一、气相色谱-质谱法测定肝、肾和肉中β_2-受体激动剂残留量(论文文献综述)
孙铭雪[1](2021)在《表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇》文中研究指明克伦特罗(Clenbuterol,CLB)和沙丁胺醇(Salbutamol,SAL)属于β2-肾上腺受体激动剂,通常被称作“营养重分配剂”或是“瘦肉精”,因其具有营养再分配、改变动物体内物质的代谢途径,加速蛋白质的合成,显着提高食品动物的生长速度等生理作用,经常被非法用作饲料添加剂用于畜产品养殖业中来谋取利益。当动物体内残留的β2-受体激动剂通过食物链进入人体后,会对食用者产生一定的毒副作用,导致中毒现象。目前,我国和欧盟等许多国家已颁布了多部法律法规明确规定不允许将β2-受体激动剂作为动物饲料添加剂。因此,为加强食品安全监管,保障广大消费者的生命安全和利益,急需在现有的方法上建立更加快速、可靠的β2-受体激动剂检测方法。现有的确证检测方法有色谱法、常规酶联免疫法等,但其因前处理麻烦、操作复杂、检测时间较长等原因,无法实现实际样品的高通量检测。如今,由于具有灵敏度高、干扰小、检测速度快等优点,表面等离子体传感器在β2-受体激动剂的检测中具有重要的应用前景。本研究以克伦特罗和沙丁胺醇为检测目标物,首先制备了CLB和SAL单克隆抗体。将CLB-BSA和SAL-OVA作为实验中所需要使用的免疫原,取6-8周龄的雌性BALB/c小鼠,用选取的免疫原首先对小鼠进行免疫。对免疫后的小鼠进行血清效价检测,检测结果最好的小鼠说明其免疫效果最好,选取免疫效果最好的小鼠,脱颈处死后取其脾细胞,将脾细胞和复苏后的骨髓瘤细胞融合在一起,经间接ELISA法挑选出阳性细胞,再对连续三次检测呈阳性的细胞进行亚克隆,得到高效价、具有特异性且能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用诱生腹水法进行腹水制备,将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内产生腹水的方法收集抗体。对单抗的性质进行鉴定,得到CLB单克隆抗体腹水效价为1:4.50×106,SAL单克隆抗体效价为1:3.40×105;使用间接竞争ELISA法对两种单克隆抗体的特异性鉴定结果显示,CLB单抗对克伦特罗的IC50为2 ng/m L,对莱克多巴胺和沙丁胺醇等药物的IC50均大于10000,交叉反应率小于0.2%,SAL单抗对沙丁胺醇的IC50为2.5 ng/m L,在对其他几种药物的检测中发现,此抗体对克伦特罗的IC50为11.3 ng/m L,计算得二者的交叉反应率为22%,而对其他药物的交叉反应率仍小于0.2%。本研究建立了直接检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇的SPR免疫传感器法。以氨基偶联法修饰CM7芯片,将抗体固定在芯片上,优化抗体偶联条件,以10 m M p H 5.0醋酸-醋酸钠缓冲液为耦合缓冲剂,EDC和NHS以1:1的比例混合活化芯片,活化时间为15 min,抗体反应时间为20 min,用乙醇胺溶液封闭芯片,封闭时间为15 min。采用直接检测法,将牛尿离心、过膜处理后,流过固定了抗体的CM7芯片来构建标准曲线,进行检测。经方法学验证,克伦特罗的标准曲线的线性范围在0.1~6 ng/m L之间,得到的最低检测限(LOD)为0.05 ng/m L。在1 ng/m L~5 ng/m L添加浓度范围内,牛尿中克伦特罗的平均回收率为82.46%~98.60%,批内变异系数为1.67%~8.50%,批间变异系数为2.61%~10.14%。以相同的方法对沙丁胺醇进行测定,在0.1~6 ng/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,LOD为0.01 ng/m L,在1 ng/m L~5 ng/m L添加浓度范围内,牛尿中沙丁胺醇的平均回收率为87.82%~91.67%,批内变异系数为1.51%~2.67%,批间变异系数为2.67%~5.53%。采用UPLC-MS/MS法和SPR生物传感器法对牛尿样品中CLB和SAL的含量进行对比,结果表明SPR方法可用于动物中克伦特罗和沙丁胺醇的检测。
章钢刚[2](2020)在《基于新型信号输出的四种免疫层析法的研究与应用》文中认为免疫层析法(Immunochromatographicassay,ICA)是结合免疫技术、层析技术和纳米材料技术发展而来的一种快速分析检测方法。该方法与常规仪器法相比有快速、简便、无需昂贵仪器、可现场检测等多种优势,传统ICA的信号输出标记物是吸收光谱型的胶体金,其灵敏度往往不高且以定性为主。提高快速检测方法的灵敏度是日益增长的现实要求。提高ICA灵敏度的方式当前主要有三类:高亲和的抗原抗体、介导信号放大和新型信号输出,其中基于新型信号输出的高灵敏ICA技术能从根本上解决传统信号低而导致的灵敏度不高的问题,是目前免疫层析领域的研究热点。本研究基于新型的信号输出形式,构建了四种新型的ICA,同时将其应用于实际检测当中,并评价了其性能。在第一章中,本研究综述了ICA发展的现状,概述了免疫层析领域的前景,以及本研究针对的靶标物(大肠杆菌O157:H7、猪霍乱沙门氏菌、人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotrophin,HCG)和β2-受体激动剂)的检测现状。在第二章中,构建了基于金银双测试线(T线)的ICA,用于联检大肠杆菌O157:H7和猪霍乱沙门氏菌。本研究利用了传统免疫层析法的红色胶体金以及新型的显色型信号输出标记物一蓝色三角银作为其信号输出,通过在试纸条上喷涂两条T线的方式达到联检大肠杆菌O157:H7和猪霍乱沙门氏菌的目的。联检大肠杆菌O157:H7和猪霍乱沙门氏菌的最低检测限(Limit of detection,LOD)分别为2.16×104和1.18×105CFU/mL,因为采用的标记物均为较传统的显色型,灵敏度并不高。同时,充分利用两种标记材料的颜色差异,验证和阐释了在两种致病菌联检的双线ICA中,存在T线之间的‘干涉’现象。在第三章中,将传统的三步法合成的金花@聚多巴胺(AuNF@PDA)与一锅法制备的新型菊花金@聚多巴胺(AuNC@PDA)进行了比较。与AuNF@PDA相比,AuNC@PDA具有更多的分枝结构、更均匀的花瓣状形状和更好的粒度均一性。在溶液中,AuNC@PDA在可见光范围(400-800nm)内的吸收为AuNF@PDA的3倍;在硝酸纤维素(NC)膜上,AuNC@PDA的灰度值约是AuNF@PDA的2.5倍。这些结果表明,AuNC@PDA具有更好的形态和光学性能。采用新型的AuNC@PDA作为标记材料,与传统的AuNF@PDA应用在ICA中并进行对比分析。以HCG为检测目标物,基于AuNC@PDA和AuNF@PDA的ICA的LOD分别为1.59和5.13mlU/mL。基于AuNC@PDA的ICA的灵敏度比基于AuNF@PDA的ICA的灵敏度提高了 3倍。在第四章中,本研究基于胶体金可猝灭荧光微球的特性,将传统的显色型ICA升级为荧光型ICA,构建了一种新型的荧光猝灭ICA,用以检测β2-受体激动剂类物质。本研究通过预先在试纸条T线和C线(控制线)上喷涂并固定一定浓度的荧光微球,再以胶体金作为其猝灭剂,当待检物中存在β2-受体激动剂时,胶体金标记的抗体与之结合,不能与T线上的全抗原结合,胶体金无法滞留在T线上,因此不能猝灭T线上的荧光微球,此时T线荧光信号强;反之,当待检物中不存在β2-受体激动剂时,胶体金标记的抗体与T线上的全抗原结合,使得胶体金滞留在T线上,猝灭T线荧光,此时T线荧光信号弱。换言之,荧光猝灭ICA将传统的对小分子的竞争抑制型检测的“turn off”模式转变为更为有利的“turnon”模式,提高了检测灵敏度。以β2-受体激动剂类物质氯丙那林为检测模型,该方法LOD为0.12 ng/mL。在第五章中,本研究基于聚集诱导发光(Aggregation-inducedemission,AIE)材料,将传统荧光微球升级为新型的AIE微球,首次构建了AIE免疫层析法。本研究通过微乳液包埋法,在确保微球球体的均匀性和表面的富功能化的同时,一次性将大量的AIE染料包埋进微球,然后将其应用于免疫层析平台检测大肠杆菌O157:H7。一般地,微球的荧光发射性能与微球中包埋的荧光染料的量成正相关关系,然而单个微球包埋大量的荧光染料对于传统荧光微球是不利的,因为传统荧光染料存在聚集引发猝灭(Aggregation-caused quenching,ACQ)效应,导致传统的荧光微球性能与包埋染料的量成两难的关系。而对于AIE微球,荧光性能只与微球包埋染料的量成正相关,这就使得AIE荧光微球的荧光性能理论上可以大大强于传统荧光微球。本研究制备的AIE微球最大荧光强度是相同方法制备的传统荧光微球的9倍,量子产率是传统荧光微球的4.5倍。本研究首次将AIE荧光微球应用于ICA,检测大肠杆菌O157:H7的LOD为3.98×103 CFU/mL,比以两种商品化荧光微球(Ocean微球和Merck微球)为标记物建立的ICA的灵敏度分别提高了 11倍和7倍。在第六章中,对全文工作进行了总结,以标记物和灵敏度为脉络,梳理了本研究工作间的逻辑关系,展望了未来提高ICA灵敏度的方向与思路。
