一、丹酚酸B镁盐抑制低氧诱导内皮细胞钙内流和一氧化氮释放(英文)（论文文献综述）
朱晓婷[1]（2021）在《解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究》文中研究表明选题依据:阿尔茨海默病（AD）致残、致死率高,发病机制复杂,大脑内Aβ异常沉积是AD发生发展的重要病理变化及核心环节,前期研究已证实了解毒益智方具有抑制AD线虫头部Aβ斑块沉积及相关基因表达的作用,随之开展的随机对照临床研究证实解毒益智方应用6个月后MMSE、MoCA、ADL评分变化明显优于口服尼莫地平片的对照组。黄连为解毒益智方中的君药,为该方的主要成分,在本方中发挥“解毒”的重要功效。经查阅国内外文献发现黄连中发挥“解毒”作用的主要物质为黄连多糖（CCP）,因此设计体外细胞实验探究解毒益智方中的君药黄连的主要有效成分CCP对Aβ25-35损伤PC12的保护作用,为“毒损”的病机及“解毒”的治法提供理论依据,为后续研究提供研究基础。因前期开展的研究均是以单基因单细胞的生物为研究对象,不能很好地模拟AD的疾病特点,因此选用APP/PS1双转基因小鼠作为研究对象,该小鼠很好的模拟了中枢神经系统Aβ异常沉积的状态,通过对小鼠的行为学研究及分子生物学研究,进一步评价解毒益智方的治疗作用。目的:通过体外细胞实验探讨基于“补肾益髓、活血化痰解毒”法形成的解毒益智方其中君药的有效成分CCP对Aβ25-35损伤PC12的保护作用。通过行为学、分子生物学等研究手段,对APP/PS1小鼠的认知功能、Aβ沉积、BACE1表达的相关蛋白、基因等方面进行检测和分析,探讨解毒益智方对APP/PS1小鼠的作用机制,为中药治疗AD的推广应用提供可靠的研究证据。方法:1.本研究分别从体外实验、动物实验探究解毒益智方的作用机制。体外实验部分采用MTT还原法、Hoechst33258荧光染色等方法对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤模型进行线粒体活性、细胞活力、细胞凋亡的测定,探究CCP对PC12细胞的保护作用。动物实验部分选用APP/PS1双转基因小鼠为研究对象,随机分为5组,分别是模型组（APP/PS1组）、盐酸多奈哌齐组（Donepezil组）、解毒益智方低剂量组（JDYZFL组）、解毒益智方中剂量组（JDYZFM组）、解毒益智方高剂量组（JDYZFH组）,每组16只小鼠,另选用16只C57小鼠作为正常对照组（Control组）,于每日早晨8:30进行灌胃治疗,各组每日灌胃药物及剂量分别是,正常组和模型组0.5%CMC溶液0.20g·kg-1·d-1;阳性对照组:盐酸多奈哌齐溶液0.30g·kg-1·d-1;解毒益智方高、中、低剂量组药物浓度依次为0.60g·kg-1·d-1,0.3g·kg-1·d-1,0.15g·kg-1·d-1。持续6个月治疗结束。2.以Aβ25-35损伤的PC12细胞为研究对象,通过测定细胞活力、LDH释放率、细胞凋亡率、和线粒体膜电位的水平等评价CCP的神经保护作用。3.通过水迷宫实验,记录解毒益智方对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响。4.通过ELISE及免疫荧光法检测APP/PS1小鼠脑内Aβ水平的变化,观察解毒益智方对APP/PS1小鼠脑内Aβ沉积的影响。5.采用PCR方法检测脑组织SIRT1、NF-κB、BACE1基因量变化,并进一步采用Western blot方法检测大脑皮层内SIRT1、BACE1、NF-κB蛋白的变化,观察解毒益智方对APP/PS1小鼠脑内AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1转运蛋白通路SIRT1、BACE1、NF-κB的影响。结果:1.通过体外研究观察CCP对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响PC12细胞活力测定结果显示:PC12细胞经过浓度为5-50μM的Aβ25–35处理24h后,细胞活力随着Aβ25–35浓度的增加从24%下降至61%。当Aβ25–35在浓度范围为5至50μM时引起PC12细胞中LDH释放增加至对照组的约130-160%。在用不同浓度的CCP（5至200μg/ml）处理PC12细胞24h后,未观察到显着的细胞损失。通过Hoechst33258染色及FCM测定细胞凋亡结果显示:细胞核在荧光显微镜下具有显着的浓缩核和凋亡的细胞形成。与在未处理的PC12细胞中观察到的完整,圆形和相对大的细胞核相比,暴露于50μMAβ25–35 24h的细胞显示出典型的细胞凋亡特征,包括染色质浓缩,核碎裂和凋亡小体的出现。用CCP不同浓度（5,25,50,100,200μg/ml）处理后可有效逆转细胞凋亡,其中100μg/ml效果最明显,FCM分析显示单独暴露于50μMAβ25–35 24h导致58.88±6.12%的凋亡率,这与正常对照组中的7.21±0.82%的值显着不同（P<0.01）。加入100μg/ml的CCP后,细胞凋亡下降至12.51±1.32%。通过JC-1红色荧光与JC-1绿色荧光的比率的变化来检测Aβ诱导的线粒体功能障碍结果显示:当PC12细胞暴露于50μM的Aβ25–35中24h后,与正常对照组相比,显着减弱了JC-1的红色荧光比例,提高了JC-1绿色荧光比例（P<0.01）。用CCP（100μg/ml）预处理Aβ25–35处理的PC12细胞显着抵消了Aβ25–35损伤引起的膜电位损失,JC-1从Aβ25–35处理的PC12细胞中的22.1%变为绿色荧光至84.3%,与正常对照组相近（P>0.05）。通过蛋白质印迹法检测细胞色素C结果显示:经50μMAβ25–35处理PC12细胞24h后细胞色素C在细胞质中的蛋白质表达增加,而预先用CCP（100μg/ml）处理的PC12细胞显着减弱线粒体释放的胞质细胞色素C。2.观察JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的影响。水迷宫实验结果显示:随着实验天数的后移,各组小鼠潜伏期、路径长度、游泳距离均有所缩短,表明随着训练次数的增加各组小鼠对象限平台的定位记忆能力随之有所提升。与Control组相比,APP/PS1组逃避潜伏期、路径长度、游泳距离均明显延长,差异显着（P<0.01）。首次到达平台的时间明显延长,目标停留次数明显减少,差异显着（P<0.01）。与APP/PS1组相比,Donepezil组、JDYZFL组、JDYZFM组逃避潜伏期、路径长度、游泳距离有所缩短,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。首次到达平台的时间缩短,目标停留次数增多,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与Donepezil组相比,JDYZFL组作用与其相当,JDYZFM组略优于Donepezil组,差异有统计学意义（P<0.05）。干预治疗6个月的12月龄小鼠的定位航行实验及空间搜索实验结果优于干预治疗3个月的9月龄小鼠,差异有统计学意义（P<0.05）。3.观察JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ沉积的影响。各组小鼠结果如下:与Control组比较,APP/PS1组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积极数量明显增多,具有极显着统计学意义（P<0.01）。与APP/PS1组相比,JDYZFL组、JDYZFM组及Donepezil组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量不同程度降低,具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与Donepezil组比较,JDYZFM组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。通过免疫荧光法测得小鼠大脑皮层内Aβ表达发现,Control组只产生微量Aβ,而APP/PS1组Aβ表达量明显增高,经过用药干预后,12月龄干预组小鼠可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量较9月龄小鼠明显减少,免疫荧光标记从宏观上可以发现干预组Aβ沉积明显减少,APP/PS1组Aβ沉积明显增多。4.调控BACE1表达的相关因子结果（1）PCR检测结果各组小鼠进行的PCR检测结果显示:与Control组相比,APP/PS1组小鼠大脑皮层内BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量明显增高,SIRT1/GAPDH明显降低,差异有显着统计学意义(（P<0.01）。与APP/PS1组相比,Donepezil组、JDYZFL组及JDYZFM组小鼠海马体内BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量不同程度降低,SIRT1/GAPDH表达含量不同程度增高,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。JDYZFH组在NF-κB/GAPDH表达上无统计学差异。与Donepezil组相比,JDYZFL组及JDYZFM组BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量不同程度降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。PCR结果证实药物干预组可通过提高SIRT1mRNA的含量降低NF-κBmRNA、BACE1mRNA的表达,从而抑制Aβ的产生而起到神经保护的作用。