一、扶正增效方对裸鼠人肺腺癌移植瘤照射后各时相细胞在细胞周期分布变化的影响（论文文献综述）
亓润智[1]（2021）在《基于肿瘤细胞外泌体调控TAM细胞极化探讨双参颗粒抑制肺癌的作用机制》文中指出研究背景肺癌在我国及世界范围内的发病率、死亡率均居前列。尽管越来越多的肺癌被早期诊断和治疗,新的免疫治疗药物不断问世,放射治疗技术得到不断提升,肺癌患者的总生存时间仍没有得到明显延长,生活质量没有得到明显改善。ⅠA期肺癌患者的5年生存率为83%,ⅢA期患者仅为36%,晚期肺癌患者5年生存率仅3.5%。肺癌的整体中位生存期仍未突破1年。如何减少早期肺癌患者术后复发转移,延长晚期肺癌患者生存期,抑制肺癌进展仍然是目前亟待解决的医学难题。随着大量临床研究证实中医药防治肺癌的有效性,以及基础实验研究对中医药防治肺癌的机制探讨不断深入,中医药在肺癌防治中的地位也逐渐上升。越来越多的研究发现中医药防治肺癌的机制可能与调控肿瘤微环境密切相关。肺癌属中医学“肺积”范畴。《医宗必读》中提到:“积之成也,正气不足,而后邪气踞之”。邪之所凑,其气必虚,正气亏虚则气血阴阳失和,脏腑机能紊乱,气机升降失调。随着中医肿瘤理论的发展,“正虚”是肺癌重要的发病基础已逐渐成为中医肿瘤学术界的共识。肺癌的病机多为虚实夹杂,虚证常见阴虚或气阴两虚,实证多见气滞、痰凝及血瘀,病位在肺,与脾、肾密切相关。气阴两虚、瘀血内阻是肺癌形成与进展的重要因素。肺为娇脏,易受外邪,伤及肺气与肺阴,肺主气功能受损,一身之气不足则邪毒内盛,气不行血、癌毒阻络,则见瘀血内停,瘀毒互结,逐渐形成癌肿。益气养阴活血法是防治肺癌的重要治法之一。双参颗粒由三七、西洋参、冬虫夏草组成,三七活血化瘀兼能补血;西洋参健脾益气而不燥,并能养阴生津;冬虫夏草补益肺肾。三药共奏益气健脾养阴、补益肺肾、金水相生之效,扶正以治本,活血化瘀以治标。临床研究也证明,益气养阴活血法是中医药防治肺癌的重要治法,在临床应用广泛并取得良好疗效。但由于中医临床证候的复杂性,以及中医辨证论治处方的多样性,使中医“益气养阴活血法”防治肺癌的理论未能在细胞分子层面得到很好的验证。我们前期预实验发现双参颗粒可以抑制荷Lewis肺癌小鼠移植瘤的生长,减少自发肺癌小鼠模型肺部肿瘤形成。同时,对双参颗粒干预后的自发肺癌小鼠与未经过双参颗粒干预的小鼠肺组织进行全转录组测序分析。结果提示在经过双参颗粒干预后,巨噬细胞迁移抑制因子（Macrophage migration inhibitory factor,MIF）,巨噬细胞标志蛋白（MannosereceptorCtype 1,MRC1/CD206）,含锌指转录因子（Kruppel-like factors,KLF）家族如 KLF4、KLF2,基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases,MMPs）家族,以及非编码 RNA（Non-coding RNA）如microRNA-34a（miR-34a）、microRNA-21（miR-21）的表达以及外泌体相关基因表达存在差异。这些差异基因都与肿瘤相关巨噬细胞（Tumor-associated macrophages,TAMs）表型、功能调控以及外泌体功能密切相关,基于TAMs极化在调控肿瘤微环境影响肿瘤生长中的重要作用,我们从TAMs与肿瘤细胞外泌体入手,探讨双参颗粒抑制荷Lewis肺癌的作用是否与肿瘤细胞外泌体调控TAMs表型和功能相关。研究目的本研究拟通过体内实验与体外实验,借助分子生物学技术,探明双参颗粒抑制肿瘤生长是否与肺癌细胞外泌体调控TAMs表型与功能相关,以及初步探讨双参颗粒通过外泌体影响TAMs极化的机制是否与MIF-miR-34a-KLF4通路相关,为中医药“益气养阴活血法”防治肺癌提供客观依据。研究方法1.构建荷Lewis肺癌小鼠模型,以高、中、低三个剂量的双参颗粒对荷Lewis肺癌小鼠进行干预,观察各组小鼠移植瘤的体积、移植瘤质量,验证以益气养阴活血为治法的双参颗粒对小鼠肺癌的抑制作用。2.通过流式细胞术、免疫荧光染色法,分别对小鼠脾脏、移植瘤组织的M1型与M2型TAMs进行检测,观察双参颗粒对TAMs表型的影响。3.通过Lewis与M1型巨噬细胞混合皮下接瘤的方法,构建M1型TAMs过表达的小鼠肺癌移植瘤模型。观察移植瘤体积与质量,并通过流式细胞术检测小鼠M1型TAMs比例、M2型TAMs比例;免疫组织化学染色检测M1型TAMs标志蛋白一氧化氮合酶（inducible Nitric Oxide Synthase,iNOS）表达;Western Blot法检测肿瘤组织中精氨酸酶1（Arginase-1,ARG1）、iNOS的表达,探讨双参颗粒抑制Lewis肺癌的作用与TAMs极化的相关性。4.通过流式细胞术、Western Blot法检测小鼠体内调节性T细胞（Regulatory T cells,Tregs）比例、记忆T细胞比例,肿瘤组织中转化生长因子-β（Transforming growth factor-β,TGF-β）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）、MMP-9、MIF的表达,探讨双参颗粒调控肿瘤微环境,调节TAMs功能与调控TAMs极化的相关性。5.构建MIF+/+Lewis稳定转染细胞株、shMIF Lewis稳定转染细胞株,通过双参颗粒含药血清的干预,观察双参颗粒对小鼠肺癌细胞MIF表达的影响。6.提取各组肺癌细胞外泌体,qPCR法检测外泌体中miR-34a表达,观察双参颗粒对Lewis细胞来源外泌体中MIF下游靶基因miR-34a的影响,探讨双参颗粒是否通过影响MIF调节外泌体miR-34a的表达。7.收集双参颗粒干预后的MIF+/+Lewis细胞、MIF+/+Lewis细胞、Lewis细胞、shMIF Lewis细胞来源外泌体;并将各组外泌体对巨噬细胞进行干预,观察各组外泌体对巨噬细胞表型的影响,探讨双参颗粒能否通过肺癌细胞来源外泌体影响巨噬细胞极化,以及这一作用与MIF的关系。8.观察各组肺癌细胞外泌体干预后的巨噬细胞中KLF4基因的表达;探讨经双参颗粒干预后的肺癌细胞外泌体影响巨噬细胞极化与功能的作用是否与MIF-miR-34a-KLF4 通路相关。研究结果1.经双参颗粒干预后,荷Lewis肺癌小鼠移植瘤体积与质量减小,随着双参颗粒剂量的增加,其抑制肿瘤体积与质量的作用逐渐增强,高剂量双参颗粒对肿瘤体积与质量的抑制作用最强。2.高、中、低三个剂量的双参颗粒均能减少小鼠脾脏M2型TAMs 比例,增加M1型TAMs比例,但双参颗粒抑制M2型TAMs比例的作用未表现出与双参颗粒剂量有明确负相关。小鼠脾脏M1型TAMs 比例与双参颗粒剂量呈正相关,随双参颗粒剂量增大M1型TAMs比例逐渐增加。移植瘤组织中CD86的表达与双参颗粒的剂量呈正相关,CD206的表达与双参颗粒的剂量呈负相关。3.与经典的荷Lewis肺癌小鼠模型比较,荷Lewis+M1混合移植瘤小鼠模型的肿瘤体积减小,脾脏M1型TAMs比例明显升高。双参颗粒对Lewis+M1混合移植瘤小鼠模型进行干预后,M1型TAMs 比例增加,小鼠肿瘤体积进一步减小,提示双参颗粒抑制Lewis肺癌的作用可能与增加M1型TAMs比例相关。4.双参颗粒可以减少荷Lewis+M1混合移植瘤小鼠肿瘤组织中肿瘤微环境因子 ARG1、TGF-β、MMP-9、VEGF、MIF 的表达,增加 iNOS 的表达。5.双参颗粒能够增加CD8+中枢性记忆T细胞比例,并且与M1型TAMs 比例呈正比;降低CD8+效应性记忆T细胞比例,与M1型TAMs比例呈反比。同时,双参颗粒可以增加CD4+CD25+T细胞比例,减少CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例。6.通过慢病毒稳定转染细胞技术成功构建了 MIF+/+Lewis、shMIFLewis稳定转染肺癌细胞株,并分别在基因与蛋白水平进行了验证。7.MIF+/+Lewis细胞外泌体中miR-34a表达减少。双参颗粒含药血清在体外可以抑制MIF+/+Lewis细胞MIF蛋白与RNA的表达,同时增加MIF+/+Lewis细胞外泌体中miR-34a的表达。8.成功提取MIF+/+Lewis、shMIFLewis、Lewis细胞来源外泌体,并对巨噬细胞进行干预,成功检测到巨噬细胞吞噬外泌体过程。MIF+/+Lewis细胞来源外泌体在体外可以增加M2型巨噬细胞比例,降低M1型巨噬细胞比例;而经双参颗粒含药血清干预后的MIF+/+Lewis细胞,其外泌体能够逆转这一作用,增加M1型巨噬细胞比例。9.MIF+/+Lewis细胞外泌体在体外可以增加巨噬细胞中KLF4基因的表达;经双参颗粒含药血清干预后的MIF+/+Lewis细胞外泌体能够减少巨噬细胞KLF4基因的表达。研究结论1.双参颗粒可以抑制小鼠肺癌,其作用机制可能与调控小鼠TAMs向M1型极化相关;肺癌细胞中的MIF可能是双参颗粒的作用靶点之一。2.双参颗粒可以通过肺癌细胞来源的外泌体调控TAMs极化,其机制可能与MIF-miR-34a-KLF4 通路相关。3.中医益气养阴活血法防治肺癌的分子生物学机制可能与调节肿瘤细胞外泌体,调控TAMs极化与功能,重塑肿瘤微环境相关。