王瑞[3](2020)在《牛奶中β-受体激动剂和β-阻断剂类药物多残留检测方法的研究》文中研究指明β-受体激动剂类和β-受体激动剂类药物是具有苯乙醇胺结构的肾上腺素类合成药物,临床上分别用于治疗呼吸系统和心血管系统疾病。然而,在畜牧业养殖中常被非法用于促进动物生长,导致在动物组织中残留,对人体健康造成威胁。所以,对β-受体激动剂和β-受体阻断剂类兽药残留的检测是动物源性食品安全的关键环节,但是部分新型药物仍缺少相关检测方法。本研究拟建立同时测定牛奶中卡布特罗、沙丁胺醇、克伦丙罗、莱克多巴胺、克伦特罗、福莫特罗、克伦潘特、马布特罗、丙氧苯酚胺、班布特罗、马喷特罗、苯乙醇胺A、喷布特罗和沙美特罗等14种β-受体激动剂和阿替洛尔、索他洛尔、β-羟甲基美托洛尔、噻吗洛尔、醋丁洛尔、美托洛尔、左布诺洛尔、塞利洛尔、氧烯洛尔、比索洛尔、卡拉洛尔、普萘洛尔、阿普洛尔、丁呋洛尔、贝凡洛尔、奈必洛尔等16种β-受体阻断剂类药物的多残留检测方法。1.建立和优化测定30种β-受体激动剂和β-受体阻断剂类药物的UPLC-MS/MS检测方法。分别对锥孔电压、碰撞能量、母离子、子离子等质谱条件进行优化,对流动相组成和比例、梯度洗脱条件等色谱条件进行优化。确定采用Waters Acquity UPLCTMCSH C18(2.1*100 mm,1.7 μm)色谱柱进行分离,乙腈和0.1%甲酸水为流动相,采用梯度洗脱方式进行分离,流速为0.3 mL/min;ESI源正离子模式进行多反应监测,外标法定量。获得各化合物的质谱检测参数,30种待测物可在9.0 min内得到了很好的分离和确证。2.对牛奶样本中30种待测物的样本前处理技术进行优化。分别对提取溶液、酶的用量、pH和温度与提取时间、固相萃取柱的选择、淋洗和洗脱条件进行优化。确定用乙酸调节牛奶pH至5.2,经30μLβ-葡萄糖醛苷酸酶/芳基硫酸酯酶37℃震荡过夜水解,用3%(v/v)乙酸乙腈溶液经涡动、震荡、离心提取上清液,氮气吹干有机相,提取液经MCX柱上样,经水和甲醇淋洗,5%氨化甲醇洗脱,40℃氮气水浴吹至近干,1 mL0.1%(v/v)甲酸水-乙腈(9:1,v/v)复溶。3.系统考察了同时测定牛奶中30种β-受体激动剂和β-受体阻断剂类药物的UPLC-MS/MS方法学指标。评价了线性关系、检出限、定量限、准确度、精密度、基质效应、稳定性等考核指标。实验得出,各药物在0~50 μg/L质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r2)均≥0.991;检测限为0.1~0.2 μg/L,定量限为0.3~0.5 μg/L;在LOQ、2倍LOQ、10倍LOQ三个加标浓度下,各药物平均回收率61.36%~88.72%,71.49%~103.69%;67.72%~99.07%;批内 RSD 分别为 3.75%-17.92%,2.76%-17.52%,3.42%-16.04;批间 RSD 分别为 1.43%~17.62%,4.1 1%~16.43%,3.52%~16.67%;通过空白样液加入标准品校正基质效应的影响,基质效应率在29.1%~151.2%范围内;分别储存牛奶样品于-20℃和4℃下各7d,在-20℃下平均回收率为74.80-105.24%,变异系数为1.73-15.93%、4℃下平均回收率为72.18-94.78%,变异系数为3.80-16.68%,各药物未见降解,稳定性好。该方法分析时间短,定性定量可靠,可用于牛奶中30种β-受体激动剂类和β-受体激动剂类药物残留检测。综上所述,本研究为了对牛奶中β-受体激动剂和β-受体阻断剂类药物多残留分析,通过优化液相色谱的分离条件、质谱的检测条件、提取溶剂的选择、酶解环境的pH、温度、时间和用量等条件来提高各药物的回收率,进行方法学验证,从而建立准确可靠的UPLC-MS/MS测定牛奶中30种β-受体激动剂类和β-受体阻断剂类药物残留的分析方法。该方法可在9.0 min内对30种药物进行准确的定性和定量分析,操作简单,快速,检测限低,灵敏度高,重复性好,结果可靠。
戈钰[4](2020)在《电化学纳米传感器对畜禽产品中β-激动剂检测研究》文中认为β-激动剂(β-agonists)俗称瘦肉精,是一类能够抑制动物脂肪生成,促进瘦肉生长的药物,其滥用行为在中国屡禁不止,这给人民的身体健康甚至生命安全造成潜在隐患,灵敏、快捷检测瘦肉精的新方法的建立具有重要理论意义与现实意义。本研究首先针对一种瘦肉精分子建立的电化学纳米传感器实现了该分子的快速定性定量检测。然后改良传感器建立了可同时检测两种分子的电化学纳米传感器。接着建立便携式电化学智能传感器不仅提高工作效率和简化操作流程,同时具有对瘦肉精检测的高稳定性。最后将电化学纳米传感器与高相液相色谱法进行比较,为电化学纳米传感器在畜禽产品中的广泛使用提供了数据支持。具体研究内容和结果如下:一、电化学纳米传感器对克仑特罗的痕量检测及其机理研究将二维纳米材料磷烯(BP)经异丙醇(IP)和Nafion(Nf)处理制备纳米复合材料修饰玻碳电极(GCE)。该电极(BP-Nf(IP)/GCE)对克仑特罗(CLB)有优异电催化响应。随后对复合电极的形貌、结构、电化学活性面积和电化学稳定性等进行研究,结果表明BP-Nf(IP)/GCE具有良好的电化学稳定性和电催化性能,峰电位是0.94 V(vs.SCE),线性浓度范围是0.06-24μM,检测限是3.7 n M(3σ/M),灵敏度是0.14μAμM-1 cm-2。对比文献,降低了电催化电位,增强了传感响应灵敏度,扩宽了检测范围。本研究还通过密度泛函理论提出CLB的电催化氧化机理。最后该传感器成功用于牛肉和牛血清等样品中CLB电化学检测,具有良好可行性和实用性。二、电化学纳米传感器对克仑特罗和莱克多巴胺的同时快速检测通过不同材料筛选优化,选择单(6-巯基-6-脱氧)-β-环糊精(S-β-CD)和聚(3,4-乙烯二氧噻吩)纳米粒子(PEDOTNPs)共修饰二维纳米材料BP,实现最常用β-激动剂CLB和莱克多巴胺(RAC)的同时电化学快速检测。制备的电化学修饰电极(S-β-CD-PEDOTNPs-BP/GCE)具有稳定性高、抗污染能力强、电化学活性面积大、电化学响应好等特点。此外,本工作还通过筛选抗污染策略,选择电化学辅助材料抗污染策略,采用连续循环伏安法进一步消除电极表面的污染。S-β-CD-PEDOTNPs-BP/GCE在电位0.8 V和1.0 V(vs.SCE)处分别对CLB和RAC产生最佳电流响应。在最佳条件下,CLB在0.3-90μM浓度范围内呈现良好线性响应,RAC在0.3-9.34μM浓度范围内呈现良好线性响应,检测限分别为0.14μM和0.12μM。最后采用标准添加法,可同时测定牛肉、饲料和牛血清样品中CLB和RAC浓度,回收率在可接受范围内。三、电化学纳米传感器对克仑特罗的便携式智能检测以中药材剩余物葛藤为原料,对其进行厌氧高温炭化处理,制备成生物炭。将生物炭对使用激光直写技术制备的柔性碳电极进行修饰。同时利用智能手机和微型电化学工作站组成的微型分析仪,实现CLB的无线智能传感检测。该智能便携式电化学传感器具有制备简单、体积小、稳定性高、重复性好和成本低等优点。传感器对CLB检测获得较宽检测范围0.95-14.31μM,低检测限为0.75μM。此外,该智能便携式传感器对牛血清中CLB的加标回收检测结果表明,基于微小型分析仪的无线智能便携式传感器具有实现CLB现场野外检测的潜力。四、特布他林的多种检测方法对比分析由二维材料Mo S2,COOH-Gra和双金属Pd-Pt经过层层修饰电极,建立了快速检测特布他林(TRA)的电化学纳米传感电极(Pd-Pt/COOH-Gra/Mo S2/GCE)。电极表面形貌观察结果显示,修饰材料呈现薄层状且双金属零星分布,表明该传感器具有较强电催化性能和大比表面积,较宽TRA线性检测范围0.44-43.37μM和较低检测限0.22μM,进一步证实该电化学纳米传感器对TRA具有较高灵敏度。同时,利用高效液相色谱法建立TRA线性关系,检测范围为2.5-1400μM。比较分析两种方法的检测结果可知,电化学传感器获得了较低的检测下限,较高效液相色谱法更为灵敏且设备操作简单,成本更低。最后对牛肉和鸡肉加标回收检测TRA,回收率在98%-100.2%范围内,表明根据该研究方案构建的传感器可以为有效检测TRA提供方法支持。