各治疗组大脑皮层Aβ的表达均有所降低。连续灌胃6个月的各组小鼠与连续灌胃3个月的小鼠相比,除APP/PS1组及Control组,其他各组SIRT1mRNA的表达均有所提高,NF-κBmRNA、BACE1mRNA的表达均有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（2）Westorn blot检测结果各组小鼠的Western blot检测结果显示:与Control组相比,APP/PS1组小鼠大脑皮层SIRT1的蛋白表达明显降低,NF-κB、BACE1蛋白表达显着升高（P<0.01）。与APP/PS1相比,Donepezil组、JDYZFL组、JDYZFM组BACE1、NF-κB表达降低,SIRT1蛋白表达增高差异有统计学意义（P<0.05）。与Donepezil比较,JDYZFL组、JDYZFM组NF-κB蛋白表达有所降低,差异有统计学意义（P<0.05）。JDYZFL组SIRT1、BACE1蛋白表达无显着差异,JDYZFM组SIRT1表达有所提高,BACE1蛋白表达量略有降低,差异有统计学意义（P<0.05）。经过为期3个月及6个月的干预后,各治疗组大脑皮层Aβ的表达均有所降低。连续灌胃6个月的各组小鼠与连续灌胃3个月的小鼠相比,除APP/PS1组及Control组,其他各组SIRT1的蛋白表达均有所提高,NF-κB、BACE1蛋白的表达均有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1 CCP能够保护Aβ25-35损伤的PC12细胞,其机制可能与提高细胞活力、抑制细胞凋亡、减少LDH释放、阻断膜电位的丧失,并阻止线粒体细胞色素C释放,修复线粒体功能障碍有关。2 JDYZF各剂量组可不同程度提高APP/PS1双转基因小鼠定位航行实验及空间搜索实验的成绩,说明JDYZF可改善小鼠空间学习及记忆能力。3 JDYZF可不同程度降低APP/PS1双转基因小鼠大脑皮层内Aβ的异常沉积。4 JDYZF抑制BACE1的异常表达,其作用机制可能是通过调控大脑内AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1信号通路的相关因子表达实现的。
曹姗[2]（2021）在《基于JAK2/STAT3信号通路探讨黄芩苷对缺血性脑水肿的保护作用机制》文中研究指明目的:体内体外实验相结合,体内实验探讨黄芩苷对缺血性脑水肿的治疗作用及机制;以及在此基础上设计体外实验探讨缺血缺氧状态下内皮细胞水肿、内皮炎症与JAK2/STAT3信号通路的相关性。方法:第一部分——体内实验探讨黄芩苷对缺血性脑水肿大鼠的保护作用——建立大鼠缺血/再灌注实验模型,通过比较神经行为学评分比值的变化、脑梗死面积大小、脑组织皮层区超微结构以及病理学形态变化,评价黄芩苷对缺血/再灌注损伤大鼠脑组织的保护作用;通过观察脑组织含水量变化、核磁共振T2WI、DWI序列下水肿程度,评价黄芩苷对缺血性脑水肿的保护作用;依据脑组织及血清内一氧化碳（NO）、炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达,以及观察免疫印迹、免疫组化JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达变化情况,考察脑缺血/再灌注损伤后缺血性脑水肿与炎症反应的关系及黄芩苷通过JAK2/STAT3信号通路治疗缺血性脑水肿的影响。第二部分——体外实验探讨黄芩苷对氧糖剥夺内皮细胞的作用机制——选择黄芩苷进行细胞水平的研究,首先建立脑内皮细胞培养体系,CCK8法评价黄芩苷对正常培养24h脑内皮细胞细胞活力的影响;依据前期实验基础和参考文献摸索缺氧复氧条件,建立糖氧剥夺（oxygen glucose deprivation,OGD）损伤模型,应用JAK2抑制剂AG490,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,观察激光共聚焦下内皮细胞水肿情况,检测细胞分泌的炎性因子含量变化,蛋白免疫印迹观察JAK2/STAT3信号通路蛋白表达量的变化,深入探究黄芩苷发挥作用的机制。结果:第一部分:与模型组比较,黄芩苷低剂量组(10mg·kg-1)和黄芩苷高剂量组(20mg·kg-1)可降低大鼠24h神经行为学评分分值,改善神经学行为;能够明显减少脑缺血再灌注后脑梗死面积,显着降低大鼠脑含水量情况,且黄芩苷高剂量组(20mg·kg-1)优于黄芩苷低剂量组(10mg·kg-1);核磁T2WI和DWI序列中,黄芩苷高剂量组(20mg·kg-1)和黄芩苷低剂量组(10mg·kg-1)均可减弱大鼠皮层、海马和纹状体区的信号强度,脑梗死区域减少,水分子弥散情况缓解,黄芩苷高剂量组效果较黄芩苷低剂量组显着,皮层与纹状体区结果对比黄芩苷对大鼠脑组织皮层水肿的效果较好;电镜和病理结果显示黄芩苷可改善内皮细胞崩解和毛细血管塌陷情况,缩小细胞间隙,改善紧密连接破坏情况,神经元变性、坏死受到抑制,一定程度上改善再灌注损伤大鼠皮层区超微结构和病理结构损伤;黄芩苷可明显降低血清及脑组织中一氧化氮（NO）含量,能够抑制血清及脑组织中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,增加IL-10的表达;免疫蛋白印迹结果显示黄芩苷可能通过JAK2/STAT3信号通路抑制炎症反应发挥保护作用,与免疫组化结果相互印证。第二部分:首先摸索黄芩苷对正常培养的脑内皮细胞细胞活力和缺氧条件,选用黄芩苷8μmol·ml-1浓度进行后续实验;流式细胞仪检测黄芩苷可减轻损伤内皮细胞凋亡情况;采用激光共聚焦技术观察细胞水肿情况,黄芩苷能够有效减轻内皮水肿程度,降低炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-17的表达;应用抑制剂AG490后,JAK2/STAT3信号通路相关蛋白水平表达结果与体内实验结果相互印证,黄芩苷能够抑制氧糖剥夺内皮细胞内炎性因子的表达、减轻细胞肿胀和阻断JAK2/STAT3信号通路的激活。结论:结合体内和体外实验结果表明黄芩苷能够减轻缺血性脑水肿大鼠皮层水肿,通过JAK2/STAT3信号通路调节炎性因子的表达,从而抑制炎症反应以降低内皮细胞水肿和抑制内皮炎症的发生,起到保护脑组织的作用。
田佳乐[3]（2021）在《“良关系”丹参-降香药对效应物质咖啡酸异丙酯抗脑缺血作用机制的研究》文中提出缺血性脑卒中是一种因脑动脉栓塞引起的脑血流量短暂或永久减少的脑血管疾病,严重危害人类的身体健康和生活质量。丹参具有活血化瘀之效,降香具有活血理气之功,二者配伍可以活血祛瘀、行气止痛,用于心脑血管疾病的治疗。本课题组前期研究发现丹参-降香药对配伍后产生了一种区别于单用组的代谢产物咖啡酸异丙酯（KYB）,并推测其为丹参-降香药对抗脑缺血的效应物质,目前关于KYB抗脑缺血的作用及机制尚不清楚,本论文基于课题组前期的研究,从血管保护、抗氧化应激的角度初步探讨KYB抗脑缺血的作用及其机制,完成丹参-降香的体内代谢效应物质KYB的药理辨识,具体内容包括以下几个方面:1.本章在建立大脑中动脉阻塞（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型的基础上,研究香丹注射液和KYB抗脑缺血的作用。采用激光多普勒血流成像灌注仪监测各组大鼠脑血流量的变化;TTC染色（TTC staining）测定脑梗死面积;Western Blot检测IL-Iβ（Interleukin-1 beta）、HIF-1α（Hypoxia-inducible factor-1α）及NF-κB（NF-kappa B,NFκB）的表达。结果显示香丹注射液和KYB高、中剂量组（16、8 mg/kg）可以显着改善脑血流量、降低脑梗死面积,增加HIF-1α的表达、降低IL-Iβ及NFκB的表达,说明香丹注射液和KYB可以通过增加脑血流量,降低炎症反应改善脑缺血损伤,同时,高剂量组的KYB可以发挥与香丹注射液相似的药效,提示KYB是香丹注射液的体内效应物质。2.本章采用离体血管实验初步探讨香丹注射液和KYB舒张血管、改善血管内皮损伤的作用及机制。分别采用乙酰胆碱评价模型后药物干预组大鼠血管的内皮功能、累计浓度药物刺激对正常大鼠血管的张力影响;并观察DAHP（GTPCH1抑制剂）及L-NAME（eNOS抑制剂）对香丹注射液和KYB舒张血管作用的影响;Western Blot测定中动脉中eNOS和iNOS的表达;ELISA试剂盒检测脑组织中NO的含量。结果表明,香丹注射液和KYB可能通过影响人鸟苷三磷酸环化水解酶1-四氢生物蝶呤-内皮型一氧化氮合成酶-一氧化氮（Guanosine triphosphate cyclohydrolase1-tetrahydrobiopterin-endothelial nitric oxide synthase-nitric oxide,GTPCH1-BH4-eNOS-NO）通路舒张血管,发挥抗脑缺血作用。3.建立大鼠脑微血管内皮细胞（RBMEC）氧糖剥夺（Oxygen glucose deprivation,OGD）模型,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率及活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的含量、Western Blot检测相关蛋白的表达水平;ELISA试剂盒测定细胞中NO的含量。结果显示香丹注射液和KYB高、中剂量组(10-5、10-8mol/L)可以抑制细胞凋亡,增加eNOS的表达,降低NFκB、p-NFκB及iNOS的表达,提高NO的含量,降低ROS水平。表明香丹注射液和KYB可以改善缺氧缺糖诱导的内皮细胞损伤,其机制可能与抑制细胞凋亡、激活eNOS产生NO有关。
