一、增强组织工程支架:纤维蛋白胶稳定性的初步研究（论文文献综述）
吴可可,赵益涛,吴敏,李越,胡志奇,卢智慧,郭金山[1]（2021）在《聚合物基仿生医用胶黏剂的开发与应用》文中认为生物医用胶黏剂有望代替手术缝合线用于伤口闭合,可广泛用于皮肤、内脏、心血管、骨和牙齿等软/硬组织伤口的再生修复,市场前景广阔;然而,在湿态下如何使其对生物组织产生强力黏附一直是科学界面临的难题。为解决这一难题,研究者模拟自然界中各种动、植物的黏附策略,开发了一系列仿生医用胶黏剂。本文总结了各种聚合物基仿生医用胶黏剂的开发及其在手术伤口黏合、日常伤口护理、慢性伤口再生修复、骨折黏合固定等软/硬组织再生修复以及局部药物递送和原位治疗等领域中的应用,并展望了医用胶黏剂的未来发展方向,包括其在医疗美容领域的应用前景。
王岩森[2]（2021）在《功能化多孔复合材料的结构性能调控及在创伤救治中的应用研究》文中提出战场、事故或灾害中伤员大出血的快速止血与创面的护理修复是创伤救治的两个重要问题。研究新型高效的大出血止血材料和创面修复材料对救治伤员、挽救生命具有重大意义。现有的大出血止血材料存在诸多问题:生物类止血材料单独使用时稳定性差、使用条件要求苛刻;多糖类止血材料缺乏机械强度,仅适用于低、中度出血,对大出血的止血效果不理想;对于爆炸伤、火器伤或躯干贯通伤等深、狭窄或不规则的大出血伤口缺少形状自适、及迅速封堵伤口的能力。此外,现有的创面修复材料功能单一,大都缺乏固有的抗菌性能,对于深层、多渗液或慢性创面的修复效果并不理想。因此,本文针对现有止血材料存在的以上问题,以多孔材料为基体,通过引入物理吸液富集、生物刺激、电荷刺激、机械封堵等多重止血机制,设计和构建了三种大出血止血材料体系,分别是:生物因子锚定增强多孔复合材料（TCP）、双网络多机制多孔复合材料（PACF）、纤维增强形状自适应多孔复合材料（CMCP）,并对这三种多孔止血材料的理化性能、生物相容性、体外凝血性能进行了系统地调控和表征,最后通过动物体大出血模型分别对三种材料的体内止血效力进行评价。此外,针对创面修复材料存在的问题,以细菌纤维素（BC）为基体,设计和构建了抗菌增效柔性超透明多孔复合膜材料（PHMB-PBC）,并对其进行了系统的理化性能、生物相容性及抗菌性能表征,最后通过动物皮肤缺损模型对其促愈合性能进行了评价。基于聚乙烯醇（PVA）多孔材料的三维网络结构和高吸液特性,将生物活性因子凝血酶通过物理吸附和共价结合双重作用均匀地锚定到多孔材料的表面和内部网络上,制备得到的TCP具有良好的生物相容性和优异的体外凝血性能。TCP对大鼠肝脏出血的止血时间仅为31 s;但对大鼠股动脉大出血进行止血时,由于机械强度和结构稳定性不足,不能及时封堵伤口并有效止血。此外,室温存放超过12周后,TCP上的凝血酶活性急剧降低,导致其无法实现对肝脏出血的有效止血。将天然多糖海藻酸钠（SA）与PVA复合,通过戊二醛和Ca2+的双交联作用,制备了具有稳定双网络结构的PACF。双网络结构不但使PACF获得了优异的生物相容性,还使其具有促进血细胞的粘附、促进血栓快速形成和激活凝血系统的能力,能够通过吸液富集、多孔效应、电荷刺激多重止血机制协同作用促进快速止血。PACF具有优异的液体触发自膨胀性能,膨胀倍率超过2000%,同时膨胀过程中可产生3.8 N的动态膨胀力。与军用止血材料HemCon（?）、QuikClot（?）和CELOXTM相比,PACF具有更优异的止血效力,在大鼠肝脏出血模型和猪股动脉切断伤模型中均能实现止血并有效减少出血量。将高取代度的新型羧甲基纤维素（CMC）纤维和PVA复合,通过交联反应和超临界气体发泡技术制备了 CMCP。CMC独特的纤维散布穿插的三维多孔网络结构使其具有优异的承压能力、抗疲劳特性和吸液膨胀性,吸液过程中能够产生最高8 N的动态膨胀力并能承受超过0.083 MPa的液体冲击力。CMCP能够通过促进血细胞粘附和血小板的聚集活化、加速血栓形成、激活凝血系统等多重止血机制协同作用实现体外快速凝血。动物实验研究表明,CMCP可快速有效地实现对动脉大出血伤口的救治,止血时间小于95 s;同时,CMCP接触血液后迅速自膨胀,能够适应性的改变形状,完全贴合伤口组织并充分填充伤口腔隙或伤道,有利于有效压迫伤口出血部位、抑制出血并防止伤口感染。在BC的纳米纤维网络中引入聚六亚甲基双胍-聚乙二醇（PHMB-PEG）胶束液滴,通过特殊成型工艺制备了表面平滑且具有多孔结构的PHMB-PBC复合膜。PHMB-PEG的引入大大提升了多孔复合膜的柔韧性,同时使膜具有优异的持续吸水性能、保水性、超高透明度和气体透过率;PHMB-PBC具有杀菌、阻菌、抗粘附等多重抗菌效果,纳米孔结构和分子间相互作用使PHMB-PBC具有缓释抗菌功效和持久的抗菌活性;在大鼠皮肤全层缺损模型中,与两种商业化敷料产品相比,PHMB-PBC表现出更短的创面愈合时间,愈合过程中创面未发现感染且未出现水肿和炎症反应,表现出优异的抑菌抗感染效果。