徐赫楠[5](2020)在《动物源性食品中兽药残留的快速筛查及定量检测技术研究》文中指出随着我国经济高速稳定的增长,养殖业得到了迅猛发展,动物源性食品层出不穷。兽药作为养殖业的常用药,在防治疾病、提高生产和维护公共卫生安全等方面都发挥着重要的作用。与此同时,由兽药残留带来的食品安全问题也越来越受到社会各界的重视。兽药残留限量是评价动物源性食品是否安全的准绳,在国际合作与竞争中也是重要的一环,因此,对食品中兽药残留的高效准确筛查以及定量检测技术研究显得越来越重要。本选题围绕动物源性食品兽药残留分析,重点进行了以下研究:(1)通过在线固相萃取-高效液相色谱-串联质谱的方式,建立肉类产品(主要是猪肉和羊肉)中β-受体激动剂的全自动分析方法。取样品在37℃的温度下酶解16 h,用MCX在线固相萃取小柱净化,然后用XBridge C18色谱柱进行分离,再选用流动相(0.1%甲酸水溶液-乙腈)梯度洗脱,选用电喷雾电离正离子模式,采用多反应监测模式进行检测,用内标法进行定量。测定结果显示β-受体激动剂在0.0110.00ng/mL的范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.9990;方法的检出限0.0040.040μg/kg,方法的定量限0.020.20μg/kg;方法回收率76.5%107.7%,相对标准偏差小于10%。此方法可应用于肉类中β-受体激动剂的定性及定量分析,具有速度快、灵敏度高的特点。(2)通过实验建立基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱对牛奶中19种喹诺酮类抗生素进行筛查和确证的方法。取牛奶样品,用酸化乙腈提取蛋白,沉淀,用PRiME HLB固相萃取柱净化,用Waters Acquity BEH C18柱(2.1 mm×100mm,2.5μm)进行分离,经乙腈和0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,在全扫描(full MS)-数据依赖扫描(ddMS2)模式下检测结果。实验结果表明:19种喹诺酮类抗生素的精确质量相对偏差小于3.0×10-6,在0.2200 ng/mL区间内显示良好的线性关系。此外,方法的相关系数都在0.998以上;方法的检出限范围为0.10.5μg/kg,方法的定量限范围为0.21.0μg/kg;加标水平在0.2μg/kg-10.0μg/kg时,该方法的回收率为62.1%100.4%,相对标准偏差在10%以下。该方法具有简便、快速、准确的优点,可用于牛奶中19种喹诺酮类抗生素的快速筛查和定量分析。(3)建立了基于超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱筛查和确证猪肉中9种大环内酯类抗生素的方法。猪肉样品经乙腈提取,正己烷除脂,用Waters Acquity BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,以甲醇和0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱,在全扫描(full MS)-数据依赖扫描(ddMS2)模式下进行检测。结果表明:9种大环内酯类抗生素的精确质量相对偏差小于1.0×10-6,在0.5100 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998;检出限范围为0.050.2μg/kg,定量限范围为0.10.4μg/kg;加标水平水平为0.1μg/kg-4.0μg/kg时,方法回收率为69.4%107.6%,相对标准偏差低于10%。该方法简便、快速、准确,适用于猪肉中9种大环内酯类抗生素的快速筛查和定量分析。
李良[6](2019)在《巯烯加成制备液相色谱固定相及其在手性对映体分析中的应用研究》文中认为手性选择法则是生命系统的自然属性之一,蛋白质、核酸等许多生命物质都是手性的。手性药物和农药进入人体后,对映体在药效、毒理和代谢途径的不同,这与人们的身体健康息息相关。研制高效手性分离材料,并用于建立快速、灵敏、准确的对映体含量测定的LC-MS/MS新方法,有利于更科学地评价对映体的安全性。本论文基于“巯-烯”加成点击化学反应,发展了制备环糊精、替考拉宁和纤维素手性固定相的新方法,在表征固定相结构的基础上,较系统地评价了新固定相的手性色谱性能,并用于实际样品的分析,分别建立了人尿中和食品中相关手性标志物、手性农药和非法手性添加剂对映体测定的LC-MS/MS新方法,对保障食品和药品安全具有重要的研究意义和应用前景。本论文主要包含以下几方面的研究工作:1.首先回顾了前人已发展的各类手性拆分手段和基本原理,重点介绍应用较为广泛的高效液相色谱手性固定相的发展过程和各自的特点,并涉及到有序介孔材料作为色谱键合材料的应用进展。以此作为开展本论文研究工作的理论依据和出发点。2.利用6-氨基-β-环糊精与活泼的异氰酸苄基酯反应合成苄基脲-β-环糊精,随后引入双键,基于“巯-烯”加成反应将其键合到硅胶表面,得到一种新型的苄基脲-β-环糊精键合相(BzCDP)。经结构表征后,成功地用于人尿中苯和甲苯暴露的生物标志物苯巯基尿酸(PMA)和苄巯基尿酸(BMA)对映体的同时手性拆分和定量分析,首次证实人体代谢中的生物标志物是以两种对映体的形式存在。在30min内BzCDP能快速拆分PMA和BMA对映体,分离度达到2.25和2.14。采用同位素标记的PMA内标(d2-PMA),通过负离子多反应监测(MRM),建立了一种同时定量测定PMA和BMA对映体含量的LC-MS/MS新方法。该方法的线性范围为0.5~250μg L-1,回收率大于82%,检出限(LODs)低于0.17μg L-1,日内和日间平均相对标准偏差(RSDs)均小于13.1%。该方法成功地应用于60名油漆工和印刷工的尿液检测,结果显示阳性尿液中两种标志物均以不同含量的对映体形式存在,例如L-PMA(27.5~106μg L-1)和D-PMA(19.9~82.8μg L-1),表明苯污染较严重,应高度关注该群体的职业健康。这将有助于更科学地评价苯及苯系物对人类的危害性。3.基于“巯烯”加成反应,制备了一种S-(-)-2-苄基氨基-1-苯乙醇单衍生化-β-环糊精键合相(Bz CSP),并进行了基本结构表征。通过引入芳基和手性中心,进一步地提高了环糊精类固定相的手性分离能力,拓宽手性分离范围,增强固定相的实用性。利用环酮类药物、三唑类农药、含胺基药物、氨基醇类药物四种类型22种不同结构特征的手性化合物作探针,评价其手性色谱性能。研究发现,新固定相适用于多种色谱模式(正相、反相、极性有机)。反相模式能拆分大多数化合物,其中环酮类药物的分离度高达5.33,三唑类农药的分离度可达2.05,分析时间较短。部分化合物只能在正相模式拆分,例如华法林的Rs达2.46,苯霜灵的Rs高达8.7,而且发现S-(-)-2-苄基氨基-1-苯乙醇衍生化固定相比相应的R(+)-固定相拆分能力强,可能是由于S(-)-比R(+)-固定相与溶质间“三点”作用更匹配,有利于手性分离。此外,采用该新固定相还在极性有机模式下成功地拆分了普萘洛尔等治疗心血管类疾病的常用手性药物,分离度可达1.53。表明通过“巯烯”加成反应制备的固定相是一类新型的多模式固定相,具有较好的开发价值。为验证新的Bz CSP的实用性,还建立了测定5种果蔬中3种手性农药已唑醇、戊唑醇、灭菌唑对映体残留量的LC-MS/MS新方法。所建立的方法具有选择性好、灵敏度高、抗基质干扰强、重现性好等特点。目前,国内外仍以非手性农残检测方法研究为主,尚缺乏手性农药对映体分析测定方法的系统性研究。4.首次报道通过“巯-烯”加成反应制备替考拉宁键合手性固定相(TCSP)的新方法。首先对替考拉宁进行甲基丙烯酸酯化,然后使不饱和的丙烯酸酯和巯丙基硅胶进行“巯-烯”加成反应制备TCSP。该制备方法反应条件温和,键合量较高,成本低,尚未见相关报道。