黄雅娜[4]（2020）在《基于AKT和MAPK信号通路探讨丹酚酸B对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞氧化应激的调控作用》文中提出目的通过建立血管紧张素II（Angiotensin II,Ang II）诱导的人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）氧化应激模型,采用丹酚酸B（Salvianolic acid B,SalB）干预观察治疗效果,分析其抑制该氧化应激反应的过程,并探讨SalB的药理机制。方法1.采用MTT法筛选对HUVEC无毒性的SalB药物干预浓度;后采用Ang II干预HUVEC建立氧化应激反应模型,用相对应的荧光探针检测活性氧（ROS）、一氧化氮（NO）和细胞内钙离子浓度变化,TAB法检测丙二醛（MDA）含量;2.Western Blot法检测细胞内p-ERK1/2、ERK1/2、p-JNK、JNK、p-p38、p38、PI3K、p-AKT、AKT、p-NRF2、NRF2、NOX2、HO-1蛋白的表达水平。结果1.MTT检测显示,25μM、50μM、100μM的SalB干预HUVEC对细胞活力影响无统计学差异,表明所采用浓度对HUVEC无毒性。与Control组比较,HUVEC经1μM Ang II诱导后,细胞内ROS水平和MDA含量显着增加,而NO含量则显着降低。与Ang II组比较,给予SalB预处理后,细胞内ROS和MDA含量显着减少,NO含量明显升高,细胞内钙离子的释放增加。2.Western Blot法检测显示,1μM Ang II诱导能上调NOX、p-ERK、p-p38、p-JNK的蛋白表达,且下调PI3K、p-AKT、p-NRF2、HO-1的蛋白表达;SalB预处理能显着上调HUVEC细胞内的ERK1/2、p38、JNK、PI3K、AKT、NRF2的磷酸化水平与HO-1的蛋白表达,并抑制NOX2蛋白表达。结论1.SalB可通过抑制Ang II诱导的ROS和MDA含量的增加,并提高HUVEC内NO的水平,从而起到抗氧化的作用。2.SalB可增加Ang II刺激下的HUVEC内钙离子浓度的释放。3.SalB可进一步增强Ang II诱导的PI3K/AKT及MPAK（ERK1/2、p38、JNK）信号通路的活化,通过激活NRF2/HO-1信号通路抑制Ang II诱导的HUVEC氧化应激反应,减轻内皮细胞损伤,从而保护内皮细胞。
张柔[5]（2020）在《针刺疗法结合自拟蹊径通脉汤对心肌梗死大鼠瞬时外向钾离子通道Kv4.3、KChIP2蛋白表达的影响》文中研究指明目的:本实验通过高脂喂养结合盐酸异丙肾上腺素注射诱导急性心肌梗死大鼠模型,研究针刺疗法结合自拟蹊径通脉汤对急性心肌梗死大鼠心肌细胞瞬时外向钾离子通道相关蛋白Kv4.3及其辅助蛋白KCh IP2蛋白表达量的调控作用,在离子通道层面探究针刺结合蹊径通脉汤治疗急性心肌梗死的可能机制并验证其优势。材料与方法:健康SPF级雄性SD大鼠65只,体重（200±20g）,按照随机数字表随机抽取10只作为空白对照组,维持饲料喂养3周,其余55只大鼠高脂饮食喂养3周（高脂组）。65只大鼠均使用10%的水合氯醛,采用大鼠左下腹腹腔注射方式进行麻醉。仰卧位固定于操作台上,使用Powerlab八通道生理记录仪,描记小鼠正常状态下的Ⅱ导联心电图。空白对照组大鼠采用四肢根部皮下一次性多点注射生理盐水（85mg/kg）,其余55只高脂组使用相同的方式注射盐酸异丙肾上腺素（85mg/kg）制备大鼠急性心肌梗死模型,所有大鼠均间隔24h注射第二次后,再次进行心电图描记。根据造模前后心电图T波电压,ST段以及QRS波的变化情况,判定造模是否成功。将造膜成功的40只大鼠随机分成模型组、针药结合组、针刺组、西药组,每组10只。造模成功24H后,开始为期15天的人工干预治疗。空白组与模型组每日分别于8时、18时灌胃服生理盐水,针药结合组每日于8时、18时灌胃服蹊径通脉汤,同时每日10时使用“华佗牌”针灸针（0.18mm×25mm）对大鼠进行针刺治疗,采用刺入大鼠各穴位皮下约2mm的标准进行针刺;大鼠稳定后,接通电针仪,使用疏密波,频率2-20Hz,电流强度以针刺穴位出现轻微颤动为宜,留针15min。针刺组大鼠仅单纯进行针刺治疗,操作方法同上,日一次,连续15天;西药组大鼠每日于8时、18时灌胃服阿司匹林、单硝酸异山梨酯按体重等比例换算后制成的水溶液。治疗过程中记录大鼠一般生活状态,治疗后标记大鼠心电图,使用ELISA技术检测大鼠血清中hs-CRP表达量,采用Western blot技术检测大鼠心肌细胞中Kv4.3、KCh IP2的蛋白表达量。结果:1.与对照组相比,模型组大鼠心电图T波电压明显降低,ST段显着抬高,QRS波增宽,变化具有统计学意义（P<0.05）;与模型组相比,针药结合组、针刺组、西药组T波电压均有回升,ST段回落,QRS波缩短（P<0.05）,且针药结合组大鼠心电图指标变化最为明显,西药组与针刺组对比变化无明显差异（P>0.05）。2.与对照组相比,模型组大鼠血清中hs-CRP表达量明显升高（P<0.05）,与模型组相比,针药结合组、针刺组、西药组大鼠血清中hs-CRP表达量明显减少（P<0.05）,其中针药结合组表达量减少最多,西药组与针刺组对比血清中hs-CRP表达量变化无明显差异（P>0.05）。3.与对照组相比,模型组大鼠心肌细胞Kv4.3、KCh IP2的蛋白表达量均降低（P<0.05）。与模型组相比,针药结合组、针刺组、西药组大鼠心肌细胞Kv4.3、KCh IP2的蛋白表达量均显着升高（P<0.05）,其中针药结合组升高最为明显,西药组与针刺组对比升高幅度无明显差异（P>0.05）。结论:1.针刺疗法结合蹊径通脉汤对急性心肌梗死大鼠具有良好的治疗作用,其主要通过调节钾离子通道相关蛋白的表达量实现治疗作用。2.针刺疗法结合蹊径通脉汤对心肌梗死大鼠的治疗效果对比其他治疗组具有明显的优势。
吴超[6]（2020）在《药物球囊联合冠心七味片对PCI后再狭窄疗效及内皮功能影响》文中研究说明目的目前冠心病发病率逐年升高,而经皮冠状动脉介入治疗（PCI）技术现已成为治疗冠心病的主要方式。但是由于血管内异物的植入,不可避免地造成血管本身炎性反应及血流流动性质的改变,从而导致支架内再狭窄（ISR）。目前临床上使用药物球囊治疗ISR,但仍然不能彻底解决细胞内膜增生、重塑、手术操作损伤等问题。本研究旨在应用中西医相结合的方式,探索药物球囊联合冠心七味片对介入后支架内再狭窄疗效及内皮功能的影响。方法本研究纳入84例支架内再狭窄病例,分为药物球囊联合冠心七味片实验组40例,单纯用药物球囊扩张对照组44例。收集患者术前一般资料情况、手术前后造影结果,随访6个月后造影结果,测定治疗前后一氧化氮（NO）及内皮素（ET）水平,比较药物球囊联合冠心七味片实验组与药物球囊扩张对照组的疗效及其对内皮细胞功能的影响,并对冠心七味片的安全性进行评估。结果（1）根据患者术后资料比较血管病变长度、血管内径、血管狭窄程度、最小血管内径,一氧化氮及内皮素测定值,未见明显差异（P>0.05）。（2）随访6个月研究比较实验组与对照组,患者在管腔狭窄程度（19.53±4.59%VS 20.94±4.70%）、晚期血管丢失率（0.12±0.28mm VS0.12±0.35mm）、再狭窄病例数（2例VS 4例）、MACE事件[即全因死亡、非致死性心肌梗死或靶病变血运重建（TLR）或靶血管血运重建（TVR）],4例VS 6例,二者均未见明显统计学差异（P>0.05）。（3）在再发心绞痛方面,实验组与对照组为2例VS 9例,二者有统计学差异（P=0.04<0.05）。（4）NO实验组治疗后的测定值较治疗前有明显提高（42.43±4.17umol/l VS 33.17±3.14umol/l）,与对照组（37.12±3.37umol/l VS33.04±3.12umol/l）相比,治疗前二者未见明显统计学差异（P=0.85>0.05）,治疗后有明显统计学差异（P=0.00<0.05）。（5）ET实验组测定值治疗后较治疗前有明显下降（22.36±2.10pg/ml VS 27.87±2.38pg/ml）,与对照组（25.74±1.93pg/ml VS28.02±1.88pg/ml）相比,治疗前二者未见明显统计学差异（P=0.74>0.05）,治疗后有明显统计学差异（P=0.00<0.05）。（6）通过随访病人,参照用药说明书,以及患者未诉用药后有恶心、腹痛、腹泻、头晕、心悸等常见不良反应,说明冠心七味药物在ISR治疗中应用是安全的。结论（1）药物球囊联合冠心七味片不能显着改善ISR病变情况。（2）药物球囊扩张治疗ISR病人安全、有效,目前仍然是主要的治疗方法。（3）冠心七味片使用相对安全可靠。（4）药物球囊联合冠心七味片对ISR病人再发心绞痛有明显治疗效果。（5）药物球囊联合冠心七味片可以通过改善细胞功能,增加血液中NO含量,减低ET含量,改善细胞功能,增加血管弹性,对于病人远期预后有治疗效果。现代药物球囊与传统民族医药冠心七味片相结合,可改善细胞内皮功能,因作用于不同途径、不同靶点,可以比较全面,多角度地治疗冠心病,对ISR有一定的防治作用。