陈菊芳,田玉楼,郝鑫[3]（2021）在《脂肪干细胞在颅颌面骨再生中的作用与潜力》文中认为背景:颅颌面骨缺损的修复仍面临严峻挑战,骨再生理念的引入为该问题指明了新的方向。脂肪来源干细胞获取便捷且具有显着的成骨分化能力,被认为是颅颌面骨再生的理想种子细胞。目的:综述影响脂肪干细胞成骨分化的因素及其在颅颌面骨再生的研究进展,以期为脂肪干细胞促进颅颌面骨再生的进一步研究提供思路。方法:计算机检索Pub Med数据库、万方数据库、CNKI期刊全文数据库2013年1月至2020年2月收录的相关文献。检索词为"adipose-derived stem cells;cranio-maxillofacial;oral tissue regeneration;periodontal tissue regeneration;bone regeneration;bone defects;osteogenesis",最终纳入88篇文献进行归纳总结。结果与结论:脂肪干细胞能够分化为成骨细胞,可以大量获取,体外扩增能力强,在颅颌面骨再生中具有广阔的应用前景。miRNAs/microRNAs参与了脂肪干细胞的成骨分化,脂肪干细胞与其他细胞共培养、与富血小板血浆联合应用、与改性的钛金属联合应用、应用基因技术等均是提高其成骨分化的有效手段。相较于常规体外支架,脂肪干细胞复合可注射性支架在成骨方面显示出更大的潜力。脂肪干细胞修复颅颌面骨缺损在临床中取得了一定进展,但仍缺乏大规模临床试验的证实。
雷运亮[4]（2020）在《不同配方明胶海绵/纤维蛋白胶支架对关节软骨碎块化后软骨细胞生物活性的影响》文中指出目的:比较不同配方的明胶海绵/纤维蛋白胶支架对幼年家兔软骨碎块化后软骨细胞迁移、增殖、表型、基质合成及组织整合的影响,为进一步的体内软骨碎块移植研究提供实验依据。方法:从36只4周龄家兔后肢膝关节获取软骨碎块（约1mm3）。将软骨碎块团分别植入明胶海绵支架、明胶海绵/纤维蛋白胶混合支架及纤维蛋白胶支架中,分别制作成无胶培养组（A组）、少胶培养组（B组）及全胶培养组（C组）体外培养模型（36个/每组）。于培养的第0、2、4周,每组随机取12个标本,通过组织学染色观察软骨细胞的迁移、增殖、表型、基质合成及组织整合情况,同时测量番红O染色及II型胶原免疫组化的平均光密度值。对比观察同一时间点的组间差异及同一组内不同观察点的组内差异。实验数据使用SPSS 17.0软件进行统计学分析,比较各组组间及组内的差异。结果:1.组织学染色观察:培养2周,A组及B组中大量软骨细胞外迁至碎块间及支架材料,碎块内可见较多软骨细胞处于增殖分裂状态;培养4周,A组及B组中处于分裂增殖状态的软骨细胞大量增加,A组碎块周边可见少量新生软骨组织形成,软骨组织部分融合,B组碎块周边及碎块间可见大量软骨细胞分布及新生软骨组织形成,软骨组织明显融合,附着于支架材料上的软骨细胞数明显多于A组;培养至4周,C组仅见极少量软骨细胞外迁,组织未见融合。2.番红O染色平均光密度值:组间比较,培养2周时各组间无明显差异（P>0.05）,培养至4周,B组明显高于A组及C组（P<0.05）,A组及C组间无明显差异（P>0.05）;组内比较,培养至4周过程中,各组番红O染色平均光密度值呈现先降低后升高的趋势（P<0.05）,培养4周时,B组明显高于0周（P<0.05）,A组仍稍低于0周（P<0.05）,C组与0周相比无明显差异（P>0.05）。3.II型胶原免疫组化平均光密度值:组间比较,培养2周及4周,B组均高于A组及C组（P<0.05）,而A组及C组同期比较无明显差异（P>0.05）;组内比较,培养至4周过程中,各组II型胶原免疫组化平均光密度值同样呈现先降低后升高的趋势（P<0.05）,培养4周时,B组高于0周（P<0.05）,A组及C组与0周相比差异无统计学意义（P>0.05）。结论:明胶海绵/纤维蛋白胶混合支架可更有效的促进关节软骨碎块化后软骨细胞的迁移、增殖、基质合成及组织融合,维持外迁软骨细胞表型稳定,有利于软骨碎块呈透明软骨修复。