以优化的极性有机流动相(甲醇/乙腈/甲酸铵/乙酸,480/120/0.3/0.04,v/v/m/v)流速为0.5 m L min-1,在35°C柱温下,20min内同时实现了克伦特罗(CLEN)和沙丁胺醇(SAL)对映体的高效分离,分离度(Rs)分别为2.72和1.91。固相萃取后,通过正离子多反应监测(MRM)建立了一种可用于200份动物源肉类样品中β2-激动剂CLEN和SAL对映体快速灵敏的LC-MS/MS定量方法。分别研究了该方法的精密度、准确度、稳定性、线性、检出限和基质效应。该新方法在0.5~50μg L-1浓度范围内对所有对映体均有良好的线性关系(r≥0.995),较高的回收率(CLEN为87~103%,SAL为93~103%)和高的重现性(日内RSDs%在2.65~7.98%,日间在4.23~9.29%)。CLEN和SAL的对映体LODs分别低于0.018μg kg-1和0.076μg kg-1。结果表明,所有阳性样品均含有不等量的对映异构体,尤其是猪肝中的R/S异构比高达1.3,这表明β2-激动剂在动物体内有对映体选择性代谢,所以科学评估激动剂对人类的毒性需要精准到对映体含量的测定。5.通过“巯-烯”加成反应制备了一种新型的3,5-二氯苯基氨基甲酸酯化纤维素键合相(CELCSP)。首先将烯基引入到纤维素上,然后用3,5-二氯苯基异氰酸酯将纤维素完全异氰酸酯化。最后使烯基与3-巯丙基硅胶反应获得一种纤维素键合固定相。通过红外光谱、核磁共振波谱和元素分析对配体和固定相的结构进行了表征。新制备的纤维素键合相耐溶剂性能强,可用于反相色谱并兼容ESI-MS,已成功用于六种常见的手性杀菌剂的对映体拆分,其中包括灭菌唑、己唑醇、戊唑醇、三唑酮、甲霜灵和苯霜灵。使用常见的0.1%甲酸-乙腈作为流动相,上述杀菌剂对映体在CELCSP上的分离度(Rs)和选择性因子(α)分别达到3.46和1.27。基于CELCSP色谱柱建立了一种新的LC-MS/MS方法,在30min内定量测定10种水果和蔬菜(如黄瓜、葡萄等)中的所有6种手性杀菌剂对映体。样品经Fe3O4磁性粒子快速前处理,通过LC分离对映体和正离子多反应监测质谱测定。在0.10~100μg L-1的范围内观察到响应与对映体浓度之间的良好线性关系(γ=0.9965~0.9982)。水果和蔬菜的平均回收率在65%至110%之间(n=3)。对映体的检出限(LODs)和定量限(LOQs)分别为0.05~0.61μg kg-1和0.18~2.01μg kg-1。样品中重复测定的相对标准偏差分别为1.2%~6.0%(日内,n=5)和2.5%~13.0%(日间,n=10)。“巯-烯”加成的温和反应条件有利于维持纤维素的有序立体结构,而高定向合成的产率也可以提供足够的手性配体键合量,为LC-MS/MS监测农药对映体残留量建立可靠的食品安全分析方法提供了保证。
廖艳华[7](2019)在《动物源性食品中β-受体激动剂分类及检测方法研究进展》文中提出动物源性食品中的β-受体激动剂兽药残留检出对人体健康存在潜在威胁,对β-受体激动剂残留进行有效监控,建立可靠、灵敏和实用的检测方法至关重要。本文对近10年来β-受体激动剂的常用检测方法进行综述,重点阐述其在色谱-质谱联用技术研究进展,并对未来检测技术的发展方向提出了展望。
杜晓宁,张鹏帅,雷雯,王伟,侯捷[8](2019)在《稳定同位素技术在我国食品安全检测领域的应用进展》文中进行了进一步梳理为了深入了解稳定同位素技术在近十多年来食品安全领域的应用热点,本文着重关注国内科研领域的相关研究,从稳定同位素比值测定在食品溯源技术中的应用、稳定同位素技术在食品真实属性鉴别中的应用、稳定同位素内标试剂与同位素稀释质谱法结合的检测技术在食品中有害物质检测中的应用等三个方面综述了稳定同位素在食品安全领域的快速发展及已经形成规范的技术水平。随着稳定同位素技术的发展及数据库的积累,相关理论不断完善,其必将在食品安全领域成为至关重要的应用技术之一。
陈清平[9](2019)在《水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法的研究》文中进行了进一步梳理β-受体激动剂是一类具有苯乙醇胺结构的药物,广泛用于治疗支气管疾病。一系列动物实验表明在动物饲养中当β-受体激动剂用药量超过推荐治疗剂量的510倍时可提高饲料转化率,促进动物生长,因此曾被广泛滥用于动物饲养过程。β-受体激动剂在动物体内造成蓄积性残留,通过食物链进入人体。人类食用β-受体激动剂残留量较高的动物源性食品后对肾脏、肝脏等器官均产生毒副作用,出现肌肉震颤、疼痛、心悸等中毒症状,严重危害人类健康。因此需要对食品中β受体激动剂残留进行监控,以确保动物源性食品的质量安全。目前对β-受体激动剂的检测研究对象多集中在畜禽类组织、毛发、尿液及饲料等方面,对水产品中β-受体激动剂残留研究甚少。检测方法存在同时测定β-受体激动剂种类少,很多禁用β-受体激动剂未纳入检测范畴,以及涉及的样品种类少等问题。因此,为实现对水产品中β-受体激动剂残留全面监管,控制违法滥用β-受体激动剂的行为,急需建立适合多种水产品样品基质及同时测定多种类β-受体激动剂药物残留的检测方法,提高检测效率,为水产品中多种β-受体激动剂残留监管、尤其是禁用β-受体激动剂的监管提供技术支撑。本研究首先以河鳗为对象,选择典型β-受体激动剂沙丁胺醇、莱克多巴胺和妥布特罗,通过室内养殖用药实验,制备了含有沙丁胺醇、莱克多巴胺和妥布特罗三种β-受体激动剂的河鳗阳性样品;利用阳性样品研究了三种β-受体激动剂在河鳗肌肉中存在的形态以及β-受体激动剂由结合态转化为游离态的方法,为β-受体激动剂在水产品中残留量测定方法的研究提供理论基础。其次利用液相色谱-串联质谱技术开展了水产品中多种β-受体激动剂残留同时检测的方法研究,通过仪器分析条件的优化,提取剂的筛选及净化方法的探索,最终建立了水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法。该方法具有操作简单、灵敏度高、检测种类多、适用性强等优点。最后利用建立的β-受体激动剂残留检测方法对流通领域的水产品进行了筛查,考察流通领域水产品的安全性。本项目研究结果如下:(1)采用实验室养殖给药方式制备了含有沙丁胺醇、莱克多巴胺和妥布特罗三种β-受体激动剂的河鳗阳性样品。三种β-受体激动剂在河鳗肌肉中主要以结合态和游离态二种形式存在,沙丁胺醇、莱克多巴胺和妥布特罗在河鳗肌肉中结合态所占的比例分别为79.1%、89.0%和73.9%。(2)利用阳性样品,研究了将结合态β-受体激动剂转化为游离态β-受体激动剂的两种水解方式,包括酶解水解方式的水解温度和水解时间,酶解时酶解剂的p H及添加的酶量,盐酸酸解中盐酸的浓度等,并对不同的水解方法进行了对比,确定了最佳水解方案。最佳的水解方法及最佳水解条件为:37℃下,在0.2 mol/L乙酸铵水溶液中添加50.0μLβ-葡萄糖醛酸甙酶/芳基硫酸酯酶酶解16 h。(3)利用液相色谱-串联质谱技术,建立水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法。最佳仪器分析条件为:利用色谱柱CAPCELL PAK MGⅡC18(2.0mm I.D×100 mm,3μm)在5.0 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.2%甲酸)和0.1%甲酸-乙腈流动相下采用分段梯度洗脱将18种化合物完全分离;采用电喷雾离子源正离子扫描模式检测(ESI+),内标法定量。方法检出限(LOD)为0.250.50μg/kg,定量限(LOQ)为0.250.50μg/kg。18种β-受体激动剂在0.20200.00μg/L范围内线性相关系数>0.991,18种β-受体激动剂在0.50μg/kg20.00μg/kg的添加水平下加标回收率为70.0%115.0%,批内相对标准偏差小于12.9%,批间相对标准偏差小于13.5%。(4)采用已建立的方法对上海、江苏养殖基地和上海、江苏、四川和拉萨流通市场上水产品进行检测,对水产品中β-受体激动剂残留现状进行了评估。检测结果显示:47个样品中3个样品中检测到β-受体激动剂,检出率为6.3%。其中河鳗样品含有莱克多巴胺、沙丁胺醇和妥布特罗3种禁用β-受体激动剂,残留检测量分别为2.10μg/kg、3.00μg/kg和2.90μg/kg;草鱼肌肉中含有莱克多巴胺0.38μg/kg;大黄鱼样品中含有克伦特罗和克仑潘特,残留量分别为1.26μg/kg、0.29μg/kg,因此需要对水产品中β-受体激动剂残留进行安全监测。