杨潇[7]（2020）在《蒙药当贡-3对大鼠缺氧-复氧心肌细胞活性影响的研究》文中研究指明目的探讨蒙药当贡-3（DG-3）对大鼠缺氧/复氧（Hypoxia/Reoxygenation,H/R）心肌细胞活性影响的研究。方法将DG-3复方药物进行提取得药物总提物,体外培养H9c2心肌细胞,给予细胞DG-3药物干预,以复方丹参滴丸（FF）为阳性对照组,选用Co Cl2溶液为缺氧剂,噻唑蓝（MTT）检测细胞存活率,验证药物的毒性作用及筛选药物浓度,优化H/R条件,在体外模拟心肌缺血-再灌注损伤（Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury,MIRI）模型。将心肌细胞随机分为6组:空白对照组（control）、缺氧/复氧损伤组（H/R）、DG-3低、中、高剂量组（H/R+低、中、高相应浓度剂量的DG-3）、FF剂量组（H/R+相应浓度剂量的FF）,通过MTT法检测细胞存活率,试剂盒检测细胞匀浆液中过氧化氢酶（Catalase,CAT）的水平、细胞上清液中乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase,LDH）以及肌酸激酶（Creatine Kinase,CK）的释放量,实时-荧光定量PCR技术（Real-time Quantitative,Rt-q PCR）检测Bax、Bcl-2、caspase-3 m RNA的水平。结果1.MTT结果得出,DG-3药物浓度在0.05-0.4mg/m L范围内,细胞存活率无明显改变,组间无统计学意义（P>0.05）,DG-3药物浓度在0.8-6.4mg/m L内,细胞存活率降低（P<0.05）,筛选DG-3低、中、高药物浓度分别为0.1、0.2、0.4mg/m L。2.依据心肌细胞的存活率,确定H/R模型的最佳条件为Co Cl2的浓度为1000mmol/L,缺氧时间21 h,复氧时间2 h。3.与control对比,H/R细胞存活率下降（P<0.05）,细胞匀浆中的CAT水平降低（P<0.05）,细胞上清液中LDH及CK的释放量升高（P<0.05）,Bax、caspase-3的m RNA水平升高（P<0.05）,Bcl-2的m RNA水平降低（P<0.05）。与H/R对比,DG-3中、高剂量组能够升高细胞存活率（P<0.05）、降低细胞上清液中LDH及CK释放量（P<0.05）、升高细胞匀浆中CAT的活性（P<0.05）,低、中、高剂量组能够降低Bax、caspase-3的m RNA表达水平（P<0.05）、升高Bcl-2的m RNA表达水平（P<0.05）,并且作用可以呈现出浓度依赖性。结论DG-3总提取物能够抑制由Co Cl2诱导的H/R而出现的心肌细胞凋亡,其保护机制可能与DG-3能够降低Bax、caspase-3的m RNA水平,升高Bcl-2的m RNA水平有关。
李韵歆[8]（2020）在《复方当归注射液对脑缺血损伤大鼠MMP-2/9以及拟缺血损伤神经元的影响》文中研究表明缺血性中风是现代医学研究中的一个重大难题,由包括血管阻塞在内的多种原因而造成脑缺血损伤。复方当归注射液（Compound angelica injection,CAI）由当归、川芎、红花三味中药提炼而成,具有良好的活血通络之功。前期研究发现CAI对脑缺血损伤模型具有一定的治疗作用。神经血管单元（Neurovascularunit,NVU）概念的提出扩大了脑缺血损伤研究的视野。血脑屏障（Blood-brainbarrier,BBB）和神经元都是NVU的重要组成部分,也是脑缺血损伤研究中的重要靶点。本研究将以课题组前期的实验结果为基础,从神经血管单元出发,研究CAI对脑缺血损伤的影响。目的:通过建立大鼠永久性大脑中动脉闭塞（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,研究CAI干预后对大鼠神经行为学、病理形态学以及与BBB关系密切的基质金属蛋白酶（Matrix metal protein,MMP）-2和MMP-9表达的影响;利用CAI作用脑微血管内皮细胞（Brainmicrovascularendothelial cells,BMECs）后的条件培养液干预神经元,探究CAI对神经元拟缺血损伤模型的作用及可能的分子机制。方法:（1）MCAO大鼠行为学及形态学观察:SD大鼠随机分出假手术组（生理盐水3mL/kg）,其余建立大鼠右侧MCAO脑缺血模型。采用Z.Longa5级评分法将造模大鼠平均分成模型组（生理盐水3mL/kg）、阳性对照组（依达拉奉注射液3mL/kg）、CAI组（CAI 10 mL/kg）,在干预1d、3d、7 d、14 d后再次评分,评价CAI对脑缺血损伤大鼠神经功能行为学的影响;用苏木素-伊红（Hematoxylin-Eosin,HE）染色法观察各组大鼠脑组织病理形态学变化。（2）采用免疫组化法分析各组大鼠大脑缺血区皮层组织中MMP-2和MMP-9的表达。（3）原代培养BMECs传至第三代,采用CD31相关抗原进行免疫荧光鉴定;将BMECs 分为正常组、模型组和 CAI 低（1.25 μL/mL）、中（2.5 μL/mL）、高（5μL/mL）剂量组。模型组和CAI组采用氧糖剥夺（Oxygen and glucose deprivation,OGD）法建立BMECs拟缺血损伤模型。收集BMECs正常组的条件培养液（Normal-Conditioned medium,N-CM）、拟缺血模型组的条件培养液（Ischemic-Conditionedmedium,I-CM）及不同剂量CAI组拟缺血损伤后的条件培养液（Ischemic CAI-Conditioned medium,IC-CM）,其中,1.25 γL/mLCAI 作用 BMECs 的 IC-CM 作为 IC-CML,2.5 μL/mL CAI 作用的 IC-CM作为IC-CMM,5μL/mLCAI作用的IC-CM作为IC-CMH;原代培养神经元,采用NSE相关抗原对神经元进行免疫荧光鉴定;将神经元分为5组（N-CM、I-CM、IC-CML、IC-CMM、IC-CMH组）,分别将对应的内皮细胞条件液作用神经元,除N-CM组,其余组均用OGD造模6 h,之后通过CCK-8检测各组神经元的活性。（4）神经元PI3K/Akt和MAPK/Erk通路的相关指标检测:采用PCR法检测各组神经元Akt mRNA的表达水平,采用Western blot法检测各组神经元Akt的磷酸化水平（p-Akt/Akt）和 Erk 的磷酸化水平（p-Erk/Erk）。结果:（1）模型组大鼠的神经功能损伤逐渐加重,第7d时最为严重,CAI干预后可减轻大鼠的神经功能损伤,在7 d、14 d时,CAI组同模型组相比较,差异有统计学意义。HE染色结果显示,各时间点模型组的脑组织均呈现明显的损伤性变化,坏死明显。而阳性对照组和CAI组在干预7 d、14d后,对比模型组有较明显改善。（2）脑缺血时,缺血区皮层MMP-2随着缺血时间的增加而表达逐渐增多,在4个时间点中的表达以7d为峰值,到了 14d时表达减少;相较于模型组,CAI药物干预可降低MMP-2的表达,并在3 d、7 d时差异有统计学意义。MMP-9的高表达出现在早期,在1d时最高,3d、7 d都有所下降,14 d有上升趋势,CAI组相较于模型组1d、3d的表达降低,差异具有统计学意义。（3）OGD造模后,I-CM组神经元活性相较于N-CM组显着降低,CAI干预后的IC-CM组神经元活性随着药物浓度增加而逐渐升高。（4）与N-CM组相比,I-CM组神经元Akt mRNA表达显着减少,各IC-CM组神经元的Akt mRNA表达随着药物浓度增加均呈逐渐升高趋势,其中IC-CMH组的Akt mRNA同I-CM组比较差异有统计学意义;神经元的p-Akt/Akt同Akt的mRNA表达结果的趋势相似,同I-CM组比较,IC-CML组差异有统计学意义,IC-CMM和IC-CMH组差异显着。与N-CM组相比,I-CM组神经元p-Erk/Erk显着升高,CAI干预后的各IC-CM组有出现降低趋势,但相较于I-CM组统计均无差异。结论:CAI可改善模型大鼠神经功能和病理损伤,其作用可能与调控脑缺血损伤大鼠皮层与BBB有关的MMP-2和MMP-9表达有关;CAI作用的BMECs条件液活化神经元PI3K/Akt信号通路提高了拟缺血神经元的存活率。
潘文君[9]（2020）在《通冠胶囊及其有效成分丹参酚酸B治疗心梗后心衰的作用及机制研究》文中进行了进一步梳理目的:目前,冠状动脉粥样硬化性心脏病发病率日益增高。虽然得益于急性期经皮冠状动脉介入治疗、急性期溶栓治疗、抗血小板聚集等药物治疗,急性心肌梗死死亡率明显改善,但心肌梗死后心衰的发病率却逐年递增。心脏的再灌注治疗也带来了心脏的二次损伤,即缺血再灌注损伤。目前心肌梗死后的治疗仍以抗血小板聚集、抑制交感神经为主,但西医的治疗仍具有局限性,并且会引起消化道出血、心动过缓等不良反应。中医药多靶点作用在心梗后治疗中有明显优势,可以弥补西医的不足。本研究旨在动物及细胞水平,探究本院自主研发的中成药通冠胶囊对心梗后心衰的治疗效果及潜在的作用机制。方法:首先,我们通过异丙肾上腺素（isoproterenol,ISO）皮下注射构建了稳定的心梗后心衰的大鼠动物模型。将实验动物分为空白对照组、ISO模型组、美托洛尔阳性药物组和通冠胶囊治疗组。造模及给药7天后,通过小动物心脏超声检测心脏功能。麻醉处死后,取心、肺组织称重,量取胫骨长度。通过苏木素-伊红染色、天狼星红染色了解心脏病理改变。通过Western blot、免疫组织化学染色检测心脏组织蛋白表达及定位。之前课题组通过高效液相色谱证实通冠胶囊的最主要成分是丹参酚酸B。本研究亦在该动物模型上探索通冠胶囊的心脏保护作用是否是丹参酚酸B在起作用。将实验动物分为空白对照组、ISO模型组、美托洛尔阳性药物组和丹参酚酸B治疗组。造模及给药7天后,通过小动物心脏超声检测心脏功能。麻醉处死后,取心、肺组织称重,量取胫骨长度。通过苏木素-伊红染色、天狼星红染色了解心脏病理改变.通过Western blot、检测心脏组织蛋白表达。组织免疫荧光检测心脏组织细胞凋亡。在细胞水平,同样以ISO在H9C2大鼠心室肌细胞系构建心肌细胞凋亡模型。通过MTT检测细胞活力,通过细胞钙离子荧光染色了解丹参酚酸B对心肌细胞钙超载的影响,Western blot检测钙调蛋白表达及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果:通冠胶囊可明显改善ISO引起的大鼠生存率（78.05%VS 53.66%,P<0.05）、改善ISO引起的心功能降低和心梗后心肌细胞肥大及心脏胶原沉积。