体监测结果 |
2.3.4 调查猪场不同年份样品猪瘟抗体水平及各水平比例监测结果分析 |
2.4 小结 |
第3章 国内猪瘟病毒感染调查与分析 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 材料 |
3.1.2 方法 |
3.2 结果 |
3.2.1 RT-PCR检测结果 |
3.2.2 2015 -2017 年猪瘟病毒感染率 |
3.2.3 猪瘟病毒感染季度阳性率 |
3.2.4 猪瘟病毒与常见病毒性疾病混感比例 |
3.3 讨论 |
3.3.1 猪瘟病毒感染情况 |
3.3.2 猪瘟病毒与其他病毒混合感染情况 |
3.4 小结 |
第4章 山东和河南两地流行的猪瘟病毒E2基因遗传变异分析 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 病料来源 |
4.1.2 主要试剂与仪器 |
4.1.3 引物设计 |
4.1.4 病料核酸纯化 |
4.1.5 E2 基因RT-PCR扩增 |
4.1.6 E2 基因序列分析 |
4.2 结果 |
4.2.1 E2 基因RT-PCR结果 |
4.2.2 E2 基因核苷酸及氨基酸序列同源性分析 |
4.2.3 E2 基因遗传进化关系分析 |
4.3 讨论 |
4.3.1 猪瘟野毒E2 基因遗传变异分析 |
4.3.2 18 株流行毒株E2 基因遗传变异分析 |
4.4 小结 |
第5章 非典型瘟病毒初步鉴定分析 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 材料 |
5.1.2 方法 |
5.2 结果 |
5.2.1 临床症状及剖检症状 |
5.2.2 组织病理切片结果 |
5.2.3 RT-PCR结果 |
5.2.4 序列结果分析 |
5.3 讨论 |
5.4 小结 |
第6章 猪瘟基因工程亚单位疫苗与猪瘟弱毒活疫苗的免疫效果评价 |
6.1 材料与方法 |
6.1.1 材料 |
6.1.2 方法 |
6.2 结果与分析 |
6.2.1 猪瘟抗体结果 |
6.2.2 猪繁殖与呼吸综合征抗体结果 |
6.3 讨论 |
6.3.1 猪瘟抗体变化 |
6.3.2 猪繁殖与呼吸综合征对猪瘟抗体的影响 |
6.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
导师简介 |
作者简介及攻读学位期间发表的学术成果 |
致谢 |
(9)云南省部分地区猪繁殖与呼吸综合征分子流行情况调查及防治措施研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
英文缩略词表 |
第一篇 文献综述 |
第1章 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)研究进展 |
1.1 PRRS流行情况 |
1.2 PRRSV的病原学特性 |
1.3 PRRSV基因组结构 |
1.4 PRRSV的主要蛋白 |
1.5 PRRSV感染诱导NF-κB信号通路的研究进展 |
第2章 中药抗病毒研究进展 |
2.1 中药抗病毒活性成分 |
2.2 中药抗病毒的作用机理和途径 |
2.3 药材的来源及主要药理作用 |
第二篇 实验内容 |
第1章 云南省部分地区规模化猪场PRRS感染状况调查和流行毒株分离 |
1.1 材料与方法 |
1.2 结果 |
1.3 讨论 |
1.4 小结 |
第2章 PRRSV云南流行毒株全基因序列分析 |
2.1 材料与方法 |
2.2 结果 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第3章 中药“黄氏蓝瘟康”对PRRSV抑制效果评价 |
3.1 材料与方法 |
3.2 结果 |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
第4章 中药“黄氏蓝瘟康”在PRRSV防控中的临床应用效果. |
4.1 材料和方法 |
4.1.1 材料 |
4.1.2 方法 |
4.2 结果 |
4.3 讨论 |
4.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
附录 |
导师简介 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
致谢 |
(10)2015~2017年国内部分地区PRRSV分子流行病学调查及PRRSV-TJ毒株疫苗评价(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
英文缩略词 |
引言 |
第1章 文献综述 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征概述 |
1.2 PRRS的分子生物学特征及研究进展 |
1.2.1 形态结构及理化性质 |
1.2.2 基因组结构 |
1.2.3 PRRSV的主要蛋白 |
1.3 PRRSV遗传变异 |
1.4 致病机制与临床表现 |
1.4.1 致病机制 |
1.4.2 PRRS的临床症状 |
1.4.3 剖检病变 |
1.4.4 镜检病变 |
1.5 PRRS的防治 |
1.6 PRRS的流行病学 |
1.7 国内PRRS的流行特点 |
1.7.1 猪场感染率高 |
1.7.2 病毒毒株多,变异速度快 |
1.7.3 临床表现复杂 |
1.7.4 猪场持续循环感染 |
1.8 PRRSV的免疫特点 |
1.8.1 抗PRRSV感染的体液免疫反应 |
1.8.2 抗PRRSV感染的细胞免疫 |
1.8.3 抗体依赖性增强作用 |
1.8.4 PRRSV感染与免疫抑制 |
1.9 PRRS诊断方法研究 |
1.9.1 病毒的分离与鉴定 |
1.9.2 酶联免疫吸附试验(ELISA) |
1.9.3 免疫过氧化酶单层试验 |
1.9.4 免疫荧光技术 |
1.9.5 聚合酶链反应 |
1.9.6 基因芯片 |
1.10 猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究状况 |
1.10.1 猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗 |
1.10.2 猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗 |
1.10.3 猪繁殖与呼吸综合征新型疫苗 |
1.11 猪繁殖与呼吸综合征防控对策 |
1.11.1 谨慎引种并做好引种检疫。 |
1.11.2 制定科学的免疫程序并严格实施。 |
1.11.3 加强对猪群的饲养管理。 |
1.12 本研究的目的意义 |
第2章 2015 年~2017 年国内部分地区猪繁殖与呼吸综合征流行情况分析 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 材料 |
2.1.2 方法 |
2.2 结果 |
2.2.1 RT-PCR检测结果 |
2.2.2 2015 年~2017 年国内部分省份猪繁殖与呼吸综合征样品数 |
2.2.3 2015 年~2017 年国内部分省份猪繁殖与呼吸综合征感染阳性率 |
2.2.4 2015 年~2017 年对猪繁殖与呼吸综合征感染率的时间规律调查 |
2.2.5 2015 年~2017 年对猪繁殖与呼吸综合征感染率的空间规律调查 |
2.2.6 2015 年~2017 年猪繁殖与呼吸综合征阳性样品中猪群不同阶段感染率 |
2.2.7 2015 年~2017 年猪繁殖与呼吸综合征在不同症状类型的规律调查 |
2.2.8 2015 年~2017 年猪繁殖与呼吸综合征混合感染情况调查 |
2.3 讨论 |
2.3.1 猪繁殖与呼吸综合征不同年份感染情况 |
2.3.2 猪繁殖与呼吸综合征不同时间与空间感染情况 |
2.3.3 猪繁殖与呼吸综合征在猪群不同阶段情况 |
2.3.4 猪繁殖与呼吸综合征在猪群中的不同症状及混感 |
2.4 小结 |
第3章 2015 年~2017 年国内猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异分析 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 病毒样品 |
3.1.2 主要试剂 |
3.1.3 PRRSV GP5 测序 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 RT-PCR检测结果 |
3.2.2 分离毒株与代表毒株进化树: |
3.2.3 分离毒株与标准毒之间核苷酸及氨基酸同源性分析 |
3.2.4 氨基酸序列进化分析 |
3.2.5 与2014 年分离毒株结果对比: |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
第4章 2015 年~2017 年国内部分猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体监测与初步分析 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 材料 |
4.1.2 方法 |
4.2 结果 |
4.2.1 调查猪场数量及区域分布 |
4.2.2 调查猪场不同规模数量 |
4.2.3 调查国内各区域猪场样品猪繁殖与呼吸道综合征抗体监测结果 |
4.2.4 调查猪场不同季度样品猪繁殖与呼吸综合征抗体监测结果 |
4.2.5 调查猪场不同生产阶段样品猪繁殖与呼吸综合征抗体监测结果 |
4.2.6 不同分布区间猪繁殖与呼吸综合征抗体比例 |
4.3 讨论 |
4.3.1 不同猪场分布情况及猪场规模分布分析 |
4.3.2 我国不同空间、不同时间猪繁殖与呼吸综合征抗体监测分析 |
4.3.3 猪群不同阶段猪繁殖与呼吸综合征抗体检测调查结果分析 |
4.3.4 猪繁殖与呼吸综合征抗体在不同区间比例分析 |
4.4 小结 |
第5章 高致病性蓝耳病弱毒疫苗(TJM-F92 株)安全性及有效性实验 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 材料 |
5.1.2 检测方法: |
5.2 结果 |
5.2.1 田间免疫高致病蓝耳疫苗(TJM-F92)检验TJM-F92 株蓝耳苗安全性评估 |
5.2.2 田间免疫高致病蓝耳疫苗(TJM-F92)观察免疫TJM-F92株蓝耳苗有效性 |
5.2.3 实验室分开免疫猪瘟疫苗(脾淋苗)与蓝耳疫苗(TJM-F92)结果 |
5.2.4 实验室同时联合免疫猪瘟疫苗(脾淋苗)与蓝耳疫苗(TJM-F92)结果 |
5.3 讨论 |
5.4 小结 |
结论 |
本文的创新点 |
参考文献 |
导师简介 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
致谢 |
四、猪繁殖与呼吸综合征的研究进展(论文参考文献)
- [1]规模化母猪场五种疫病血清学监测及部分病原鉴定、免疫程序调整[D]. 宋健颖. 塔里木大学, 2021(08)
- [2]14种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用研究[D]. 耿世晴. 河北科技师范学院, 2021(08)
- [3]2019~2020年我国部分地区PRRS流行病学调查及PRRSV嵌合病毒pMLV+NADC30的构建[D]. 王玥. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [4]昌吉地区规模化猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征的调查及分析[D]. 戴鑫鑫. 石河子大学, 2020(05)
- [5]新疆三个规模化猪场CSF、PR、PRRS及PCV2免疫抗体的动态检测及免疫程序优化[D]. 马铭. 石河子大学, 2020(08)
- [6]PRRSV的IPMA和IFA临床抗体检测方法的建立及应用[D]. 高小静. 郑州大学, 2020(02)
- [7]红茴香注射液对PRRSV和PRV的抗病毒作用及其初步机制研究[D]. 苗灵燕. 浙江大学, 2020(01)
- [8]猪瘟免疫群抗体与病毒变异监测及病毒亚单位疫苗的免疫效果评价[D]. 马振乾. 吉林大学, 2019(02)
- [9]云南省部分地区猪繁殖与呼吸综合征分子流行情况调查及防治措施研究[D]. 毕峻龙. 吉林大学, 2019(02)
- [10]2015~2017年国内部分地区PRRSV分子流行病学调查及PRRSV-TJ毒株疫苗评价[D]. 刘晓东. 吉林大学, 2019(02)