陈清平,韩峰,汪洋,黄原飞,王守英,于慧娟[10](2019)在《食源性动物组织中β-受体激动剂研究进展》文中进行了进一步梳理β-受体激动剂是一类苯乙醇胺类药物,化学结构和生理功能类似于肾上腺素和去甲肾上腺素,常用于防治人和动物支气管哮喘等疾病。由于β-受体激动剂类药物可促进动物体内蛋白质合成并抑制脂肪沉淀,使动物体内营养成分再分配,所以此类药物常被添加到动物饲养过程中用于提高瘦肉率,继而造成药物在动物体内残留,人类食用后会引发急性中毒而威胁健康。虽然大多数国家已经明令禁止在动物饲养中使用此类药物,但是仍然存在非法使用的情况。为了加强动物源性食品安全,各国已经展开了对β-受体激动剂类药物的研究,已建立多种快速准确的检测方法。本研究主要对β-受体激动剂的结构和性质、在动物源性食品中代谢消除规律和β-受体激动剂检测技术3个方面进行阐述,并对β-受体激动剂药物残留检测的未来研究方向进行展望。
二、气相色谱-质谱法测定肝、肾和肉中β_2-受体激动剂残留量(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、气相色谱-质谱法测定肝、肾和肉中β_2-受体激动剂残留量(论文提纲范文)
(1)表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩写词表(Abbreviations) |
第一章 绪论 |
1.1 β_2受体激动剂的简介 |
1.1.1 β_2受体激动剂的理化性质 |
1.1.2 β_2受体激动剂的药学作用和毒副作用 |
1.1.2.1 药学作用 |
1.1.2.2 毒副作用 |
1.1.3 国内外监控现状 |
1.1.4 检测方法研究 |
1.2 表面等离子体生物传感器 |
1.2.1 SPR生物传感器的基本原理 |
1.2.2 SPR生物传感器的分类及特点 |
1.2.3 SPR生物传感器在β_2-受体激动剂中的研究进展 |
1.3 研究内容及意义 |
第二章 克伦特罗和沙丁胺醇单克隆抗体的制备 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 主要仪器 |
2.1.2 主要试剂 |
2.1.3 主要溶液配制 |
2.1.4 实验所用动物和细胞 |
2.2 克伦特罗单克隆抗体的制备 |
2.2.1 动物免疫 |
2.2.2 细胞融合 |
2.2.3 阳性孔的筛选与克隆 |
2.2.4 腹水制备 |
2.2.5 单克隆抗体性质的鉴定 |
2.3 结果 |
2.3.1 包被抗原的工作浓度及阳性血清效价 |
2.3.2 杂交瘤细胞的筛选和稳定性 |
2.3.3 单抗亚类鉴定 |
2.3.4 单抗性质鉴定 |
2.4 本章小结 |
第三章 SPR检测克伦特罗 |
3.1 实验材料 |
3.1.1 药品与试剂 |
3.1.2 仪器与设备 |
3.1.3 相关溶液的配制 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 克伦特罗抗体的固定 |
3.2.2 再生条件的选择 |
3.2.3 抗原-抗体动力学实验 |
3.2.4 建立标准曲线 |
3.2.5 特异性 |
3.2.6 稳定性和重复性 |
3.2.7 准确度和精密度 |
3.2.8 SPR传感器和UPLC-MS/MS的比较 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 克伦特罗抗体的固定 |
3.3.2 再生条件的确定 |
3.3.3 抗原-抗体动力学分析 |
3.3.4 标准曲线的构建 |
3.3.5 特异性 |
3.3.6 稳定性和重复性 |
3.3.7 准确度和精密度 |
3.3.8 SPR生物传感器和UPLC-MS/MS比较 |
3.4 本章小结 |
第四章 SPR检测沙丁胺醇 |
4.1 实验材料 |
4.1.1 药品与试剂 |
4.1.2 仪器与设备 |
4.1.3 相关溶液配制 |
4.2 实验方法 |
4.2.1 抗体的固定 |
4.2.2 再生条件的确定 |
4.2.3 抗原-抗体动力学分析 |
4.2.4 标准曲线的构建 |
4.2.5 特异性分析 |
4.2.6 稳定性和重复性 |
4.2.7 准确度和精密度 |
4.2.8 SPR生物传感器和UPLC-MS/MS比较 |
4.4 小结 |
结论 |
1 制备了抗克伦特罗和抗沙丁胺醇单克隆抗体 |
2 建立了检测牛尿中的克伦特罗和沙丁胺醇的SPR直接检测法 |
创新点 |
参考文献 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 |
致谢 |
(2)基于新型信号输出的四种免疫层析法的研究与应用(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略语表 |
第1章 绪论 |
1.1 显色型ICA |
1.1.1 胶体金ICA |
1.1.2 碳纳米颗粒ICA |
1.2 荧光型ICA |
1.2.1 有机染料荧光微球ICA |
1.2.2 量子点ICA |
1.2.3 量子点微球ICA |
1.2.4 上转换荧光ICA |
1.3 其它型ICA |
1.3.1 磁ICA |
1.3.2 表面增强拉曼散射ICA |
1.4 大肠杆菌O157:H7和猪霍乱沙门氏菌检测现状 |
1.4.1 培养法 |
1.4.2 聚合酶链式反应 |
1.4.3 酶联免疫吸附法 |
1.4.4 ICA |
1.5 人绒毛膜促性腺激素检测现状 |
1.5.1 胶乳凝集抑制试验 |
1.5.2 酶联免疫吸附法 |
1.5.3 电化学发光法 |
1.5.4 ICA |
1.6 β_2-受体激动剂检测现状 |
1.6.1 气相色谱-质谱法 |
1.6.2 高效液相色谱法 |
1.6.3 酶联免疫吸附法 |
1.6.4 ICA |
1.7 结语 |
1.8 参考文献 |
第2章 基于金银双T线免疫层析法联检大肠杆菌O157:H7和猪霍乱沙门氏菌 |
2.1 引言 |
2.2 材料与仪器 |
2.2.1 主要试剂及材料 |
2.2.2 主要仪器设备 |
2.2.3 主要试剂的配制与制备 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 致病菌及其培养条件 |
2.3.2 金纳米球(AuNS)和银三角片(AgNP)的合成 |
2.3.3 免疫探针金标抗体(Au-mAb)和银标抗体(Ag-MUA-mAb)的制备 |
2.3.4 金银双T线试纸条的制备 |
2.3.5 建立金银双T线免疫层析法检测大肠杆菌O157:H7和猪霍乱沙门氏菌 |
2.3.6 特异性实验 |
2.3.7 实际样本中的加标回收实验 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 AuNS和AgNP的表征 |
2.4.2 探针(Au-mAb和Ag-MUA-mAb)的制备 |
2.4.3 基于金银双T线免疫层析法的建立 |
2.4.4 验证方法的特异性 |
2.4.5 实际样本的检测 |
2.4.6 多T线“干涉”现象的发现与研究 |
2.5 小结 |
2.6 参考文献 |
第3章 基于菊花金@聚多巴胺免疫层析法检测人血清中绒毛膜促性腺激素 |
3.1 引言 |
3.2 材料与仪器 |
3.2.1 主要试剂及材料 |
3.2.2 主要仪器设备 |
3.2.3 主要试剂的配制与制备 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 菊花金@聚多巴胺(AuNC@PDA)的合成 |
3.3.2 金花@聚多巴胺(AuNF@PDA)的合成 |
3.3.3 AuNC@PDA-mAb和AuNF@PDA-mAb的制备 |
3.3.4 免疫层析试纸条的制备 |
3.3.5 ICA检测HCG |
3.3.6 特异性实验 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 AuNC@PDA和AuNF@PDA的形貌对比 |
3.4.2 AuNC@PDA与AuNF@PDA的光学性能对比 |
3.4.3 ICA上的应用 |
3.5 小结 |
3.6 参考文献 |
第4章 基于荧光猝灭免疫层析法检测β_2-受体激动剂 |
4.1 引言 |
4.2 材料与仪器 |
4.2.1 主要试剂及材料 |
4.2.2 主要仪器设备 |