通冠胶囊通过抑制ISO引起的CaMKII高表达、转录阻遏因子HDAC4转位和肌细胞增强子因子MEF2表达上调,抑制ISO引起的心肌细胞肥大及心衰。同时,丝裂原激活蛋白激酶MAPKs通路作为经典的促心肌细胞肥大通路也参与了 ISO引起的心衰。通冠胶囊通过抑制MAPKs激活,及下游转录因子GATA-4表达,抑制促心肌细胞肥厚的心房利钠肽（atrial natriuretic peptide,ANP）蛋白表达,保护心脏功能。通冠胶囊的主要有效成分丹参酚酸B同样可以改善心梗后心衰大鼠心功能。并能抑制心肌细胞肥大和心脏胶原沉积。我们还发现丹参酚酸B下调了 ISO引起的心脏凋亡相关蛋白Bax的高表达,促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并且抑制Caspase-3的剪切及凋亡小体的产生。在细胞水平,我们发现丹参酚酸B能改善ISO引起的细胞活力降低、细胞凋亡。丹参酚酸B可抑制ISO引起的CaMKII激活,上调肌浆网Ca-ATP酶（sarcolemmal Ca-ATPase,SERCA）表达从而改善心肌细胞内钙超载。结论:通冠胶囊能通过抑制心肌细胞肥大,改善心梗后大鼠的心功能并改善其生存率。通冠胶囊可能通过抑制CaMKII/HDAC4/MEF2和MAPKs/GATA-4通路发挥其心脏保护作用。丹参酚酸B作为通冠胶囊的主要有效成分,在动物实验中也能抑制心肌细胞肥大,改善心梗后大鼠的心功能。丹参酚酸B还能抑制CaMKII激活和上调SERCA表达,抑制细胞内钙超载,从而抗细胞凋亡。
宫文霞[10]（2019）在《当归及其活性成分的抗抑郁作用及机制研究》文中研究说明选题依据:抑郁症是以持续情绪低落和认知功能障碍为主要临床特征,具有高患病率、高复发率、高致残率发病和高致死率等特点,其危害已越来越引起医药卫生界的重视。由于抑郁症的病因复杂且发病机制尚不明确,目前关于抑郁症的治疗仍未取得根本突破。因此,阐明抑郁症的发病机制和发现疗效确切的抗抑郁药物是医药工作者的首要任务。当归作为祖国传统医学“补血活血”要药,素有“十方九归”之美称,“药王”之美誉。相关研究表明当归在经典抗抑郁复方中使用频率高且占有重要地位,如逍遥散、无忧汤、当归芍药散、抑肝散等,且进一步研究表明单味药当归在慢性束缚应激模型、CUMS模型、和小鼠绝望模型也具有确切的抗抑郁作用。然而,这些报道仅观察了当归对抑郁症模型的抑郁症状的改善作用,并未关注当归对抑郁症模型血液系统的影响。此外,抑郁症模型是否存在血液系统紊乱的现象,当归抗抑郁作用机制又是什么,这些问题尚不明确。目前已有文献报道当归中部分化合物的抗抑郁活性,如:阿魏酸、香草酸、丁苯酞。然而,关于当归化学成分的抗抑郁活性仍无系统的研究报道。本研究将1)从当归单味药层面出发,明确当归对抑郁症模型的抑郁样症状和血液系统紊乱的改善作用,并明确两者间的的相关性和机制,不仅为当归药性理论的拓展提供科学依据,还将为抑郁症的临床治疗提供新的策略;2)从当归单体层面出发,系统地从当归中筛选具有抗抑郁作用活性成分,并对有效成分的作用机制进行探讨,为从中药当归中开发临床疗效确切、质量可控的抗抑郁天然产物奠定药理学基础。目的:（1）明确当归对抑郁症模型的抑郁样症状和血液系统紊乱的改善作用;并从代谢组学和分子生物学角度阐明当归抗抑郁作用与调节血液系统间的相关性及机制;（2）从当归中系统筛选具有抗抑郁作用的天然小分子化合物;（3）验证主要活性成分阿魏酸松柏酯体内抗抑郁活性进行,并阐释其作用机制。方法:（1）采用孤养结合CUMS抑郁模型,以体重、糖水偏爱率、水平穿越格数、直立次数以及强迫游泳不动时间为指标,明确当归对CUMS模型抑郁样症状的改善作用;再以外周血象、血气、以及血流变为指标,明确当归对CUMS模型大鼠血液系统紊乱的改善作用,并对当归的抗抑郁作用与调节血液系统功能进行相关性分析;以血清和肝脏（贮藏血液的器官）生物样本为研究对象,采用UPLC-MS/MS和NMR代谢组学技术,分析当归对差异代谢物和代谢通路的调节作用,进而阐明当归的抗抑郁作用及其与调节血液系统间的相关性机制;最后采用Western blotting技术检测当归对CUMS大鼠肝脏中的HIF-1α、PDK-1和LDHA的蛋白表达量的影响,明确HIF-1α介导的能量代谢途径在当归通过养血发挥解郁功效中的重要作用。（2）采用超临界CO2技术萃取获得当归提取物,运用多种色谱分离方法对当归提取物进行分离获得单体成分,通过波谱解析（NMR、MS）对得到的单体化合物进行结构鉴定;再结合文献报道从市场上购买已知的当归的化学成分。通过以上两种方式获得当归的单体成分,为当归抗抑郁活性化合物的筛选奠定物质基础。再分别采用皮质酮、谷氨酸、和H2O2损伤的PC12细胞模型,以细胞存活率为指标,对所获得的单体化合物进行抗抑郁活性筛选;最后运用神经递质转运体抑制剂高通量筛选模型对所获得的单体化合物进行抗抑郁活性筛选。（3）采用小鼠悬尾试验和小鼠强迫游泳实验对主要活性成分阿魏酸松柏酯的体内抗抑郁药效进行验证;采用MTT法和LDH释放法检测阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12细胞的保护作用;采用流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位（MMPs）、细胞内Ca2+浓度和活性氧（ROS）;采用试剂盒法测定SOD活性和丙二醛（MDA）水平;采用Western blot技术检测p-NR2B、p-CaMK II、p-JNK、p-p38、细胞色素C、Bax、Bcl-2、caspase-3水平。结果:（1）7.5 g生药/kg和15 g生药/kg的当归能显着逆转CUMS引起的大鼠体重、糖水偏爱率、穿越格数和直立次数显着性降低,强迫游泳不动时间显着性升高。慢性不可预知刺激大鼠28天能使SD大鼠出现平均红细胞体积（MCV）、单核细胞百分比（MO%）、血氧分压（PO2）、血氧饱和度（sO2）、pH显着性降低,红细胞计数（RBC）、血小板计数（PLT）、红细胞分布宽度（RDW）、二氧化碳分压（PCO2）和全血粘度显着升高的现象,当归能在一定程度上逆转CUMS引起的血液系统紊乱。进一步研究结果表明,行为学综合指标与血液系统综合指标的相关系数较高,当归的抗抑郁作用与其养血功效具有较高的相关性。代谢组学研究结果显示,与空白组相比,CUMS抑郁模型大鼠血清中的40个生物标志物和肝脏中的47个生物标志物均发生了显着性变化,给予当归干预后,血清中的26个和肝脏中的27个差异代谢物被显着性回调。此外,当归还能抑制CUMS抑郁大鼠的HIF-1α、PDK-1和LDHA的过表达。（2）从当归药材中分离得到12个单体化合物,其中包括Z-丁烯基苯酞（1）、藁本内酯（2）、E-丁烯基苯酞（3）、棕榈酸（4）、cis-Z,Z’-3a.7a’,7a.3a’-dihydroxyligustilide（5）、Tokinolide A（6）、Tokinolide C（7）、β-谷甾醇（8）、Riligustilide（9）、12-异戊烯酰基-14-乙酰基-2E,8E,10E-三烯-4,6-二炔-1-醇（10）、法卡林二醇（11）、阿魏酸松柏酯（12）。Tokinolide C是未经文献报道的新化合物。从市场上购买到的当归中的化合物11个,其中包括洋川芎内酯A（13）、洋川芎内酯H（14）、洋川芎内酯I（15）、新蛇床内酯（16）、欧当归内酯A（17）、阿魏酸（18）、5-羟甲基糠醛（19）、欧前胡素（20）、香草酸（21）、伞形花内酯（22）、正丁基苯酞（23）。体外实验研究表明,洋川芎内酯A和阿魏酸对皮质酮损伤的PC12细胞具有明显的保护作用;藁本内酯、Z-丁烯基苯酞、阿魏酸松柏酯和Tokinolide A对谷氨酸损伤的PC12细胞具有明显的保护作用;洋川芎内酯A、洋川芎内酯I和正丁基苯酞对H2O2损伤的PC12细胞具有明显的保护作用。此外,5-羟甲基糠醛和阿魏酸松柏酯对ASP+有明显的抑制作用。（3）阿魏酸松柏酯能显着性缩短TST、FST的小鼠不动时间;抑制谷氨酸诱导的PC12细胞存活率下降、LDH释放、细胞凋亡率升高;抑制谷氨酸诱导的PC12细胞Ca2+内流、p-NR2B、p-CaMK II、p-JNK、p-p38水平升高;抑制谷氨酸诱导的PC12细胞ROS生成,SOD活性降低,MDA水平升高;抑制谷氨酸诱导的PC12细胞MMPs下降,Bcl-2/Bax介导的线粒体凋亡通路的激活。结论:（1）当归能有效改善CUMS模型大鼠的抑郁样症状和血液系统紊乱现象。当归的抗抑郁作用与其调节血液系统功能密切相关,其机制可能能涉及TCA循环、糖代谢、氨基酸代谢、鞘脂代谢、甘油脂代谢、牛磺酸代谢、和脂类代谢。HIF-1α信号通路介导的能量代谢途径是当归通过养血发挥解郁作用的重要途径之一。（2）洋川芎内酯A、阿魏酸、藁本内酯、Z-丁烯基苯酞、阿魏酸松柏酯、Tokinolide A、洋川芎内酯I、正丁基苯酞和5-羟甲基糠醛可能是当归抗抑郁药效物质基础。（3）阿魏酸松柏酯在体内外均表现出较好的抗抑郁作用,其机制与调节NMDAR-CaMKII-MAPKs信号通路、抗氧化应激和抗线粒体凋亡有关。
二、丹酚酸B镁盐抑制低氧诱导内皮细胞钙内流和一氧化氮释放(英文)（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、丹酚酸B镁盐抑制低氧诱导内皮细胞钙内流和一氧化氮释放(英文)（论文提纲范文）
（1）解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 综述一 AD的病因病机及治疗进展 |
| 1 中医学对痴呆的系统认识及研究进展 |
| 1.1 中医学对痴呆病名由来及发展的认识 |
| 1.2 中医学对痴呆病因病机的古代认识 |
| 1.3 中医学对痴呆辨证论治及相关研究的认识 |
| 1.4 中医学对痴呆治疗的古今认识 |
| 综述二 西医学对AD的发病机制及治疗进展研究 |
| 1 现代医学对AD的认识及研究进展 |