高瑞珂[2]（2021）在《疏肝健脾法治疗乳腺癌的疗效评价及对瘤前抑郁障碍小鼠乳腺癌作用机制研究》文中研究表明背景:乳腺癌已发展成为世界上新发病例中排名第一的恶性肿瘤,乳腺癌患者在发病前、诊断时、治疗中及长期存活期常伴有抑郁症状。既往的研究发现长期抑郁使患者罹患癌症的风险显着增加,且抑郁症状与乳腺癌的生存期呈负相关。疏肝健脾法是乳腺癌治疗的重要法则之一,但目前循证证据等级不足,因此本研究将系统评价疏肝健脾法对乳腺癌的疗效。疏肝健脾方为我科以疏肝健脾法确立的经验方,本课题组前期研究中发现疏肝健脾方可降低持续抑郁荷瘤小鼠和瘤后抑郁荷瘤小鼠体内MDSC细胞比例,通过激活NLRP3介导的细胞焦亡通路,抑制肿瘤的生长,但对瘤前抑郁对乳腺癌的发生发展有待进一步研究,故本研究建立瘤前抑郁障碍荷瘤小鼠模型,进一步探究抑郁对机体微环境、肿瘤发生发展的影响及疏肝健脾方的干预作用。目的:1.开展疏肝健脾法治疗乳腺癌有效性及安全性的系统评价和Meta分析,为疏肝健脾法治疗乳腺癌的临床运用提供更高级别的证据。2.建立瘤前抑郁障碍荷瘤小鼠模型,进一步阐明抑郁对机体微环境及肿瘤生长的影响。3.从肿瘤免疫微环境和NLRP3/caspase-1/GSDMD介导细胞焦亡通路,探索疏肝健脾方对瘤前抑郁荷瘤小鼠的作用机制,进一步揭示疏肝健脾法防治乳腺癌新的科学内涵,为中医学“情志学说”延长晚期带瘤生存提供理论依据。方法:1.疏肝健脾法治疗乳腺癌有效性及安全性的系统评价和Meta分析:检索国内外数据库;收集各数据库建库至2021年1月23日符合纳排标准的疏肝健脾法联合化疗治疗乳腺癌的RCT研究。疗效指标为ORR、DCR、KPS评分、抑郁量表评分、不良反应发生率。文献质量评价使用Cochrane手册提供的评估标准。Meta分析采用Review Manager 5.3软件。采用卡方检验进行组间的异质检验,若I2≤50%且P≥0.1采用固定效应模型进行分析,若I2>50%或P<0.1则采用随机效应模型进行分析,结果以森林图呈现,并进行敏感性和发表偏倚分析。2.疏肝健脾方对瘤前抑郁障碍小鼠乳腺癌的干预作用及分子机制研究:（1）瘤前抑郁荷瘤乳腺癌模型的构建与评价:采用慢性温和不可预知性刺激方法（CUMS）构建抑郁模型成功后,随机选取抑郁模型组小鼠,接种4T1-Luciferase（4T1-luc）小鼠乳腺癌细胞。以体重、蔗糖水偏嗜度、行为学测评、脑组织5-HT1AR表达量、接瘤成功率为模型评价指标。（2）抑郁对乳腺癌发生发展作用的研究:抑郁模型构建成功后,①进行脾脏HE染色、免疫细胞流式检测、血清炎症因子检测（ELISA法）;②随机选取正常对照组和抑郁模型组小鼠,接种4T1-luc细胞,观察各组小鼠体重、蔗糖水偏嗜度、行为学测评、脑组织5-HT1AR表达量、肿瘤体积、瘤重;并接瘤21天后进行脾脏HE染色、免疫细胞流式检测、血清炎症因子检测（ELISA法）。（3）疏肝健脾方对瘤前抑郁障碍荷瘤小鼠的干预作用的研究:各组干预21天,观察小鼠体重、蔗糖水偏嗜度、行为学测评、脑组织5-HT1AR表达量、肿瘤体积、瘤重;并进行脾脏HE染色、免疫细胞流式检测、血清炎症因子检测（ELISA法）。（4）疏肝健脾方对瘤前抑郁障碍乳腺癌小鼠干预作用机制的研究:①体外实验:培养4T1-luc细胞,采用CCK8法检测不同含药血清作用下4T1-luc细胞的增殖率。选取对4T1-luc细胞有明显抑制作用的含药血清浓度,设正常对照组、含药血清组,检测LDH释放量,IL-1 β、IL-18释放量（ELISA法）,细胞内NLRP3、caspase-1、GSDMD蛋白的表达量（Westernblotting法检测）。②体内实验:各组干预21天后,采用Western blotting法、免疫组化法检测肿瘤组织中NLRP3、caspase-1、GSDMD蛋白的表达量,免疫荧光法检测肿瘤组织中IL-1β的表达量。结果:1.疏肝健脾法治疗乳腺癌有效性及安全性的系统评价和Meta分析共纳入的29项疏肝健脾法联合化疗与单纯化疗的随机对照研究,共2294例患者。Meta分析结果显示与化疗组相较,疏肝健脾法联合化疗组的ORR、DCR、KPS改善率均明显升高,RR值分别为1.20、1.09、1.29;疏肝健脾法联合化疗组可明显改善患者的抑郁状态、提高KPS评分、CD4+T细胞比例,SMD分别为0.68、0.54、0.98;疏肝健脾法联合化疗组患者的消化道不良反应发生率、肝肾损伤发生率均低于单纯化疗组,RR值分别为0.79、0.44,上述组间差异均具有统计学意义,P<0.05。敏感性分析表明,排除任何研究都不会改变总体统计效果,不会影响最终统计结论。发表偏倚分析结果显示ORR、DCR、KPS改善率均未见发表偏倚。2.疏肝健脾方对瘤前抑郁障碍小鼠乳腺癌的干预作用及分子机制研究:（1）瘤前抑郁荷瘤乳腺癌模型的构建:CUMS造模35天后,与正常对照组相较,抑郁模型组体重、蔗糖水偏嗜度明显降低,运动总距离、中央区运动路程、中央区停留时间明显缩短,静止时间明显延长,海马组织CA1区5HT1AR表达量明显降低,差异均具有统计学意义,P<0.05。接种4T1-luc细胞后第7天,各组均可触及肿瘤结节,证明瘤前抑郁障碍型乳腺癌小鼠模型构建成功。（2）抑郁对机体免疫和炎症微环境的影响:CUMS造模35天后,脾脏中NKT、MDSC、TAM细胞比例明显增高,血清炎症因子IL-6、IL-1β、IL-18表达量明显升高,与正常对照组相较,差异明显,P<0.05。（3）抑郁可促进肿瘤的生长:接种乳腺癌细胞21天后,单纯荷瘤组的平均瘤重为1.02±0.08g,抑郁荷瘤组的平均瘤重为1.26±0.13g,抑郁对乳腺癌小鼠的促瘤率为23.50%。（4）抑郁可加重荷瘤小鼠体内免疫抑制和炎症微环境:与单纯荷瘤组相较,抑郁荷瘤组的脾脏组织红白髓结构模糊,脾窦扩张;抑郁荷瘤组免疫抑制细胞TAM细胞、MDSC细胞比例明显升高,差异具有统计学意义,P<0.05。（5）疏肝健脾方可改善小鼠抑郁状态:接瘤干预21天后,中药组、中药联合化疗组蔗糖水偏嗜度与正常对照组相较,差异无统计学意义;与抑郁荷瘤组相较,中药组、中药联合化疗组运动总路程明显延长,静止时间明显缩短,P<0.05。与化疗组相较,中药联合化疗组运动总路程明显延长、静止时间明显缩短,P<0.05。抑郁荷瘤组相较,中药组、中药联合化疗组脑组织5-HT1AR表达量明显升高,差异存在统计学意义,P<0.05。（6）疏肝健脾方可抑制肿瘤生长,改善机体免疫和炎症微环境:干预后21天,化疗组、中药组、中药联合化疗组的抑瘤率分别为67.28%,16.08%和81.29%。中药组脾脏组织中巨噬细胞增多,中药联合化疗组脾脏结构改善最为明显。与抑郁荷瘤组相较,中药联合化疗组脾脏、肿瘤组织中CD4+T细胞、CD8+T细胞、NKT细胞比例增高,MDSC细胞、TAM细胞的比例明显降低;中药联合化疗组脾脏和肿瘤组织中CD8+T细胞分泌INF-γ、Granzyme B的水平明显升高,P<0.05。与抑郁荷瘤组、化疗组相较,中药组IL-1 β的表达量明显减少（P<0.05）;与化疗组相较,中药联合化疗组IL-6的表达量明显降低（P<0.05）。（7）疏肝健脾方可通过NLRP3/caspase-1/GSDMD通路诱导4T1-luc乳腺癌细胞焦亡:①20%低剂量含药血清对4T1-luc细胞增殖率抑制最为明显。②与正常对照组相较,20%低剂量含药血清干预4T1-luc细胞48h后,LDH释放量和IL-1 β表达量明显增加（P<0.05）;NLRP3炎症小体蛋白、Caspase-1剪切段（p20）、GSDMD-N段蛋白表达量升高（P<0.05）。③干预21天后,与抑郁荷瘤组相较,干预各组NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达量均明显升高,其中Western blotting检测结果显示中药联合化疗组蛋白表达量明显高于抑郁荷瘤组、化疗组,且中药组活化的caspase-1、GSDMD-N端表达量明显高于抑郁荷瘤组（P<0.05）。免疫荧光检测结果显示化疗干预后IL-1 β表达量增多,中药组IL-1 β表达量明显减少。结论:1.以疏肝健脾法为治则的中药可能为抑郁障碍乳腺癌患者重要的治疗方案。2.疏肝健脾方抑制瘤前抑郁障碍乳腺癌发生发展的机制可能为疏肝健脾方通过NLRP3/caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路,诱导乳腺癌细胞死亡,并控制促炎因子IL-6、IL-1 β释放,降低MDSC、TAM细胞比例,提高NKT细胞比例、CD8+T细胞功能,从而改善抑郁对机体微环境的影响,抑制肿瘤生长。