4.2.3 主要试剂的配制与制备 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 金纳米球(AuNS)的合成 |
4.3.2 制备金标抗体(Au-mAb) |
4.3.3 制备可固定荧光微球(BSA-FM) |
4.3.4 试纸条的制备 |
4.3.5 单抗标记量的优化 |
4.3.6 免疫学反应动力学曲线 |
4.3.7 荧光猝灭免疫层析法的建立 |
4.3.8 交叉反应 |
4.3.9 实际样本中的检测 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 探针的制备和优化 |
4.4.2 动力学曲线分析 |
4.4.3 建立标准曲线 |
4.4.4 交叉反应结果 |
4.4.5 实际样本检测 |
4.5 小结 |
4.6 参考文献 |
第5章 聚集诱导发光免疫层析法的建立 |
5.1 引言 |
5.2 材料与仪器 |
5.2.1 主要试剂及材料 |
5.2.2 主要仪器设备 |
5.2.3 主要试剂的配制与制备 |
5.3 实验方法 |
5.3.1 致病菌及其培养条件 |
5.3.2 传统染料荧光素的甲基化改性 |
5.3.3 微乳液一锅法制备荧光微球 |
5.3.4 单微球染料装载量的测定 |
5.3.5 免疫探针的制备 |
5.3.6 免疫层析试纸条的制备 |
5.3.7 基于聚集诱导发光免疫层析法检测大肠杆菌O157:H7 |
5.3.8 特异性实验 |
5.4 结果与讨论 |
5.4.1 传统荧光染料荧光素的疏水化改性 |
5.4.2 两种染料的性能表征 |
5.4.3 制备的两类荧光微球(AIEFM和DMFFM)的材料表征 |
5.4.4 单微球装载量的确定 |
5.4.5 荧光微球性能的比较 |
5.4.6 聚集诱导发光免疫层析法的建立 |
5.5 小结 |
5.6 参考文献 |
第6章 结论与展望 |
6.1 结论 |
6.1.1 基于金银双T线免疫层析法联检大肠杆菌O157:H7和猪霍乱沙门氏菌 |
6.1.2 基于菊花金@聚多巴胺免疫层析法检测人血清中绒毛膜促性腺激素 |
6.1.3 基于荧光猝灭免疫层析法检测β_2-受体激动剂 |
6.1.4 聚集诱导发光免疫层析法的建立 |
6.2 展望 |
致谢 |
个人介绍 |
攻读学位期间的研究成果 |
获奖情况 |
(3)牛奶中β-受体激动剂和β-阻断剂类药物多残留检测方法的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略表 |
文献综述 |
1 引言 |
2 材料与方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 仪器 |
2.1.2 试剂与药品 |
2.1.3 样品 |
2.1.4 主要溶液的配制 |
2.2 方法 |
2.2.1 质谱分析方法 |
2.2.2 液相色谱分析方法 |
2.2.3 牛奶样品的前处理方法 |
2.2.4 UPLC-MS/MS检测方法的评价 |
3 结果与分析 |
3.1 质谱条件的建立 |
3.2 液相色谱条件的建立 |
3.3 样品前处理 |
3.3.1 提取液的选择 |
3.3.2 酶解条件的优化 |
3.3.3 MCX柱净化条件建立 |
3.4 牛奶中β-受体激动剂和β-受体阻断剂类药物残留的UPLC-MS/MS检测方法的评价 |
3.4.1 基质效应 |
3.4.2 线性关系、检出限和定量限 |
3.4.3 准确度与精密度 |
3.4.4 稳定性测定 |
4 讨论 |
4.1 质谱条件的建立 |
4.2 液相色谱条件的建立 |
4.3 样品前处理方法的建立 |
4.3.1 酶解条件的建立 |
4.3.2 提取条件的建立 |
4.4 净化条件的选择 |
4.5 基质效应的消除 |
5 结论 |
参考文献 |
致谢 |
附录A |
作者简介 |
(4)电化学纳米传感器对畜禽产品中β-激动剂检测研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
英文缩写对照表(Abbreviation) |
第一章 绪论 |
1 瘦肉精的概述 |
1.1 瘦肉精简介 |
1.2 瘦肉精的使用现状 |
1.3 瘦肉精对公众健康的消极影响 |
2 瘦肉精的检测方法 |
2.1 色谱法 |
2.2 免疫法 |
2.3 传感分析法 |
3 瘦肉精的电化学传感分析的研究现状 |
4 本论文工作的提出 |
4.1 电化学纳米传感器对克仑特罗的痕量检测及其机理研究 |
4.2 电化学纳米传感器对克仑特罗和莱克多巴胺的同时快速检测 |
4.3 电化学纳米传感器对克仑特罗的便携式智能检测 |
4.4 特布他林的多种检测方法对比分析研究 |
第二章 试验研究 |
第一节 电化学纳米传感器对克仑特罗的痕量检测及其机理研究 |
1 引言 |
2 材料、仪器与试剂 |
2.1 主要试验材料 |
2.2 主要仪器 |
2.3 主要试剂和配制方法 |
3 方法与步骤 |
3.1 修饰材料的制备 |
3.2 玻碳电极的处理 |
3.3 电化学传感器的制备 |
3.4 电化学传感器性能的研究 |
3.4.1 稳定性的研究 |
3.4.2 重复性与重现性的研究 |
3.4.3 抗干扰性的研究 |
3.4.4 加标回收分析 |
4 结果与分析 |
4.1 电化学传感器的形貌表征 |
4.2 电化学传感器的有效比表面积 |
4.3 电化学传感器稳定性的探究 |
4.4 CLB的电化学行为 |
4.5 CLB的电氧化机理 |
4.6 电化学传感器标准曲线的建立 |
4.7 电化学传感器重复性和重现性研究 |
4.8 电化学传感器抗干扰性的研究 |
4.9 实际样品快检分析 |
5 讨论与小结 |
5.1 讨论 |
5.2 小结 |
第二节 电化学纳米传感器对克仑特罗和莱克多巴胺的同时快速检测 |
1 引言 |
2 材料、仪器与试剂 |
2.1 主要试验材料 |
2.2 主要仪器 |
2.3 主要试剂与配制方法 |
3 方法与步骤 |
3.1 修饰材料的配制 |
3.2 玻碳电极的处理 |
3.3 电化学传感器的制备 |
3.4 电化学传感器性能的研究 |
3.4.1 稳定性的研究 |
3.4.2 抗污染能力的研究 |
3.4.3 重复性与重现性的研究 |
3.4.4 抗干扰性的研究 |
3.4.5 加标回收分析 |
4 结果与分析 |
4.1 电化学传感器抗污染性能的探究 |
4.2 电化学传感器的表面形貌表征 |
4.3 电化学传感器稳定性的研究 |
4.4 电化学传感器的有效比表面积 |
4.5 电化学传感器的电化学表征 |
4.6 修饰材料浓度优化以及pH值优化 |
4.7 电化学传感器重复性和再现性的研究 |
4.8 电化学传感器抗干扰性能的研究 |
4.9 建立标准曲线 |
4.10 实际样品的加标回收分析 |
5 讨论与小结 |
5.1 讨论 |
5.2 小结 |
第三节 电化学纳米传感器对克仑特罗的便携式智能检测 |
1 引言 |
2 材料、仪器和试剂 |
2.1 主要试验材料 |
2.2 主要仪器 |
2.3 主要试剂和配制方法 |
3 方法与步骤 |
3.1 葛藤生物炭的制备 |
3.2 LDWE和 KVBC-Nf(IP)/LDWE的制备 |
3.3 电化学传感器性能的研究 |
4 结果与分析 |
4.1 电化学传感器的形貌表征 |
4.2 CLB的电化学行为 |
4.3 pH的优化 |
4.4 电化学传感器重复性和重现性的研究 |
4.5 电化学传感器抗干扰性能的研究 |
4.6 线性关系的建立 |
4.7 真实样品的CLB智能分析 |
5 讨论与小结 |
5.1 讨论 |
5.2 小结 |
第四节 特布他林的多种检测方法对比分析研究 |
1 引言 |
2 材料、仪器和试剂 |
2.1 主要试验材料 |
2.2 主要仪器 |
2.3 主要试剂和配制方法 |
3 方法与步骤 |
3.1 玻碳电极的处理 |
3.2 电化学传感器的制备 |
3.3 电化学传感器性能研究 |
3.3.1 重复性与重现性的研究 |
3.3.2 抗干扰性的研究 |
4 结果与分析 |
4.1 电化学传感器形貌表征研究 |
4.2 Pd-Pt电沉积圈数、COOH-Gra浓度优化和缓冲溶液p H值的优化 |
4.3 TRA的电化学行为 |
4.4 电化学传感器重现性和重复性的研究 |
4.5 电化学传感器抗干扰性能的研究 |
4.6 线性关系的建立 |
4.6.1 TRA的电化学传感线性关系的建立 |
4.6.2 TRA的高效液相色谱法线性关系的建立 |
4.7 实际样品传感分析 |
5 讨论和小结 |