| 1.1 AD的概述及流行病学 |
| 1.2 现代医学对AD发病因素的认识及研究 |
| 1.3 现代医学对AD发病相关机制的认识 |
| 2 现代医学对AD治疗的认识 |
| 2.1 乙酰胆碱酯酶抑制剂(AchEIs) |
| 2.2 兴奋性氨基酸受体拮抗剂 |
| 2.3 甘露特纳胶囊 |
| 2.4 其他非药物治疗 |
| 3 问题与展望 |
| 综述三 Aβ在脑内异常沉积的机制 |
| 1.Aβ的产生、分布与清除、传递与运输的研究进展 |
| 1.1 Aβ的产生 |
| 2 Aβ的清除 |
| 2.1 细胞的清除作用 |
| 2.2 Aβ被降解酶的清除作用 |
| 2.3 中枢Aβ的清除途径 |
| 2.4 血液成分介导的Aβ清除 |
| 综述四 解毒益智方在阿尔茨海默病中的应用 |
| 1 解毒益智方的创立 |
| 1.1 脑髓理论 |
| 1.2 髓虚毒损 |
| 1.3 补肾益髓,活血化痰解毒法 |
| 2 解毒益智方通过调节SIRT1/AMPK通路抑制BACE1表达改善Aβ的沉积 |
| 3 解毒益智方对阿尔茨海默病的临床应用 |
| 实验研究 |
| 第一章 CCP对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤保护性的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠行为学的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ水平变化的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内BACE1表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简介 |
（2）基于JAK2/STAT3信号通路探讨黄芩苷对缺血性脑水肿的保护作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩写表 |
| 前言 |
| 实验研究 |
| 第一部分 体内实验探讨黄芩苷对缺血性脑水肿大鼠的影响及保护作用 |
| 技术路线 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 实验小结 |
| 第二部分 体外实验探讨黄芩苷对氧糖剥夺内皮细胞的作用机制 |
| 技术路线 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 实验小结 |
| 第三部分 结论与讨论 |
| 1 黄芩苷对缺血性脑水肿大鼠的影响及作用 |
| 2 黄芩苷对氧糖剥夺内皮细胞的影响及作用 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 综述一 缺血性脑水肿炎症反应机制及中医药治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 JAK2/STAT3信号通路与缺血性脑水肿相关性研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 攻读学位期间参加科研课题情况 |
| 致谢 |
（3）“良关系”丹参-降香药对效应物质咖啡酸异丙酯抗脑缺血作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 缺血性脑卒中的研究进展 |
| 1.2 丹参-降香药对及其代谢产物的研究现状 |
| 1.3 缺血性脑卒中与血管内皮功能障碍 |
| 1.3.1 氧化应激和炎症反应 |
| 1.3.2 血管活性物质损伤机制 |
| 1.4 GTPCH1-BH4-eNOS-NO信号通路与缺血性脑卒中密切相关 |
| 1.5 缺血性脑损伤动物模型和细胞模型的研究现状 |
| 1.6 本论文研究内容与意义 |
| 第二章 香丹注射液及咖啡酸异丙酯抗脑缺血的药效学研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 药品与试剂 |
| 2.1.3 主要试剂配制方法 |
| 2.1.4 仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 动物分组和给药 |
| 2.2.2 动物模型的制备 |
| 2.2.3 脑血流量的测定 |
| 2.2.4 脑梗死面积的测定 |
| 2.2.5 Western Bolt检测相关蛋白表达 |
| 2.2.6 统计学分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 对MCAO大鼠脑血流量的影响 |
| 2.3.2 对脑缺血大鼠脑梗死范围的影响 |
| 2.3.3 对IL-Iβ、NFκB及 HIF-1α蛋白表达的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 香丹注射液和咖啡酸异丙酯舒张血管作用的机制研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 药品与试剂 |
| 3.1.2 主要试剂配置方法 |
| 3.1.4 仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 大脑中动脉血管环的制备 |
| 3.2.2 香丹注射液和KYB对中动脉血管作用的研究 |
| 3.2.3 Western Bolt检测eNOS和iNOS蛋白表达 |
| 3.2.4 ELISA检测大鼠脑组织中NO的含量 |
| 3.2.5 统计学分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 香丹注射液和KYB对中动脉血管环内皮功能的影响 |
| 3.3.2 累积浓度的香丹注射液和KYB对正常中动脉血管环张力的影响 |
| 3.3.3 GTPCHI-BH4-eNOS通路中各靶点对香丹注射液和KYB舒血管作用的影响 |
| 3.3.4 对eNOS和iNOS蛋白表达的影响 |
| 3.3.5 对MCAO大鼠脑组织中NO含量的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 香丹注射液及咖啡酸异丙酯对细胞损伤的保护作用研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验细胞 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 细胞培养 |
| 4.2.2 建立OGD模型及实验分组 |
| 4.2.3 OGD缺氧时间的选择 |
| 4.2.4 CCK-8检测药物对RBMEC细胞的毒性作用 |
| 4.2.5 Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡 |
| 4.2.6 Western Bolt检测RBMEC细胞中NFκB、eNOS和iNOS蛋白表达 |
| 4.2.7 RBMEC细胞NO含量的测定 |
| 4.2.8 DCFH-DA荧光探针检测活性氧的含量 |
| 4.2.9 统计学分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 OGD不同时间对RBMEC细胞凋亡率的影响 |
| 4.3.2 香丹注射液和KYB对RBMEC细胞存活率的影响 |
| 4.3.3 香丹注射液和KYB对OGD6h诱导的RBMEC细胞凋亡率的影响 |
| 4.3.4 香丹注射液和KYB对RBMEC细胞中相关蛋白表达的影响 |
| 4.3.5 香丹注射液和KYB对RBMEC细胞中NO含量的影响 |
| 4.3.6 香丹注射液和KYB对RBMEC细胞内ROS水平的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（4）基于AKT和MAPK信号通路探讨丹酚酸B对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞氧化应激的调控作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 引言 |
| 实验材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验细胞株 |
| 1.2 药物与制备 |
| 1.3 实验试剂及耗材 |
| 1.4 实验仪器 |
| 1.5 实验使用试剂的配制方法 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 HUVEC传代和换液 |
| 2.2 HUVEC冻存 |
| 2.3 HUVEC复苏 |
| 2.4 HUVEC实验分组 |
| 2.5 HUVEC计数和接板 |
| 2.6 MTT实验 |
| 2.7 活性氧(ROS)测定方法 |
| 2.8 一氧化氮(NO)测定方法 |
| 2.9 丙二醛(MDA)含量测定方法 |
| 2.10 激光共聚焦实验检测细胞内钙离子的变化 |
| 2.11 蛋白免疫印迹法(Western Blot) |
| 3 统计学处理 |
| 实验结果 |
| 1 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC氧化应激的作用 |
| 1.1 丹酚酸B对 HUVEC活力的影响 |
| 1.2 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC内 ROS表达情况的影响 |
| 1.3 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC上清液中MDA含量的影响 |