徐爽[3]（2021）在《丹栀逍遥散对乳腺癌细胞能量代谢的影响及机制研究》文中指出目的:基于中医“气化”理论,探讨疏肝健脾方丹栀逍遥散对乳腺癌细胞能量代谢的影响及作用机制,为丹栀逍遥散抗乳腺癌提供实验依据。材料与方法:1.观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、细胞迁移、细胞周期、细胞凋亡的影响制备丹栀逍遥散含药血清。将30只SD大鼠分为空白对照组、丹栀逍遥散组、西黄丸组,每组10只。丹栀逍遥散8.99 g·kg-1,西黄丸0.55 g·kg-1,空白对照组给予生理盐水。1次·d-1,连续灌胃7d。末次给药2h后,腹主动脉取血,分离血清。丹栀逍遥散含药血清干预乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用MTT法,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响;进行细胞划痕实验,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移能力的影响;采用流式细胞术,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞周期的影响;采用Annexin V/PI双染色法,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响;采用Hoechst33342染色和Mito-Tracker Red线粒体荧光探针法,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞核及线粒体形态的影响;采用蛋白质免疫印迹法,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞BCL-2相关X蛋白（BAX）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（BCL-2）的影响。2.观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞能量代谢的影响丹栀逍遥散含药血清干预乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用葡萄糖含量检测试剂盒,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞内葡萄糖含量的影响;采用Seahorse XFe96细胞能量代谢分析仪进行胞外酸化率（ECAR）和氧消耗率（OCR）测试,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解能力、线粒体代谢能力的影响;采用免疫荧光染色法,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）表达的影响;采用蛋白质免疫印迹法,观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞已糖激酶2（HK2）、丙酮酸激酶M2（PKM2）、乳酸脱氢酶A（LDHA）表达的影响。3.观察丹栀逍遥散对乳腺癌MDA-MB-231细胞荷瘤裸鼠的影响乳腺癌MDA-MB-231细胞悬液接种于裸鼠皮下,接种后的裸鼠随机分为模型组、丹栀逍遥散组、西黄丸组,每组10只。丹栀逍遥散等临床剂量为11.69 g·kg-1,西黄丸等临床剂量为0.78 g·kg-1,模型组给予生理盐水。1次·d-1,连续灌胃22d。末次给药2h取血,处死裸鼠,完整剥离出肿瘤组织。计算荷瘤裸鼠肿瘤体积;采用乳酸含量和ATP含量检测试剂盒,检测丹栀逍遥散对荷瘤裸鼠肿瘤组织乳酸、ATP含量的影响;采用酶联免疫吸附法,检测丹栀逍遥散对荷瘤裸鼠血清中LDHA含量的影响;采用免疫组织化学染色法,检测丹栀逍遥散对荷瘤裸鼠肿瘤组织GLUT1、LDHA表达的影响;采用蛋白质免疫印迹法,检测丹栀逍遥散对荷瘤裸鼠肿瘤组织缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、GLUTI、PKM2、LDHA表达的影响。结果:1.丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、细胞迁移、细胞周期、细胞凋亡的影响MTT结果显示,丹栀逍遥散含药血清抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,以15%丹栀逍遥散含药血清处理乳腺癌MDA-MB-231细胞48h效果最佳（P<0.01）;细胞划痕实验结果显示,丹栀逍遥散降低乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移能力;流式细胞术结果显示,丹栀逍遥散含药血清将乳腺癌MDA-MB-231细胞周期阻滞于G0/G1期;Annexin V/PI双染色法结果显示,丹栀逍遥散含药血清促进乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡（P<0.01）;Hoechst 33342染色和Mito-Tracker Red线粒体荧光探针结果显示,丹栀逍遥散含药血清促使乳腺癌MDA-MB-231细胞线粒体结构损伤;蛋白质免疫印迹法结果显示,丹栀逍遥散含药血清上调乳腺癌MDA-MB-231细胞BAX的表达、下调BCL-2的表达。2.丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞能量代谢的影响葡萄糖含量检测结果显示,丹栀逍遥散含药血清降低乳腺癌MDA-MB-231细胞内葡萄糖含量（P<0.01）;ECAR结果显示,丹栀逍遥散含药血清降低乳腺癌MDA-MB-231细胞基础糖酵解、糖酵解能力值、糖酵解储备值;OCR结果显示,丹栀逍遥散含药血清降低乳腺癌MDA-MB-231细胞基础呼吸值、ATP产量、储备呼吸值;免疫荧光染色法结果显示,丹栀逍遥散含药血清降低乳腺癌MDA-MB-231细胞GLUT1的表达;蛋白质免疫印迹法结果显示,丹栀逍遥散含药血清下调乳腺癌MDA-MB-231细胞HK2、PKM2、LDHA的表达。3.丹栀逍遥散对乳腺癌MDA-MB-231细胞荷瘤裸鼠肿瘤组织的影响建立乳腺癌MDA-MB-231细胞移植瘤裸鼠模型。丹栀逍遥散抑制荷瘤裸鼠肿瘤体积的增长;乳酸含量检测结果显示,丹栀逍遥散减少荷瘤裸鼠肿瘤组织的乳酸含量（P<0.01）;ATP含量检测结果显示,丹栀逍遥散减少荷瘤裸鼠肿瘤组织的ATP含量（P<0.01）;酶联免疫吸附法结果显示,丹栀逍遥散降低荷瘤裸鼠血清中LDHA含量（P<0.01）;免疫组织化学染色法结果显示,丹栀逍遥散降低荷瘤裸鼠肿瘤组织GLUT1、LDHA的表达;蛋白质免疫印迹法结果显示,丹栀逍遥散下调荷瘤裸鼠肿瘤组织HIF-1α、GLUT1、PKM2、LDHA的表达。结论:1.丹栀逍遥散含药血清影响乳腺癌MDA-MB-231细胞功能,可能通过线粒体介导的凋亡途径诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡。2.糖酵解是乳腺癌MDA-MB-231细胞获得能量的路径之一,丹栀逍遥散含药血清降低乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解能力和线粒体代谢水平。3.缺氧状态下,乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解和葡萄糖转运增强;丹栀逍遥散可能通过下调缺氧诱导因子1α,抑制糖酵解和葡萄糖转运以延缓乳腺癌MDA-MB-231细胞荷瘤裸鼠肿瘤组织的生长。
张郜晨茜[4]（2021）在《南方红豆杉水提物通过ATF3介导的Hippo-YAP信号通路促进非小细胞肺癌凋亡的机制研究》文中认为目的 观察南方红 豆 杉水提物（aqueous extract of Taxus Chinensis var.mairei,AETC）对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞系的增殖抑制作用,并深入研究其通过激活转录因子3（activating transcription factor 3,ATF3）介导的 Hippo-YAP 信号通路促进NSCLC细胞系凋亡的机制研究,为AETC临床治疗肺癌提供基础研究依据,为NSCLC的治疗提供新靶点。方法1.运用Cell Counting Kit-8（CCK-8）法及流式细胞仪检测不同浓度及作用时间的AETC对NSCLC细胞系增殖和凋亡的作用;Western blot技术检测凋亡蛋白cleaved caspase 3、cleaved caspase 8、cleaved caspase 9和 cleaved PARP 的表达。2.普通转录组测序分析AETC对NSCLC细胞系促凋亡作用的靶点,明确ATF3是上调的差异表达基因,并用western blot、qRT-PCR和免疫荧光技术加以验证。3.采用慢病毒转染构建ATF3基因敲减稳转细胞株,运用western blot、qRT-PCR、免疫荧光、TUNEL染色检测ATF3基因敲减对caspase蛋白酶表达和AETC促NSCLC凋亡作用的影响。4.采用western blot、TUNEL染色检测AETC对Hippo-YAP信号通路关键蛋白（MOB1、p-MOB1、p-YAP（Ser397）、p-YAP（Ser127））的影响,YAP 抑制剂验证 AETC是通过激活Hippo信号通路促进NSCLC细胞凋亡。5.采用western blot、TUNEL染色检测AETC对ATF3基因敲减的NSCLC细胞株Hippo-YAP 信号通路中 MOB1、p-MOB1、p-YAP（Ser397）、p-YAP（Ser127）等蛋白表达的影响。6.构建NSCLC荷瘤裸鼠,采用AETC灌胃处理14天,观察荷瘤裸鼠一般情况,每隔两日测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;14天后剖取肿瘤,称重并计算抑瘤率。Western blot 检测裸鼠肿瘤组织中 ATF3、MOB1、p-MOB1、p-YAP（Ser397）、p-YAP（Ser127）以及凋亡蛋白的表达情况。免疫组化检测ATF3、YAP的表达和定位,TUNEL染色检测肿瘤组织凋亡情况。结果 1.CCK-8显示AETC能抑制NSCLC细胞增殖,呈现时间、剂量依赖性。流式细胞仪检测显示AETC增加H1975和A549细胞的凋亡率,Western blot结果提示AETC能增加NSCLC细胞凋亡蛋白cleaved caspase 3/8/9和cleaved PARP的表达。