5.1 讨论 |
5.2 小结 |
第三章 全文总结 |
1 总结 |
2 创新性 |
3 展望 |
参考文献 |
致谢 |
个人简介 |
(5)动物源性食品中兽药残留的快速筛查及定量检测技术研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第1章 前言 |
1.1 研究背景及意义 |
1.2 引言 |
1.2.1 易产生残留的兽药种类 |
1.2.2 兽药残留的危害 |
1.2.3 导致动物源性食品中兽药残留的原因 |
1.3 国内外研究现状 |
1.3.1 β-受体激动剂 |
1.3.2 喹诺酮类抗生素 |
1.3.3 大环内脂类抗生素 |
1.4 兽药残留的检测技术简介 |
1.5 研究内容及目的 |
第2章 在线固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉和羊肉中10种Β-受体激动剂 |
2.1 研究内容 |
2.1.1 标准品与试剂 |
2.1.2 仪器与设备 |
2.1.3 实验方法 |
2.2 结果与讨论 |
2.2.1 在线固相萃取条件的选择 |
2.2.2 HPLC条件的选择 |
2.2.3 MS参数的选择 |
2.2.4 方法的线性关系、LOD和 LOQ |
2.2.5 方法的加标回收率 |
2.2.6 与标准方法的比较结果 |
2.2.7 实际样品测定结果 |
2.3 结论 |
第3章 超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定牛奶中19种喹诺酮类抗生素 |
3.1 研究内容 |
3.1.1 标准品与试剂 |
3.1.2 仪器设备 |
3.1.3 实验方法 |
3.2 结果与讨论 |
3.2.1 质谱条件的优化 |
3.2.2 提取溶剂的选择 |
3.2.3 净化方式的优化 |
3.2.4 方法的线性范围、检出限以及定量限 |
3.2.5 回收率和精密度 |
3.2.6 实际样品检测 |
3.3 结论 |
第4章 Q-EXACTIVE质谱法筛查和确证猪肉中9 种大环内酯类抗生素的方法 |
4.1 研究内容 |
4.1.1 标准品与试剂 |
4.1.2 仪器与设备 |
4.1.3 方法 |
4.2 结果与讨论 |
4.2.1 提取溶剂的选择 |
4.2.2 色谱/质谱条件的优化 |
4.2.3 基质效应评价 |
4.2.4 方法的线性范围、检出限和定量限 |
4.2.5 回收率和精密度 |
4.2.6 实际样品检测 |
4.3 结论 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
(6)巯烯加成制备液相色谱固定相及其在手性对映体分析中的应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1 手性及手性分离 |
1.1.1 手性的提出及研究意义 |
1.1.2 手性对映体分离的方法 |
1.2 超分子主体化学与手性分离 |
1.2.1 环糊精类固定相 |
1.2.2 大环抗生素类固定相 |
1.2.3 多糖类纤维素固定相 |
1.3 固定相基质的选择 |
1.4 点击化学反应 |
1.5 研究的目的意义、主要内容和创新性 |
1.5.1 研究的目的意义 |
1.5.2 研究的主要内容 |
1.5.3 本研究的主要创新性 |
第2章 制备苄基脲-β-环糊精键合相用于建立LC-MS/MS监测人尿中巯基尿酸手性标志物新方法 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 仪器与试剂 |
2.2.2 苄基脲乙二胺单衍生化-β-环糊精键合相的制备 |
2.2.2.1 苄基脲单衍生化-β-环糊精手性柱的制备 |
2.2.2.2 巯丙基硅胶的制备 |
2.2.2.3 苄基脲-β-环糊精键合相(BzCDP)的制备 |
2.2.3 仪器分析 |
2.2.4 标准溶液配制 |
2.2.5 样品提取与净化 |
2.2.6 方法验证 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 苄基脲-β-环糊精固定相的制备方法和结构表征 |
2.3.2 PMA和BMA手性分析条件的选择 |
2.3.2.1 有机相含量对手性分离的影响 |
2.3.2.2 流动相pH值对手性分离的影响 |
2.3.2.3 柱温对手性拆分的影响 |
2.3.3 优化色谱条件 |
2.3.4 质谱分析条件的选择 |
2.3.5 优化样品前处理 |
2.3.6 方法确认 |
2.3.6.1 线性回归和最低检出限 |
2.3.6.2 准确度、精密度和稳定性测试 |
2.3.6.3 BzCDP制备方法的重现性 |
2.3.6.4 基质效应 |
2.3.7 实际尿样分析 |
2.4 结论 |
第3章 苄基苯乙醇胺-β-环糊精键合相的制备及其“多模式”手性色谱性能研究与应用 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 仪器与试剂 |
3.2.2 S(-)-苄基苯乙醇胺-β-环糊精键合固定相(BzCSP)的合成 |
3.2.3 Fe_3O_4磁性纳米粒子的制备 |
3.2.4 结构表征 |
3.2.5 仪器分析 |
3.2.5.1 液相色谱对手性分子的分离评价 |
3.2.5.2 液相色谱和质谱联用定量分析条件 |
3.2.6 果蔬样品前处理方法 |
3.2.7 方法验证和CSP分离能力的评价 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 固定相的表征 |
3.3.2 不同类型对映体在多模式下的分离评价 |
3.3.3 对实际样品中的手性对映体手性分离应用 |
3.3.3.1 标准曲线与检出限 |
3.3.3.2 准确度、精密度与稳定性测试 |
3.3.3.3 实际样品分析 |
3.4 结论 |
第4章 制备替考拉宁键合相用于建立LC-MS/MS测定肉中克伦特罗和沙丁胺醇对映体新方法 |
4.1 引言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 仪器与试剂 |
4.2.2 替考拉宁大环抗生素手性固定相的合成 |
4.2.3 仪器参数 |
4.2.4 标准溶液与工作溶液的配制 |
4.2.5 样品的提取和净化 |
4.2.6 方法验证 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 替考拉宁的巯烯加成键合方法 |
4.3.2 固定相的表征 |
4.3.3 键合量对手性分离的影响 |
4.3.4 克伦特罗和沙丁胺醇手性分析条件的选择 |
4.3.4.1 手性分离模式的选择 |
4.3.4.2 甲酸铵用量对手性分离的影响 |
4.3.4.3 有机溶剂对手性分离的影响 |
4.3.4.4 乙酸用量对手性分离的影响 |
4.3.4.5 柱温对手性拆分的影响 |
4.3.5 质谱分析条件的选择 |
4.3.6 优化样品制备 |
4.3.7 方法确认 |
4.3.7.1 线性回归和最低检测限 |
4.3.7.2 基质效应 |
4.3.7.3 准确度、精密度和稳定性测试 |
4.3.8 方法应用 |
4.4 结论 |
第5章 制备3,5-二氯苯基氨基甲酸酯化纤维素键合相用于建立LC-MS/MS测定手性杀菌剂对映体新方法 |
5.1 引言 |
5.2 实验部分 |
5.2.1 仪器与试剂 |
5.2.2 3,5-二氯苯基氨基甲酸酯化纤维素键合手性固定相(CELCSPs)的合成 |
5.2.3 表征 |
5.2.4 色谱和质谱条件 |
5.2.5 样品提取和净化 |
5.2.6 分析方法的确认和CSP分离能力的评价 |
5.3 结果与讨论 |
5.3.1 纤维素的衍生化和巯-烯加成键合反应 |
5.3.2 配体与固定相的基本结构表征 |
5.3.2.1 配体DCLCEL的1HNMR谱分析 |
5.3.2.2 配体DCLCEL的红外光谱分析 |
5.3.3 CELCSP对农药手性分离的评价 |
5.3.3.1 流动相的组成对手性分离度的影响 |
5.3.3.2 键合量对手性分离的影响 |
5.3.3.3 手性农药结构对分离的影响 |
5.3.3.4 柱温和热力学参数对手性分离的影响 |
5.3.3.5 流速和进样量对手性分离的影响 |
5.3.3.6 MRM优化质谱检测条件 |
5.3.4 样品前处理 |
5.3.5 方法确认 |
5.3.5.1 配制标准溶液 |