| 1.4 丹酚酸对Ang Ⅱ诱导的HUVEC内 NOX2 蛋白活化的影响 |
| 1.5 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC内 NO表达情况的影响 |
| 2 丹酚酸B调控Ang Ⅱ诱导的HUVEC相关信号通路活化 |
| 2.1 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC钙离子浓度变化的影响 |
| 2.2 丹酚酸B对 Ang Ⅱ诱导的HUVEC的PI3K/AKT信号通路相关蛋白活化的影响 |
| 2.3 丹酚酸对Ang Ⅱ诱导的HUVEC的MAPK信号通路活化的影响 |
| 2.4 丹酚酸对Ang Ⅱ诱导的HUVEC的NRF2/ HO-1 信号通路活化的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（5）针刺疗法结合自拟蹊径通脉汤对心肌梗死大鼠瞬时外向钾离子通道Kv4.3、KChIP2蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新型自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 急性心肌梗死治疗进展研究 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（6）药物球囊联合冠心七味片对PCI后再狭窄疗效及内皮功能影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 研究步骤和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 蒙西医结合治疗冠心病新进展综述 |
| 参考文献 |
| 缩略语表 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（7）蒙药当贡-3对大鼠缺氧-复氧心肌细胞活性影响的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 创新点及不足 |
| 参考文献 |
| 文献综述 中医药治疗心肌缺血-再灌注损伤的实验研究进展 |
| 参考文献 |
| 缩略语表 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（8）复方当归注射液对脑缺血损伤大鼠MMP-2/9以及拟缺血损伤神经元的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写词 |
| 综述一 缺血性中风神经血管单元的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 活血通络方药治疗缺血性中风的药理学研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 技术路线 |
| 实验一 复方当归注射液对脑缺血损伤大鼠行为学以及脑组织形态学的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 复方当归注射液对脑缺血损伤大鼠大脑皮质MMP-2、MMP-9表达的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 复方当归注射液作用的内皮细胞条件液对拟缺血损伤神经元存活率的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验四 复方当归注射液作用的内皮细胞条件液对拟缺血损伤神经元PI3K/Akt、MAPK/Erk通路的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）通冠胶囊及其有效成分丹参酚酸B治疗心梗后心衰的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 心肌梗死西医研究进展 |
| 一、流行病学 |
| 二、心肌梗死及心脏重构的机制 |
| 三、目前治疗手段及新的治疗方向 |
| 第二节 丹参酚酸治疗心血管疾病研究进展 |
| 一、丹参酚酸的临床研究 |
| 二、丹参酚酸抗动脉粥样硬化及保护血管功能的机制 |
| 三、丹参酚酸的心脏保护作用及机制 |
| 四、丹参酚酸是基质金属蛋白酶的抑制剂 |
| 五、总结 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 通冠胶囊对心梗后心衰大鼠的实验研究及机制探索 |
| 一、材料和方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、研究局限性 |
| 五、结语 |
| 第二节 丹参酚酸B对心梗后心衰大鼠的实验研究及机制探索 |
| 一、材料和方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（10）当归及其活性成分的抗抑郁作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1 引言 |
| 2 当归抗抑郁化学成分及药理作用研究进展 |
| 2.1 当归在抗抑郁复方中的现代研究 |
| 2.2 当归及其活性成分的抗抑郁作用研究 |
| 2.3 基于抑郁症分子机制的当归抗抑郁作用研究 |
| 2.4 结语 |
| 3 浅谈“养血解郁”的科学内涵 |
| 3.1 中医理论指导 |
| 3.2 现代科学研究 |
| 3.3 结语 |
| 4 体外抑郁模型研究进展 |
| 4.1 大鼠嗜铬细胞瘤PC12 细胞 |
| 4.2 原代神经元细胞 |
| 4.3 原代神经胶质细胞 |
| 4.4 人神经母细胞瘤SH-SY5Y |
| 4.5 其它 |
| 4.6 结语 |
| 5 本课题的研究意义、研究思路、技术路线、研究内容及主要创新点 |
| 第二章 当归的抗抑郁作用研究 |
| 第一节 当归对CUMS大鼠抑郁样症状的改善作用 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 材料和仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.3.1 动物分组及给药 |
| 1.3.2 大鼠慢性温和不可预知结合孤养模型(CUMS)的建立 |
| 1.3.3糖水偏爱实验 |
| 1.3.4旷场实验 |
| 1.3.5强迫游泳实验 |
| 1.3.6 统计分析 |
| 1.4 实验结果 |
| 1.4.1 当归对CUMS大鼠体重的影响 |
| 1.4.2 当归对CUMS大鼠糖水偏爱率的影响 |
| 1.4.3 当归对CUMS大鼠水平穿越格数的影响 |
| 1.4.4 当归对CUMS大鼠直立次数的影响 |
| 1.4.5 当归对CUMS大鼠强迫游泳不动时间的影响 |
| 1.5 小结与讨论 |
| 1.5.1 小结 |
| 1.5.2 讨论 |
| 第二节 基于“养血解郁”学说研究当归对CUMS大鼠血液系统的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 血液样本的采集 |
| 2.3.2 血常规分析 |
| 2.3.3 血气分析 |
| 2.3.4 血流变分析 |
| 2.3.5 统计分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 当归对CUMS大鼠外周血象的影响 |
| 2.4.2 当归对CUMS大鼠血气指标的影响 |
| 2.4.3 当归对CUMS大鼠全血粘度的影响 |
| 2.4.4 当归的抗抑郁作用与调节血液系统功能的相关性分析 |
| 2.5 小结与讨论 |
| 2.5.1 小结 |
| 2.5.2 讨论 |
| 第三节 基于血清代谢组学的当归“养血解郁”机制研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 血清液质备样方法及分析条件 |
| 3.3.3 数据处理及统计分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 当归干预CUMS致抑郁大鼠的血清液质代谢组学研究 |
| 3.4.2 当归干预CUMS致抑郁大鼠的血清核磁代谢组学研究 |
| 3.4.3 各给药组干预CUMS大鼠血清代谢物及代谢通路比较分析 |
| 3.4.4 当归干预抑郁症和贫血两种发病机体代谢物谱分析 |
| 3.5 小结与讨论 |
| 3.5.1 小结 |
| 3.5.2 讨论 |
| 第四节 当归干预CUMS大鼠的肝脏代谢组学研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 肝脏核磁备样方法及分析条件 |
| 4.3.2 肝脏液质备样方法及分析条件 |
| 4.3.3 数据处理及统计分析 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 当归干预CUMS大鼠肝脏核磁代谢组学研究 |
| 4.4.2 当归干预CUMS大鼠肝脏液质代谢组学研究 |
| 4.4.3 各给药组干预CUMS大鼠肝脏代谢物及代谢通路比较分析 |
| 4.5 小结与讨论 |
| 4.5.1 小结 |
| 4.5.2 讨论 |
| 第五节 基于HIF-1α信号通路的当归“养血解郁”机制研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料和仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 蛋白的提取 |