2.普通转录组测序结果显示AETC干预H1975和A549细胞后,前者有119个基因上调,20个基因下调;后者由796个基因上调,666个基因下调。其中,ATF3基因在两细胞中均显示为表达上调的差异基因,前者上调1.61倍,后者上调4.13倍。Western blot、qRT-PCR和免疫荧光检测结果与转录组测序结果一致。3.Western blot、qRT-PCR和免疫荧光检测H1975和A549 ATF3基因敲减慢病毒稳转细胞株中ATF3表达情况,结果显示与si-NC组相比,si-ATF3组ATF3蛋白和mRNA表达明显减弱,部分凋亡蛋白表达降低。si-ATF3和si-ATF3+AETC组相比,ATF3蛋白和mRNA表达无改变,凋亡蛋白表达也无改变。TUNEL染色显示的凋亡情况与western blot结果一致。4.Western blot检测结果显示AETC干预后,H1975和A549细胞中p-MOB1、p-YAP（Ser397）、p-YAP（Ser127）均明显上调,YAP抑制剂能显着增加AETC对NSCLC细胞中凋亡蛋白的表达,TUNEL染色结果也显示YAP抑制剂能增加AETC促凋亡的能力。5.Western blot检测ATF3基因敲减慢病毒稳转细胞株中Hippo通路表达情况,结果显示:在H1975细胞中,与si-NC组相比,si-ATF3组p-MOB1和p-YAP（Ser397）蛋白表达明显下降;si-ATF3组和si-ATF3+AETC组相比,p-MOB1和p-YAP（Ser397）蛋白表达无差异。在A549细胞中,与si-NC组相比,si-ATF3组p-MOB1、p-YAP（Ser127）和p-YAP（Ser397）蛋白表达明显下降,si-ATF3组和si-ATF3+AETC组相比,上述蛋白表达无差异。6.各组荷瘤裸鼠一般情况无差异;相较于对照组,AETC低、高剂量组肿瘤生长明显减慢,瘤重明显减小,H1975抑瘤率48.1%,A549抑瘤率59.5%。Western blot检测裸鼠肿瘤组织,结果显示ATF3在两细胞株中的AETC低、高剂量组均明显升高,免疫组化结果与此一致。在 H1975 移植瘤中 p-MOB1、p-YAP（Ser397）、p-YAP（Ser127）及凋亡蛋白表达明显上调,在A549移植瘤中p-YAP（Ser127）及凋亡蛋白表达明显上调,TUNEL染色结果与此一致。结论 1.AETC能显着抑制NSCLC细胞系的增殖作用,呈现浓度、剂量依赖性;AETC还能促进A549、H1975细胞凋亡,但与AETC剂量无关。2.AETC能显着提升ATF3蛋白和mRNA表达,ATF3基因敲减抑制NSCLC细胞凋亡,削弱AETC对NSCLC细胞的促凋亡作用。3.AETC能通过激活Hippo信号通路促进NSCLC细胞的凋亡,ATF3敲减后会抑制Hippo通路的激活以及AETC对Hippo通路的激活作用。4.AETC是通过ATF3分子介导的Hippo-YAP信号通路促进NSCLC细胞的凋亡,这可能是AETC抗肿瘤的机制之一;ATF3-Hippo-YAP信号通路可能是治疗NSCLC的新靶点。
杨杰[5]（2021）在《基于数据挖掘技术探讨罗秀丽教授治疗非小细胞肺癌的用药规律》文中认为目的:通过数据挖掘的统计学方法,初步探索和归纳罗秀丽教授治疗非小细胞肺癌的用药规律及诊治思维,总结并传承罗秀丽教授治疗非小细胞肺癌的学术思想,为中医治疗非小细胞肺癌拟方用药提供参考。方法:收集2018年10月至2020年10月在湖北省中医院肿瘤科住院治疗且服用中药的NSCLC患者资料。按照纳入和排除标准筛选出88例患者,收集处方共255首,将患者基本信息及处方导入Microsoft Office Excel 2016表格中建立数据库,进行数据初步整理和频数分析,总结出高频药物,并对高频药物的性味归经进行频数分析。然后将高频药物导入SPSS20.0,进行聚类分析和因子分析,最后总结出高频药物组合和中医治法。结果:本研究纳入中药共268味,总使用频次5323次,其中高频药物共61味,高频药物使用总频次为3981次,高频药物分属14个类别,药性以温性、平性为主,药味以甘味、辛味、苦味为主,归经以肺经、脾经、肝经、胃经为主。高频药物组合有木香、砂仁;六神曲、炒麦芽;鸡血藤、桑椹;款冬花、紫菀;黄连、黄芩;陈皮、法半夏等共有12对,其中关联性最高的药物组合为木香、砂仁。公因子共21个,治法包括理气健脾,消痞和胃;燥湿化痰,散结消肿;润肺化痰,止咳平喘;清热解毒,散结消肿;益气养阴,固表止汗;攻毒散结等。结论:1.黄芪、党参、麸炒白术、山药、当归、鳖甲、麦冬、玄参、石上柏、白花蛇舌草、芦根、法半夏、苦杏仁、浙贝母、桔梗、红花、蜈蚣、全蝎、陈皮、茯苓为罗秀丽教授治疗非小细胞肺癌的核心用药。木香、砂仁,鸡血藤、桑椹,款冬花、紫菀,石韦、山慈菇,五味子、防风常用药物组合。理气健脾,消痞和胃;燥湿化痰,散结消肿或清热润肺,止咳平喘;攻毒散结消肿;滋阴养血,活血化瘀为主要治法。核心处方为:黄芪30g党参30g麸炒白术20g茯苓20g陈皮10g法半夏15g甘草10g木香15g砂仁10g当归20g红花10g白花蛇舌草15g半枝莲15g藤梨根30g石上柏30g全蝎10g蜈蚣2条玄参20g桔梗20g鸡内金30g浙贝母20g。纵观全方,罗师治疗NSCLC的思路可分为三大方面:（1）首要从正气亏虚入手,着重补益人体脾胃之气;（2）抗肿瘤亦不可忽视,主要采用活血化瘀,清热化痰润肺,攻毒散结之法;（3）兼顾伴随症候,注重全面调理,标本兼顾。2.正气亏虚是非小细胞肺癌发生的关键病机,痰浊、瘀血、热毒、阴寒邪气等是重要病理因素,相互影响,久之酿生癌肿。以扶正固本为根本,并用化痰、散结、祛瘀并用,标本兼顾,为罗秀丽教授治疗非小细胞肺癌的诊治思路。
宋海侠,魏世鸿[6]（2021）在《红景天苷对A549细胞辐射敏感性的影响及其作用机制》文中研究指明目的探讨红景天苷（Sal）对人肺腺癌A549细胞辐射敏感性的影响及其机制。方法将0、2.5、5、10、20、40、60、80和100μmol/L Sal与A549细胞共培养,然后采用不同剂量X射线照射,实验分为对照组、Sal组、X-Ray组和Sal+X-Ray组。使用CCK-8细胞增殖法检测Sal不同浓度作用下A549细胞增殖的抑制作用,筛选出半数抑制浓度（IC50）;在IC50药物浓度下处理24、48、72和96h及给予0、2、4、6、8和10Gy的辐射剂量,CCK-8细胞增殖法筛选出最佳作用时间及最佳辐射剂量。克隆集落形成实验检测A549细胞放射敏感性,并采用"单击多靶模型"拟合细胞存活曲线,计算放射生物学参数放射增敏比（SER）。流式细胞术检测细胞周期及凋亡。对各组数据进行正态性和方差齐性的条件检验,相关性采用方差分析。结果细胞生长抑制实验结果显示,加入0、2.5、5、10、20、40、60、80和100μmol/L浓度的Sal作用于A549细胞后在48、72和96h时,各组吸光度值符合正态分布,不同浓度的Sal均对A549细胞有抑制作用,细胞抑制率与0μmol/L组相比,P48h分别为0.020、0.004、0.013、0.032、0.041、0.001、0.035和0.001;P96h分别为0.017、0.007、0.042、0.038、0.021、0.006、0.019和0.006。加入Sal处理72h后A549细胞株的抑制率分别为0、（14.02±0.15）%、（17.33±0.02）%、（20.70±0.73）%、（26.14±0.47）%、（32.62±0.82）%、（37.51±0.74）%、（49.15±1.54）%和（74.32±2.17）%,与0μmol/L组相比,差异均有统计学意义,均P<0.05。计算得出IC50约为84.73μmol/L。采用Sal84.73μmol/L联合8Gy-X-Ray作用于A549细胞后,各组A549细胞的克隆形成率分别为（50.51±1.01）%、（29.73±1.10）%、（17.03±0.47）%、（11.13±0.44）%、（2.87±0.09）%和（2.47±0.09）%;随着照射剂量的增加,细胞的克隆形成率均降低,与0Gy组相比,P值分别为0.031、0.002、0.025、0.002和<0.001。X-Ray+Sal组与X-Ray组相比,A549细胞克隆形成能力下降。X-Ray+Sal组的SER为3.38±0.16。加入IC50值浓度的Sal,与A549细胞共培养72h,8Gy辐射剂量下,X-Ray+Sal组G2/M期比例为（31.67±0.34）%,Sal组为（3.91±0.62）%,X-Ray组为（21.48±0.75）%;方差分析显示,X-Ray+Sal组与X-Ray组差异有统计学意义,P=0.025。细胞凋亡检测结果显示,空白对照组细胞凋亡率为（2.57±0.04）%,X-Ray+Sal组为（6.28±0.53）%,X-Ray组为（4.83±0.23）%,Sal组为（3.43±0.01）%。与X-Ray组和Sal组相比,X-Ray+Sal组凋亡率显着增加,F=42.08,P<0.01;方差分析显示,X-Ray+Sal组与X-Ray和Sal组相比,差异有统计学意义,均P<0.01。Sal增强放疗诱导的A549细胞凋亡。结论 Sal对A549细胞具有放射增敏作用,其机制可能是通过将细胞阻滞于放疗敏感时相G2/M期,与诱发细胞凋亡有关,Sal或有望成为肺癌放射治疗新的增敏药物。