5.3.5.2 回收率测试 |
5.3.5.3 方法重现性测试 |
5.3.6 实际样品分析 |
5.4 结论 |
第6章 结论与展望 |
6.1 结论 |
6.2 展望 |
致谢 |
参考文献 |
附录 缩写 |
攻读学位期间的研究成果 |
(7)动物源性食品中β-受体激动剂分类及检测方法研究进展(论文提纲范文)
1 β-受体激动剂种类 |
2 β-受体激动剂的检验方法 |
2.1 高效液相色谱法 |
2.2 免疫分析法 |
2.3 色谱质谱联用技术 |
2.4 其他检测方法 |
3 结论 |
(8)稳定同位素技术在我国食品安全检测领域的应用进展(论文提纲范文)
1 稳定同位素在食品溯源技术中的应用 |
1.1 碳同位素的应用 |
1.2 氮同位素的应用 |
1.3 氢、氧同位素的应用 |
2 稳定同位素在食品品质和真实性鉴别中的应用 |
2.1 13C同位素的应用 |
2.2 2H、18O同位素的应用 |
2.3 15N同位素的应用 |
3 同位素稀释质谱法在食品中有害物质检测中的应用 |
3.1 在农兽药残留检测中的应用 |
3.2 食品中非法及滥用添加剂、迁移污染物及毒素的检测 |
4 展望 |
(9)水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 引言 |
1.1 β-受体激动剂结构分类 |
1.2 β-受体激动剂的应用及危害 |
1.3 β-受体激动剂在动物组织中的残留限量及相关法律法规 |
1.4 β-受体激动剂在动物组织中的代谢规律 |
1.4.1 β-受体激动剂在动物体内的主要代谢反应 |
1.4.2 β-受体激动剂在动物体内的主要代谢规律 |
1.5 β-受体激动剂残留检测技术概述 |
1.5.1 免疫分析方法 |
1.5.1.1 胶体金免疫层析法 |
1.5.1.2 酶联免疫法 |
1.5.2 仪器分析法 |
1.5.2.1 气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS) |
1.5.2.2 液相/超高效液相色谱-串联质谱法(LC/UPLC-MS) |
1.5.2.3 毛细管电泳法(CE) |
1.5.3 其它检测方法 |
1.6 选题的目的意义及研究内容 |
第二章 典型β-受体激动剂阳性样品的制备及其水解条件的研究 |
2.1 前言 |
2.2 仪器设备与实验材料 |
2.2.1 仪器设备 |
2.2.2 标准品及其配制 |
2.2.3 试剂及其配制 |
2.2.4 实验材料 |
2.3 仪器分析条件 |
2.3.1 色谱条件 |
2.3.2 质谱条件 |
2.4 实验方案 |
2.4.1 河鳗阳性样本的制备 |
2.4.1.1 实验对象与养殖条件 |
2.4.1.2 预实验方案 |
2.4.1.3 正式实验方案 |
2.4.2 河鳗肌肉中典型β-受体激动剂的结合态和游离态的含量测定 |
2.4.2.1 河鳗肌肉中典型β-受体激动剂的提取与含量测定 |
2.4.2.2 β-受体激动剂基质匹配标准工作液的配制 |
2.4.3 酶解和酸解条件的优化 |
2.4.3.1 酶解条件的优化 |
2.4.3.2 酸解条件的优化 |
2.4.3.3 样品前处理方法 |
2.5 实验结果与讨论 |
2.5.1 河鳗肌肉中典型β-受体激动剂的含量 |
2.5.1.1 预实验结果 |
2.5.1.2 正式实验结果 |
2.5.2 河鳗肌肉中典型β-受体激动剂存在形态的含量 |
2.5.3 酶解水解条件的优化结果 |
2.5.3.1 酶解溶液pH对水解效率的影响 |
2.5.3.2 酶用量对水解效率的影响 |
2.5.3.3 酶解温度和酶解的时间对水解效率的影响 |
2.5.4 酸解条件的研究 |
2.5.4.1 盐酸浓度对水解效率的影响 |
2.5.4.2 盐酸水解温度和时间对水解效率的影响 |
2.5.5 酶解和酸解条件分析 |
2.6 本章小结 |
第三章 水产品中18种β-受体激动剂多残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法的建立 |
3.1 前言 |
3.2 仪器设备与实验材料 |
3.2.1 仪器设备 |
3.2.2 标准品与试剂 |
3.2.2.1 标准品 |
3.2.2.2 试剂 |
3.2.2.3 标准溶液的配制 |
3.2.3 实验材料 |
3.3 实验方案 |
3.3.1 18种β-受体激动剂的超高压液相色谱-串联质谱仪器分析条件的建立. |
3.3.1.1 质谱仪器分析条件的优化 |
3.3.1.2 超高压液相色谱仪器分析条件的优化 |
3.3.2 水产品中18种β-受体激动剂的提取方法的研究 |
3.3.2.1 提取与净化方法 |
3.3.2.2 复溶液及针式滤膜的选择 |
3.3.2.3 定量方法 |
3.3.2.4 方法有效性评价 |
3.4 结果分析与讨论 |
3.4.1 18种β-受体激动剂的超高效液相色谱-串联质谱仪器分析条件 |
3.4.1.1 质谱分析条件 |
3.4.1.2 液相色谱分析条件 |
3.4.1.3 最佳仪器分析条件 |
3.4.2 建立水产品中18种β-受体激动剂的提取方法 |
3.4.2.1 水解方式的选择 |
3.4.2.2 净化方式的研究 |
3.4.2.3 固相萃取柱的选择 |
3.4.2.4 复溶溶液的优化 |
3.4.2.5 针式滤膜的选择 |
3.4.2.6 最佳样品前处理方法 |
3.4.3 定量方法的研究 |
3.4.3.1 基质效应的研究 |
3.4.3.2 同位素内标物的确定 |
3.4.4 方法有效性评价 |
3.4.4.1 方法线性范围及检测限、定量限 |
3.4.4.2 方法回收率与精密度 |
3.5 本章小结 |
第四章 水产品中β-受体激动剂残留筛查 |
4.1 前言 |
4.2 仪器设备与实验材料 |
4.2.1 仪器设备 |
4.2.2 试剂与材料 |
4.2.3 样品来源 |
4.2.4 水产品中18种β-受体激动剂的检测 |
4.3 结果分析与讨论 |
4.4 本章小结 |
第五章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
攻读学位期间发表的论文目录 |
(10)食源性动物组织中β-受体激动剂研究进展(论文提纲范文)
1 引言 |
2 β-受体激动剂结构分类及性质 |
3 β-受体激动剂在动物组织中的最大残留限量及代谢规律 |
3.1 β-受体激动剂在动物组织中的最大残留限量 |
3.2 β-受体激动剂在动物组织中的代谢规律 |
4 β-受体激动剂分析技术 |
4.1 β-受体激动剂免疫分析技术 |
4.1.1 胶体金免疫层析技术 |
4.1.2 酶联免疫检测技术 |
4.2 β-受体激动剂仪器分析技术 |
4.2.1 气相色谱-质谱法 |
4.2.2 液相/超高效液相色谱-质谱法 |
4.2.3 毛细管电泳法 |
4.3 其他检测技术 |
5 结论与展望 |
四、气相色谱-质谱法测定肝、肾和肉中β_2-受体激动剂残留量(论文参考文献)
- [1]表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇[D]. 孙铭雪. 烟台大学, 2021(11)
- [2]基于新型信号输出的四种免疫层析法的研究与应用[D]. 章钢刚. 南昌大学, 2020(01)
- [3]牛奶中β-受体激动剂和β-阻断剂类药物多残留检测方法的研究[D]. 王瑞. 安徽农业大学, 2020(04)
- [4]电化学纳米传感器对畜禽产品中β-激动剂检测研究[D]. 戈钰. 江西农业大学, 2020
- [5]动物源性食品中兽药残留的快速筛查及定量检测技术研究[D]. 徐赫楠. 河北科技大学, 2020(01)
- [6]巯烯加成制备液相色谱固定相及其在手性对映体分析中的应用研究[D]. 李良. 南昌大学, 2019
- [7]动物源性食品中β-受体激动剂分类及检测方法研究进展[J]. 廖艳华. 食品研究与开发, 2019(20)
- [8]稳定同位素技术在我国食品安全检测领域的应用进展[J]. 杜晓宁,张鹏帅,雷雯,王伟,侯捷. 同位素, 2019(03)
- [9]水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法的研究[D]. 陈清平. 上海海洋大学, 2019(02)
- [10]食源性动物组织中β-受体激动剂研究进展[J]. 陈清平,韩峰,汪洋,黄原飞,王守英,于慧娟. 食品安全质量检测学报, 2019(02)