| 5.3.2 Western Blot步骤 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 当归对CUMS大鼠缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响 |
| 5.4.2 当归对CUMS大鼠乳酸脱氢酶-A(LDHA)表达的影响 |
| 5.4.3 当归对CUMS大鼠丙酮酸脱氢酶激酶-1(PDK-1)表达的影响 |
| 5.5 小结与讨论 |
| 5.5.1 小结 |
| 5.5.2 讨论 |
| 第三章 当归的抗抑郁活性成分研究 |
| 第一节 当归化学成分的提取、分离和结构鉴定 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 材料和仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 实验结果 |
| 1.4.1 分离所获得的化合物及结构鉴定 |
| 1.4.2 购买所获得的化合物 |
| 1.5 小结与讨论 |
| 1.5.1 小结 |
| 1.5.2 讨论 |
| 第二节 基于细胞模型的当归抗抑郁活性成分研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料和仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养 |
| 2.3.2 细胞存活率的测定 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 当归单体化合物对PC12 细胞的作用研究结果 |
| 2.4.2 当归单体化合物对皮质酮损伤的PC12 细胞的保护作用研究 |
| 2.4.3 当归单体化合物对谷氨酸损伤的PC12 细胞的保护作用研究 |
| 2.4.4 当归单体化合物对H2O2 损伤的PC12 细胞的保护作用研究 |
| 2.5 小结与讨论 |
| 2.5.1 小结 |
| 2.5.2 讨论 |
| 第三节 基于神经递质转运体抑制剂高通量筛选模型的当归抗抑郁活性成分研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料和仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 盐酸氟西汀对ASP+抑制作用检测 |
| 3.4.2 当归单体化合物对ASP+抑制作用检测 |
| 3.5 小结与讨论 |
| 3.5.1 小结 |
| 3.5.2 讨论 |
| 第四章 阿魏酸松柏酯的抗抑郁作用及机制研究 |
| 第一节 基于小鼠绝望模型的阿魏酸松柏酯体内抗抑郁作用研究 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 材料和仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.3.1 动物分组及给药 |
| 1.3.2 小鼠悬尾试验 |
| 1.3.3 小鼠强迫游泳实验 |
| 1.3.4 统计分析 |
| 1.4 实验结果 |
| 1.4.1 阿魏酸松柏酯对小鼠悬尾试验不动时间的影响 |
| 1.4.2 阿魏酸松柏酯对小鼠强迫游泳试验不动时间的影响 |
| 1.5 小结与讨论 |
| 1.5.1 小结 |
| 1.5.2 讨论 |
| 第二节 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12 细胞模型的保护作用 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料和仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养 |
| 2.3.2 药物处理 |
| 2.3.3 细胞存活率测定 |
| 2.3.4 乳酸脱氢酶释放率测定 |
| 2.3.5 细胞凋亡率测定 |
| 2.3.6 Hoechst33324-PI双染 |
| 2.3.7 统计分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12 细胞模型细胞存活率的影响 |
| 2.4.2 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的 PC12 细胞模型乳酸脱氢酶释放率的影响 |
| 2.4.3 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12 细胞模型细胞凋亡率的影响 |
| 2.5 小结与讨论 |
| 2.5.1 小结 |
| 2.5.2 讨论 |
| 第三节 阿魏酸松柏酯对谷氨酸诱导的PC12 细胞NMDA-CaMKII-MAPKs信号通路的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料和仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 细胞内钙离子测定 |
| 3.3.2 免疫印迹 |
| 3.3.3 统计分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12 细胞模型NR2B磷酸化蛋白表达的影响 |
| 3.4.2 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12 细胞模型细胞内Ca~(2+)的影响 |
| 3.4.3 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12 细胞模型CaMKII磷酸化蛋白表达的影响 |
| 3.4.4 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的 PC12 细胞模型 JNK 和 p38 磷酸化蛋白表达的影响 |
| 3.5 小结与讨论 |
| 3.5.1 小结 |
| 3.5.2 讨论 |
| 第四节 阿魏酸松柏酯对谷氨酸诱导的PC12 细胞氧化应激的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 细胞内活性氧的测定 |
| 4.3.2 细胞内SOD活力的测定 |
| 4.3.3 细胞内MDA含量的测定 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12 细胞模型细胞内ROS的影响 |
| 4.4.2 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12 细胞模型细胞内SOD活力的影响 |
| 4.4.3 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的 PC12 细胞模型细胞内 MDA 含量的影响 |
| 4.5 小结与讨论 |
| 4.5.1 小结 |
| 4.5.2 讨论 |
| 第五节 阿魏酸松柏酯对谷氨酸诱导的PC12 细胞线粒体凋亡通路的影响 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料和仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 线粒体膜电位的测定 |
| 5.3.2 免疫印迹 |
| 5.3.3 统计分析 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的PC12 细胞模型线粒体膜电位的影响 |
| 5.4.2 阿魏酸松柏酯对谷氨酸损伤的 PC12 细胞模型 Bcl-2、Bax、细胞色素 C、和Caspase-3 表达的影响 |
| 5.5 小结与讨论 |
| 5.5.1 小结 |
| 5.5.2 讨论 |
| 本章小结 |
| 总结与展望 |
| 1 研究工作总结 |
| 2 不足和展望 |
| 参考文献 |
| 主要缩略词表 |
| 攻读学位期间取得成果 |
| 致谢 |
| 个人情况及联系方式 |
| 附录 |
四、丹酚酸B镁盐抑制低氧诱导内皮细胞钙内流和一氧化氮释放(英文)（论文参考文献）
- [1]解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究[D]. 朱晓婷. 长春中医药大学, 2021(01)
- [2]基于JAK2/STAT3信号通路探讨黄芩苷对缺血性脑水肿的保护作用机制[D]. 曹姗. 云南中医药大学, 2021
- [3]“良关系”丹参-降香药对效应物质咖啡酸异丙酯抗脑缺血作用机制的研究[D]. 田佳乐. 西北大学, 2021(12)
- [4]基于AKT和MAPK信号通路探讨丹酚酸B对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞氧化应激的调控作用[D]. 黄雅娜. 福建中医药大学, 2020(12)
- [5]针刺疗法结合自拟蹊径通脉汤对心肌梗死大鼠瞬时外向钾离子通道Kv4.3、KChIP2蛋白表达的影响[D]. 张柔. 辽宁中医药大学, 2020(02)
- [6]药物球囊联合冠心七味片对PCI后再狭窄疗效及内皮功能影响[D]. 吴超. 内蒙古医科大学, 2020(03)
- [7]蒙药当贡-3对大鼠缺氧-复氧心肌细胞活性影响的研究[D]. 杨潇. 内蒙古医科大学, 2020(03)
- [8]复方当归注射液对脑缺血损伤大鼠MMP-2/9以及拟缺血损伤神经元的影响[D]. 李韵歆. 北京中医药大学, 2020(04)
- [9]通冠胶囊及其有效成分丹参酚酸B治疗心梗后心衰的作用及机制研究[D]. 潘文君. 广州中医药大学, 2020(06)
- [10]当归及其活性成分的抗抑郁作用及机制研究[D]. 宫文霞. 山西大学, 2019(01)