赵晓晴[7]（2021）在《益气扶正合剂联合EGFR-TKI治疗非小细胞肺癌（气阴两虚型）的临床研究》文中进行了进一步梳理目的:通过对比分析益气扶正合剂联合EGFR-TKI治疗晚期非小细胞肺癌的有效性、安全性。方法:随机将60例符合标准的患者分成两组,每组30例。治疗组予以益气扶正合剂联合EGFR-TKI治疗,对照组单用EGRF-TKI治疗。记录并比较两组近期疗效、无进展生存期、KPS评分、中医证候分级、不良反应、安全性指标,及治疗前后肿瘤标志的表达水平。临床观察及数据统计结束后,应用spss 26.0软件进行分析。结果:（1）基线资料:本实验两组患者在吸烟史、病理类型、临床分期、性别、年龄、靶向用药、治疗前KPS、中医证候等级方面,经基线对比分析,差异无统计学意义（P>0.05）,两组间具有可比性。（2）近期疗效:治疗组ORR及DCR（ORR 60.0%;DCR 93.3%）均高于对照组（ORR 52.3%;ORR 90.0%）。经检验,差异无统计学意义（P>0.05）。（3）中医证候评分:两组患者治疗后气急、咳嗽咳痰评分均较前减低。同时治疗组可使食少纳呆、神疲乏力、心烦失眠、痰血、恶心呕吐、胸闷评分较前降低,对照组恶心呕吐、口干咽燥评分升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。中医证候改善总有效率治疗组（73.33%）优于对照组（46.76%）,差异具有统计学意义。（P<0.05）。（4）PFS:PFS治疗组较对照组显着延长,差异具有统计学意义（P<0.05）。（5）KPS评分:治疗组治疗前后P<0.05,差异有统计学意义;对照组治疗前后P>0.05,无统计意义。KPS疗效评分治疗组明显优于对照组,差异具有统计学意义,P=0.038<0.05。（6）肿瘤标志物:治疗后,治疗组CEA下降水平较对照组更加明显,两组间差异显着（P<0.05）。CA125、CYFRA211治疗前后两组差异均无统计学意义（P>0.05）。（7）毒副反应对比:对照组皮疹发生率（73.33%）较治疗组（44.33%）明显升高,差异有统计学意义（P=0.014<0.05）。两组患者腹泻发生率相似,无显着性差异（P>0.05）。（8）安全性评价:两组患者在血常规、肝肾功能检查结果方面进行对比,治疗前后差别均无统计学意义。（P>0.05）。结论:益气扶正合剂联合EGFR-TKI治疗晚期NSCLC患者,具有安全性,能够更好的提高生活质量,改善肺癌患者的临床症状,能够有效减轻靶向药物带来的毒副反应,延长患者无进展生存期,延缓耐药的发生。
陆秋露[8]（2021）在《固正消癌方对肠癌的临床疗效初探及其调控糖代谢相关机制研究》文中进行了进一步梳理目的:1.观察固正消癌方对肠癌术后患者的临床疗效;2.在临床疗效的基础上,建立裸鼠皮下移植瘤模型,探讨固正消癌方对肠癌糖代谢过程的影响以及分子机制,探索固正消癌方治疗肠癌的可能分子机制,为中药治疗肠癌的机制进行分子层面的剖析,为肿瘤的异常代谢机制、肠癌治疗方向提供新的思路及靶点。方法:1.通过观察固正消癌方联合化疗对肠癌术后患者体重、kps评分、肿瘤指标、免疫功能、中医临床症状以及化疗相关不良反应等多方面的影响,探讨固正消癌方的临床疗效和优势;2.在临床疗效的基础上,建立裸鼠皮下移植瘤模型,探讨固正消癌方对裸鼠血清LDH含量的影响及其对肠癌移植瘤组织中PKM2、c-Myc蛋白的影响,探讨固正消癌方对肠癌糖代谢过程的影响以及分子机制,探索固正消癌方治疗肠癌的可能机制。结果:1.单纯化疗组患者在治疗后体重明显减轻（p<0.01）,固正消癌方组在治疗前后体重差异不显,无统计学意义（p>0.05）,两组治疗前后体重差的差异明显（p<0.01）;就中医证候积分而言,单纯化疗组及固正消癌方组在治疗后症状出现明显的改善（p<0.01）,固正消癌方组改善更加明显,两组中医证候积分疗效差异显着（p<0.05）;就Kps评分而言,固正消癌方组kps评分治疗后明显提高（p<0.05）,单纯化疗组则并没有发生明显改变（p>0.05）,两组在改善疗效上的差别显着（p<0.05）;就CA199及CEA而言,固正消癌方组在治疗前后同单纯化疗组相比,差异没有统计学意义（p>0.05）;就免疫指标而言,这里的免疫指标主要指CD3+、CD4+及CD4+/CD8+,治疗后,单纯化疗组免疫指标都显示出不同幅度的降低（p<0.05）,固正消癌方组的免疫指标则都显示出了不同程度的提高（p<0.05）,固正消癌方组的指标治疗后相较于单纯化疗组明显增加（p<0.05）;就各种不良反应而言,这些不良反应主要包括血液系统反应、消化系统反应、泌尿系统反应、心脏不良反应等等,在前两项反应上,单纯化疗组和固正消癌方组差异表现比较明显（p<0.05）,在后两项反应上,单纯化疗组和固正消癌方组没有表现出非常明显的差异（p>0.05）。2.与空白对照组相比,模型组及固正消癌方低中高剂量组的小鼠血清乳酸脱氢酶含量相对较高（p<0.05）;模型组、固正消癌方低中高剂量组的小鼠血清乳酸脱氢酶含量依次降低,固正消癌方三组与模型组差异具有统计学意义（p<0.05）;在免疫蛋白印迹法及免疫组化法检测下,PKM2及c-Myc蛋白在模型组、固正消癌方低中高剂量组中的表达逐渐减少,其中固正消癌方三组和模型组之间的差异显着,表现出了统计学方面的意义（p<0.05）。结论:1.固正消癌方可以稳定肠癌术后化疗患者的体重,在改善患者中医临床症状,改善患者功能状态及生活质量,提高患者免疫功能及减轻化疗毒副作用上皆有一定优势。2.糖代谢与肠癌发生发展关系密切,固正消癌方能通过抑制癌基因c-Myc蛋白表达,进而对糖酵解相关酶PKM2及LDH的表达产生影响,从而有效抑制肠癌细胞的糖酵解水平,且抑制效果与固正消癌方有一定量效关系,因而调控肠癌的关键代谢机制。
马锦坤[9]（2020）在《基于S100A9与CyPA探讨扶正增效方对在肺腺癌放射增敏作用的调控机制》文中指出近年我国非小细胞肺癌发病率与死亡率呈明显上升趋势,其中肺腺癌是最常见的亚型。原发性肺癌患者约70%需接受放射治疗,放疗可以抑制局部肿瘤生长,减轻病灶对正常组织的压迫和侵蚀,和手术、化疗同为非小细胞肺癌的主要治疗手段之一。然而正常肺部组织对放射线耐受性差,通过提高放射剂量增加放疗疗效难以实施,因此寻找适宜的放射增敏剂显得尤为重要。放射增敏剂不仅能增加肿瘤组织对放射线敏感性,提高局部控制程度,同时还可减少放射剂量,提高患者生活质量,因此对肺癌放射增敏剂研究具有重要深远意义。近年来靶向和基因药物与放射结合,通过信号传导、周期调控、癌基因转化因子、凋亡、血管生成因子等多途径提高放射疗效,是目前研究热点。当今靶向或基因药物联合放射存在若干问题,其中一个突出问题是此类药物的选择并不是根据组织放射增敏预测因子来确定,治疗相同肿瘤时疗效差别较大,该类药物研究重点应针对放射敏感预测因子进行。中药因其高效也成为放射增敏剂研究焦点。扶正增效方是针对放疗引起的热毒耗伤气阴证候以及活血化瘀改善组织缺氧的辨证组方,由银花、沙参、枸杞、莪术、生黄芪、苏木、红花等组成。前期临床证实扶正增效方能提高非小细胞肺癌放射治疗的近期疗效,减轻放疗副反应并延长生存期。通过蛋白组学研究发现CyPA和S100A9基因是扶正增效方可能的作用靶点。进一步通过实验研究证实扶正增效方可以降低S100A9和CyPA表达。我们用siRNA初步证实S100A9、CyPA与肺癌放射敏感性相关。为深入研究明确中药放射增敏作用与机制,本课题通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建CyPA敲除、S100A9敲除、S100A9-CyPA敲除肺腺癌细胞系;利用慢病毒转染过表达技术制备CyPA过表达、S100A9过表达、S100A9-CyPA过表达肺腺癌细胞系,并验证其放射敏感性,阐明S100A9与CyPA在肺腺癌放射增敏中的关系,明确扶正增效方对肺腺癌放射增敏调控机制。确定肺腺癌放射敏感性预测因子。目的:1.探讨S100A9、CyPA在肺腺癌放射增敏中的协同或独立关系,找出主要靶点。2.探讨扶正增效方对S100A9与CyPA在肺腺癌放射增敏调控机制。方法:1.选择高表达S100A9及CyPA的人肺腺癌细胞株H1975,通过CRISPR/Cas9技术分别敲除S100A9、CyPA、S100A9-CyPA基因,再通过基因转染技术使S100A9、CyPA、S100A9-CyPA过表达。通过体内、体外放射生物学实验观察S100A9、CyPA与肺腺癌放射敏感性的关系。比较过表达与无表达上述基因/蛋白后,肺腺癌细胞的放射敏感性差异,从而判断上述基因/蛋白是否真正在放射增敏中发挥了明显确作用,并确定它们的协同或独立关系,找出主要基因。2.制备扶正增效方中药浸膏。通过观察扶正增效方干预敲除及未敲除相关基因的肺腺癌细胞体外放射实验,来确定扶正增效方对肺腺癌细胞放射增敏靶点,并找出主要靶点。结果:1.成功构建肺腺癌H1975细胞S100A9基因敲除、CyPA基因敲除、S100A9-CyPA基因敲除、S100A9基因过表达、CyPA基因过表达、S100A9-CyPA基因过表达细胞系。2.CyPA基因敲除细胞系在体外实验中放射敏感性显着增强,CyPA基因过表达细胞系具有放射抵抗作用,CyPA表达量与H1975放射敏感性呈线性关系。S100A9基因敲除及过表达均表现出放射抵抗,S100A9-CyPA基因敲除细胞系放射敏感性未见明显增强,但S100A9-CyPA基因过表达细胞系放射抵抗明显增强。3.CyPA基因敲除组在体内实验中显着增加抑瘤率,且能促进细胞凋亡。CyPA基因敲除可能通过G2/M期阻滞增加放射敏感性。S100A9基因和S100A9-CyPA基因能够影响抑瘤率但不能影响放射后细胞凋亡。4扶正增效方可增加野生型及S100A9基因敲除、S100A9-CyPA基因敲除细胞系放射敏感性,且能诱导细胞周期G2/M期阻滞,促进DNA损伤和细胞凋亡。CyPA基因是扶正增效方主要靶点。结论:1.CyPA基因表达与细胞放射耐受性相关,降低CyPA基因表达能明显提高肺腺癌细胞放射敏感性,CyPA可作为肺腺癌放射敏感性预测基因。S100A9在本实验中未表现出对肺腺癌放射敏感性具有调节作用。H1975细胞中CyPA与S100A9基因没有放射协同作用。2.扶正增效方能抑制肺腺癌细胞增殖、增强细胞放射敏感性,CyPA基因是扶正增效方增加放射敏感性主要靶点之一。
姚林艳[10]（2020）在《吉非替尼联合125I放射性粒子治疗肺腺癌有效性的动物研究》文中进行了进一步梳理目的:研究吉非替尼联合125I放射性粒子治疗肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的有效性。方法:利用稳定表达荧光素酶的A549-luc人肺腺癌细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型24只,20d后成瘤大小8-10mm。24只荷瘤裸鼠随机分为空白对照组6只、125I放射性粒子植入组6只,吉非替尼组6只,吉非替尼联合125I放射性粒子植入组6只。观察肿瘤生长情况,持续测量肿瘤大小变化。利用活体生物发光成像检测含荧光素酶报告基因的人肺腺癌A549-luc细胞在体内的生物发光活性。治疗前及治疗后1周行18F-FDG Micro-PET/CT检查。35天后处死裸鼠,绘制肿瘤生长曲线。结果:4组治疗前肿瘤体积差异无统计学意义,治疗后5周4组(对照组,125I放射性粒子,吉非替尼组,联合用药组)肿瘤体积分别为（1509.25±709.93）、（840.45±43.35）、（1052.96±247.42）和（317.34±52.08）mm3,差异有统计学意义（F=10.305,P<0.05）。吉非替尼联合125I放射性粒子明显低于吉非替尼组、125I放射性粒子组和对照组,且明显低于治疗前;4组治疗前肿瘤生物荧光信号强度无明显差异,治疗后4周4组肿瘤生物荧光光子数分别为（198605000.0±12976503.00）、（99263333.33±49293480.57）、（87419500.0±24039740.21）、（48433333.33±14417910.62）P/sec/cm2/sr,差异有统计学意义（F=28.975,P<0.05）,吉非替尼联合125I放射性粒子植入组明显低于单独125I放射性粒子组、吉非替尼组及对照组,且明显低于治疗前。4组治疗前SUVmax和SUVmean值差异无统计学意义,治疗后1周4组SUVmax和SUVmean值分别为0.79±0.14和0.54±0.06、0.76±0.33和0.47±0.41、0.79±0.15和0.48±0.11、0.74±0.14和0.57±0.74,差异无统计学意义（F=0.201,P>0.05）。结论:吉非替尼联合125I放射性粒子近距离治疗能显着抑制肿瘤的生长。
二、扶正增效方对裸鼠人肺腺癌移植瘤照射后各时相细胞在细胞周期分布变化的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、扶正增效方对裸鼠人肺腺癌移植瘤照射后各时相细胞在细胞周期分布变化的影响（论文提纲范文）
（1）基于肿瘤细胞外泌体调控TAM细胞极化探讨双参颗粒抑制肺癌的作用机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 肺癌微环境中外泌体的生物学功能及其临床应用 |
| 1 研究背景 |
| 2 外泌体的形成和特征 |
| 3 外泌体的释放 |
| 4 肺癌微环境中外泌体的功能 |
| 5 外泌体在化疗耐药与靶向治疗耐药中的作用 |
| 6 外泌体在临床诊断和治疗中的应用 |
| 7 肿瘤微环境中外泌体可以作为肺癌的预测指标 |
| 8 讨论 |
| 参考文献 |
| 附表1 外泌体肺癌微环境不同细胞之间的调控 |
| 附表2 外泌体在治疗、诊断与预后中的相关研究 |
| 综述二 中医药调控肿瘤微环境防治肺癌研究进展 |
| 1 肿瘤免疫微环境 |
| 2 中医药对肿瘤相关巨噬细胞极化与功能的调控 |
| 3 中医药对髓源性抑制细胞的调节 |
| 4 中医药对T、B淋巴细胞、NK细胞及免疫靶点的调控 |
| 5 中医药对调节性T细胞的调控 |
| 6 中医药重塑上皮间质转化 |
| 7 中医药对血管生成的作用 |
| 8 中医药对肿瘤相关成纤维细胞的调控 |
| 9 中医药对肿瘤相关树突状细胞的作用 |
| 10 中医药对肿瘤微环境炎症因子的调控 |
| 11 中医药对微环境中外泌体及非编码RNA表达的作用 |
| 12 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 双参颗粒抑制荷Lewis肺癌小鼠移植瘤的药效学实验 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 双参颗粒对荷Lewis肺癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞表型的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 双参颗粒干预荷M1型巨噬细胞与Lewis肺癌细胞混合移植瘤小鼠模型的实验研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 双参颗粒对小鼠TAM细胞功能因子、记忆T细胞、Treg细胞的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验五 MIF基因过表达与MIF基因干扰稳定转染Lewis细胞株的构建 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验六 双参颗粒含药血清对MIF~(+/+)Lewis及shMIF-Lewis细胞中MIF蛋白表达的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验七 双参颗粒含药血清对Lewis来源外泌体及外泌体中MicroRNA-34a的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验八 双参颗粒含药血清干预MIF~(+/+)Lewis细胞来源外泌体对巨噬细胞表型及KLF4的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附件 |
（2）疏肝健脾法治疗乳腺癌的疗效评价及对瘤前抑郁障碍小鼠乳腺癌作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 细胞焦亡与恶性肿瘤发生发展作用的研究进展 |
| 1 细胞焦亡的研究历程 |
| 2 细胞焦亡的分子机制 |
| 3 细胞焦亡与恶性肿瘤 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 中医药治疗乳腺癌的研究进展 |
| 1 中医对乳腺癌的认识 |
| 2 中药在化疗阶段的作用及其主要治则治法 |
| 3 中医药联合化疗的基础研究 |
| 4 总结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 疏肝健脾法治疗乳腺癌有效性及安全性的系统评价和Meta分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 文献检索及筛选 |
| 1.2 数据提取 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 质量评估方法 |
| 1.6 数据分析方法 |
| 1.7 文献检索过程 |
| 2 结果 |
| 2.1 纳入研究的基本信息 |
| 2.2 研究质量的评估 |
| 2.3 疏肝健脾法+化疗与单纯化疗治疗乳腺癌的ORR比较 |
| 2.4 疏肝健脾法+化疗与单纯化疗治疗乳腺癌的DCR比较 |
| 2.5 疏肝健脾法+化疗与单纯化疗改善乳腺癌患者抑郁状态的差异 |
| 2.6 疏肝健脾法+化疗与单纯化疗对乳腺癌患者生存质量的影响差异 |
| 2.7 疏肝健脾法+化疗与单纯化疗对乳腺癌患者CD3~+、CD4~+T细胞的影响差异 |
| 2.8 疏肝健脾法+化疗与单纯化疗乳腺癌患者不良事件构成比 |
| 2.9 疏肝健脾法+化疗与单纯化疗乳腺癌患者不良事件发生率差异 |
| 2.10 敏感性及发表偏倚分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 疏肝健脾方对瘤前抑郁障碍型乳腺癌小鼠的干预作用及分子机制研究 |
| 前言 |
| 实验一: 瘤前抑郁障碍型乳腺癌小鼠模型的建立及评价 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二: 抑郁障碍对小鼠乳腺癌发生发展影响的研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三: 疏肝健脾方对瘤前抑郁障碍乳腺癌小鼠干预作用及对肿瘤微环境影响的研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验四: 基于NLRP3/caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路探讨疏肝健脾方对瘤前抑郁障碍乳腺癌的作用机制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 研究结论 |
| 第五部分 不足与展望 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 附件 |
（3）丹栀逍遥散对乳腺癌细胞能量代谢的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 实验一 丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231 细胞的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二 丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231 细胞能量代谢的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三 丹栀逍遥散对乳腺癌MDA-MB-231 细胞荷瘤裸鼠肿瘤组织的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 中医药干预肿瘤细胞糖代谢重编程究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（4）南方红豆杉水提物通过ATF3介导的Hippo-YAP信号通路促进非小细胞肺癌凋亡的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 南方红豆杉水提物促进非小细胞肺癌凋亡的体外研究 |
| 一、材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| 1.细胞株 |
| 2.实验药品 |
| 3.实验器材 |
| 4.实验试剂 |
| 5.主要试剂配制 |
| (二) 实验方法 |
| 1.细胞传代、冻存与复苏 |
| 2.CCK-8法检测AETC对NSCLC细胞增殖的影响 |
| 3.流式细胞仪检测AETC对H1975和A549细胞株凋亡的影响 |
| 4.Western blot法检测AETC对H1975和A549凋亡蛋白的影响 |
| 5.TUNEL染色检测Z-DEVE-FMK对AETC促H1975和A549凋亡作用的影响 |
| 6.Western blot检测Z-DEVE-FMK对AETC促H1975和A549凋亡作用的影响 |
| 7.转录组测序(the RNA sequencing, RNA-seq) |
| 8.qRT-PCR检测AETC对H975和A549细胞中ATF3 mRNA表达的影响 |
| 9.免疫荧光检测AETC对ATF3在H1975和A549细胞中表达的影响 |
| 10.Western blot检测AETC对H1975和A549细胞ATF3蛋白表达的影响 |
| 11.ATF3基因敲减慢病毒稳转细胞株构建 |
| 12.qRT-PCR检测AETC对ATF3基因敲减慢病毒稳转细胞株中ATF3 mRNA表达的影响 |
| 13.免疫荧光检测AETC对ATF3基因敲减慢病毒稳转细胞株中ATF3表达的影响 |
| 14.Western blot检测AETC对ATF3基因敲减慢病毒稳转细胞株中ATF3蛋白表达的影响 |
| 15.TUNEL染色检测AETC对ATF3基因敲减慢病毒稳转细胞株凋亡的影响 |
| 16.Western blot检测AETC对ATF3基因敲减慢病毒稳转细胞株中凋亡蛋白表达的影响 |
| 17.Western blot检测AETC对H1975和A549细胞中Hippo-YAP通路蛋白表达的影响 |
| 18.Western blot检测Verteporfin与AETC对H1975和A549细胞中Hippo-YAP通路蛋白表达的影响 |
| 19.TUNEL染色检测Verteporfin对AETC促H1975和A549细胞凋亡的影响 |
| 20.Western blot检测AETC对ATF3基因敲减慢病毒稳转细胞株中Hippo-YAP通路蛋白表达的影响 |
| 21.HPLC检测AETC部分有效成分 |
| 22.统计学处理 |
| 二、结果 |
| (一) 南方红豆杉水提物对不同NSCLC细胞的增殖抑制作用 |
| (二) 南方红豆杉水提物对H1975和A549细胞凋亡的影响 |
| (三) 南方红豆杉水提物通过调控ATF3促进H1975和A549细胞凋亡 |
| (四) 南方红豆杉水提物通过调控Hippo-YAP通路促进H1975和A549细胞凋亡 |
| (五) 南方红豆杉水提物通过ATF3介导的Hippo-YAP通路促进H1975和A549细胞凋亡 |
| 三、分析与讨论 |
| 四、小结 |
| 第二部分 南方红豆杉水提物促进非小细胞肺癌凋亡的体内研究 |
| 一、材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| 1.实验动物 |
| 2.实验药品 |
| 3.实验器材 |
| 4.实验试剂 |
| (二) 实验方法 |
| 1.荷瘤裸鼠模型构建AETC |
| 2.免疫组化检测荷瘤裸鼠肿瘤组织中YAP和ATF3分子表达情况 |
| 3.TUNEL染色检测各组荷瘤裸鼠肿瘤组织的凋亡情况 |
| 4.Western blot法检测AETC对荷瘤裸鼠肿瘤组织凋亡蛋白的影响 |
| 5.Western blot法检测AETC对荷瘤裸鼠肿瘤组织ATF3分子表达的影响 |
| 6.Western blot法检测AETC对荷瘤裸鼠肿瘤组织Hippo-YAP信号通路的影响 |
| 7.统计学分析 |
| 二、结果 |
| (一) 南方红豆杉水提物对荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用 |
| (二) 南方红豆杉水提物对荷瘤裸鼠肿瘤组织中ATF3表达的影响 |
| (三) 南方红豆杉水提物对荷瘤裸鼠肿瘤组织中Hippo-YAP信号通路的影响 |
| 三、分析与讨论 |
| 四、小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 附表 |
| 致谢 |
| 文献综述 ATF3在恶性肿瘤发生及治疗中作用的研究进展 |
| 参考文献 |
（5）基于数据挖掘技术探讨罗秀丽教授治疗非小细胞肺癌的用药规律（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 1.研究对象 |
| 1.1 方药数据资料来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 数据纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 2.研究方法 |
| 2.1 原始数据资料库的建立 |
| 2.2 数据资料规范化处理 |
| 2.3 统计研究方法 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 患者基本信息统计结果 |
| 3.2 频数分析结果 |
| 3.3 高频中药聚类分析与因子分析结果 |
| 4.讨论 |
| 4.1 患者基本信息统计结果分析 |
| 4.2 高频药物频数及功效归类分析 |
| 4.3 高频药物性味归经频数分析 |
| 4.4 高频药物的聚类分析与因子分析 |
| 5.核心处方分析 |
| 6.罗秀丽教授论治NSCLC经验总结 |
| 6.1 对NSCLC病因病机的认识 |
| 6.2 治法特点 |
| 结语与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 综述:浅谈中西医结合治疗非小细胞肺癌的认识 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）红景天苷对A549细胞辐射敏感性的影响及其作用机制（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要试剂与仪器 |
| 1.3 Sal溶液的配制 |
| 1.4 细胞增殖的CCK-8检测影响 |
| 1.5 克隆集落形成实验 |
| 1.6 流式细胞术检测细胞周期 |
| 1.7 细胞凋亡的流式细胞术检测 |
| 1.8 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 Sal对A549细胞的抑制作用 |
| 2.2 克隆形成 |
| 2.3 Sal对A549细胞周期分布影响 |
| 2.4 Sal对A549细胞凋亡的影响 |
| 3 讨论 |
（7）益气扶正合剂联合EGFR-TKI治疗非小细胞肺癌（气阴两虚型）的临床研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 临床研究 |
| 1.临床资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 西医诊断标准 |
| 1.3 中医诊断标准 |
| 1.4 纳入标准 |
| 1.5 排除标准 |
| 1.6 剔除标准 |
| 1.7 脱落(退出)病例标准及处理 |
| 2.研究方法 |
| 2.1 分组方法 |
| 2.2 治疗方法 |
| 2.3 观察指标 |
| 2.4 疗效评价标准 |
| 2.5 统计学方法 |
| 3.研究结果 |
| 3.1 一般资料 |
| 3.2 近期疗效对比 |
| 3.3 中医症候等级治疗前后比较 |
| 3.4 PFS对比 |
| 3.5 KPS评分对比 |
| 3.6 肿瘤标志物变化 |
| 3.7 毒副作用对比 |
| 3.8 安全性评价 |
| 第二部分 讨论 |
| 1.EGFR-TKI分子靶向治疗非小细胞肺癌的研究进展 |
| 1.1 NSCLC中的EGFR基因突变 |
| 1.2 EGFR-TKI的临床应用 |
| 1.3 EGFR-TKI存在的问题 |
| 2.中医对非小细胞肺癌的认识 |
| 2.1 中医对肺癌病因病机的认识 |
| 2.2 肺癌的辩证分型 |
| 2.3 中医药联合EGFR-TKI治疗NSCLC |
| 3.导师对肺癌的认识 |
| 4.益气扶正合剂理论研究及药理分析 |
| 4.1 .益气扶正合剂组方来源及方解 |
| 4.2 益气扶正合剂的药理作用机制 |
| 4.3 益气扶正合剂的临床研究 |
| 5.典型案例分析 |
| 6.本次研究结果分析 |
| 7.问题与展望 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 EGFR-TKIs分子靶向治疗非小细胞肺癌的中西医研究进展 |
| 参考文献 |
（8）固正消癌方对肠癌的临床疗效初探及其调控糖代谢相关机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.传统医学对肠癌的研究进展 |
| 1.1 肠癌的中医病名 |
| 1.2 肠癌的病因病机 |
| 1.3 肠癌的中医治疗 |
| 1.4 中医治疗肠癌的缺点及不足 |
| 2.现代医学对肠癌的研究进展 |
| 2.1 肠癌的流行病学 |
| 2.2 肠癌的发病因素 |
| 2.3 肠癌的诊断 |
| 2.4 肠癌的治疗现状 |
| 3.糖代谢与恶性肿瘤的研究进展 |
| 3.1 有氧糖酵解 |
| 3.2 糖酵解与肿瘤的相互作用 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1.临床资料 |
| 1.1 病例选择 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除标准 |
| 1.6 脱落标准 |
| 2.研究方法 |
| 2.1 试验用药 |
| 2.2 用药方案 |
| 2.3 观察项目 |
| 2.4 统计分析 |
| 3.研究结果 |
| 3.1 基线资料分析 |
| 3.2 临床疗效分析 |
| 3.3 安全性指标及毒性反应 |
| 4.小结 |
| 第三部分 实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 肠癌细胞 |
| 1.3 药物 |
| 1.4 主要实验试剂 |
| 1.5 主要实验仪器 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 动物造模分组 |
| 2.2 建立裸鼠皮下移植瘤模型 |
| 2.3 动物分组及给药 |
| 2.4 乳酸脱氢酶(LDH)测定 |
| 2.5 免疫蛋白印迹法(Western blot)检测c-MYC和PKM2的表达 |
| 2.6 免疫组织化学法(IHC)检测c-MYC和PKM2的表达 |
| 2.7 数据分析及统计 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 造模及小鼠一般情况 |
| 3.2 干预后各组小鼠血清乳酸脱氢酶含量 |
| 3.3 干预后各组小鼠肿瘤组织中PKM2、c-MYC的表达情况 |
| 4.小结 |
| 第四部分 讨论 |
| 1.固正消癌方组方合理性 |
| 2.固正消癌方临床有效性 |
| 3.糖代谢与固正消癌方 |
| 4.不足及展望 |
| 第五部分 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（9）基于S100A9与CyPA探讨扶正增效方对在肺腺癌放射增敏作用的调控机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 第一部分 综述 |
| 综述一 CYPA在肿瘤中的研究进展 |
| 1. 概述 |
| 2. CyPA的分子结构和分布 |
| 3. CyPA在肿瘤研究中的进展 |
| 4. CyPA在肿瘤中的作用机制 |
| 5. 展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 S100A9在肿瘤中的研究进展 |
| 1. S100A9概述 |
| 2. S100A9在肿瘤中的生物学作用 |
| 3. S100A9在不同肿瘤中的表达 |
| 4. 展望 |
| 参考文献 |
| 综述三 中医药对于非小细胞肺癌放疗增效的系统评价 |
| 1. 概述 |
| 2. 资料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究—扶正增效方对于肺腺癌放射增敏作用的分子机制研究 |
| 前言 |
| 实验一 制备肺腺癌H1975细胞CYPA、S100A9、S100A9-CYPA基因敲除/过表达模型 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二 基因敲除及基因过表达细胞系体外、体内放射敏感性实验 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三 扶正增效方对S100A9与CYPA在肺腺癌放射增敏中调控机制研究 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）吉非替尼联合125I放射性粒子治疗肺腺癌有效性的动物研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 绪论 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验试剂及设备 |
| 2.1.2 实验过程配置试剂 |
| 2.1.3 实验细胞 |
| 2.1.4 实验动物 |
| 2.1.5 实验药物 |
| 2.1.6 放射性粒子 |
| 2.2 细胞培养 |
| 2.2.1 细胞复苏 |
| 2.2.2 细胞传代 |
| 2.2.3 细胞计数 |
| 2.2.4 细胞冻存 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 制备移植瘤模型 |
| 2.3.2 荷瘤裸鼠分组及各组情况 |
| 2.3.3 计算肿瘤体积、肿瘤标本采集 |
| 2.3.4 活体生物荧光检测 |
| 2.3.5 ~(18)F-FDG Micro-positron Emission Tomography (PET)/Computed Tomography (CT)Micro-PET/CT成像 |
| 2.4 统计学处理 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 肺癌裸鼠移植瘤动物模型 |
| 3.2 抑瘤效应 |
| 3.3 裸鼠体重 |
| 3.4 生物发光成像监测 |
| 3.5 ~(18)F-FDG Micro-PET代谢监测 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 第6章 ~(125)I放射性粒子植入治疗中晚期非小细胞肺癌进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 学术论文和科研成果目录 |
四、扶正增效方对裸鼠人肺腺癌移植瘤照射后各时相细胞在细胞周期分布变化的影响（论文参考文献）
- [1]基于肿瘤细胞外泌体调控TAM细胞极化探讨双参颗粒抑制肺癌的作用机制[D]. 亓润智. 中国中医科学院, 2021
- [2]疏肝健脾法治疗乳腺癌的疗效评价及对瘤前抑郁障碍小鼠乳腺癌作用机制研究[D]. 高瑞珂. 中国中医科学院, 2021
- [3]丹栀逍遥散对乳腺癌细胞能量代谢的影响及机制研究[D]. 徐爽. 辽宁中医药大学, 2021
- [4]南方红豆杉水提物通过ATF3介导的Hippo-YAP信号通路促进非小细胞肺癌凋亡的机制研究[D]. 张郜晨茜. 浙江中医药大学, 2021
- [5]基于数据挖掘技术探讨罗秀丽教授治疗非小细胞肺癌的用药规律[D]. 杨杰. 湖北中医药大学, 2021(09)
- [6]红景天苷对A549细胞辐射敏感性的影响及其作用机制[J]. 宋海侠,魏世鸿. 中华肿瘤防治杂志, 2021
- [7]益气扶正合剂联合EGFR-TKI治疗非小细胞肺癌（气阴两虚型）的临床研究[D]. 赵晓晴. 湖南中医药大学, 2021
- [8]固正消癌方对肠癌的临床疗效初探及其调控糖代谢相关机制研究[D]. 陆秋露. 南京中医药大学, 2021(01)
- [9]基于S100A9与CyPA探讨扶正增效方对在肺腺癌放射增敏作用的调控机制[D]. 马锦坤. 北京中医药大学, 2020(04)
- [10]吉非替尼联合125I放射性粒子治疗肺腺癌有效性的动物研究[D]. 姚林艳. 上海交通大学, 2020