柳春玉[5]（2020）在《急救用抗菌止血材料的构建及止血机理研究》文中研究指明过度失血是战伤、交通事故、自然灾害以及手术治疗过程中致死的主要原因,因此对于中、重度出血的快速高效止血显得尤为重要。目前市场上快速止血产品主要为硅铝酸盐类和壳聚糖类,存在硅铝酸盐类易引起血管栓塞,壳聚糖类止血效果不稳定等缺陷。因此,急需开发安全、高效控制中、重度出血的新止血方法和新止血产品。本论文主要围绕紧急救生止血材料的开发、止血机理、抗菌性能及生物相容性研究等展开。制备了一种具有良好抗菌性能的聚多巴胺/二氧化硅纳米多孔材料（PDA/SiNP）,其具有酚羟基、氨基官能团以及适当的疏水性。相比商业化产品Celox,PDA/SiNP体外凝血时间缩短了约150 s。PDA/SiNP不仅具有快速的止血效果,且在SD大鼠股动脉、静脉离断损伤与肝损伤模型中可显着降低失血量。PDA/SiNP主要通过血小板粘附与红细胞聚集、激活凝血级联的外源性途径。PDA/SiNP在208 h后仍对大肠杆菌生长具有长效抑制作用,其溶血性、细胞毒性、放热效应均较低,且体外浸润24 h后的失重率可达40%左右。采用冷冻干燥技术制备了具有良好的吸水、湿粘附、抗菌和促伤口愈合性能的多功能醛基葡聚糖海绵（DA）。DA海绵的孔径约30-50 μm,孔隙率>90%,其不仅能快速吸收血液（～54g/g）,且具有较高的湿组织粘附力（～51 kPa）。相比Celox,DA海绵的体外凝血缩短了约344 s。DA海绵可显着减少兔耳缘静脉、股动脉和肝损伤的出血量。DA海绵可通过快速粘附密封伤口、高度浓缩血细胞和凝血因子,实现快速凝血。DA海绵对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抗菌作用,并在兔全层皮肤损伤模型中显着促进伤口愈合。DA海绵的溶血性和细胞毒性均较低,对皮肤几乎无刺激性与致敏性,体内2天即可降解,降解后对SD大鼠脏器无明显影响。制备了具有良好组织粘附性、抗菌性和促伤口愈合性能的醛基葡聚糖（DA）/蒙脱土（MMT）复合海绵（DAM）。DAM海绵保持了DA海绵优异的湿组织粘附性（～46 kPa）。在DA和MMT协同作用下,相比Celox,DAM海绵可实现立即凝血。低放热效应的DAM海绵可在有限的急救时间内实现止血,在SD大鼠股动脉和静脉离断模型中可显着降低约95%的失血。DAM海绵能迅速粘附封闭伤口,促进血细胞聚集和粘附,快速激活并放大整个凝血系统,实现高效快速止血。DAM海绵抗菌活性与DA海绵相当,且亦有助于促伤口愈合。DAM海绵有效的避免了MMT泄露破坏红细胞引起栓塞的副作用。
刘国锋,杨大平,何志娟,李庆春[6]（2012）在《纤维蛋白胶在血管组织工程研究中的应用》文中研究表明随着人们生活方式的改变,世界范围内小口径血管疾病如心脑血管疾病、肢体周围血管疾病等的发病率及死亡率逐年上升,进行血管移植经常是治疗此类疾病的最有效方法。临床上自体血管移植是小口径血管移植的最佳选择,但很多情况下患者因某些疾病或以前手术获取等原因没有可供移植的自体血管。临床上对小口径自体血管替代物的需求巨大,但至今仍然没有可以替代自体血管的小口径血管移
肖文德[7]（2012）在《缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的实验研究》文中研究说明研究背景：创伤、肿瘤切除以及感染等多种原因均可导致骨缺损。骨缺损修复一直是临床骨科医师所面临的一项难题。目前,临床上常用的修复方法,如自体骨移植、异体骨移植均存在不足之处,难以满足临床上治疗的需要。随着骨组织工程技术的兴起和快速发展为骨缺损的修复重建提供了崭新的思路。珍珠层是软体动物珍珠贝科或蚌科动物的贝壳内层部分,一般由95%的文石型CaCO3晶体和5%的有机质组成,是一种天然的无机有机层状生物复和材料。珍珠层中的有机质主要含有蛋白和多糖等大分子物质。研究表明,珍珠层作为生物替代材料具有其它无机材料无法比拟的优势,它是一种来源于生物体的材料,来源丰富,成本低廉,加工简易,理化性质及生物学特性与动物及人类骨组织非常接近。法国科学家Lopez等首次在体外研究证实珍珠层具有诱导造骨细胞活化成骨的作用,其后相关的研究证实珍珠层是一种新型的可降解生物活性材料,它不仅具有很好的生物相容性,而且同时具有骨传导作用和潜在骨诱导性,与现有的临床所用的各种骨植入材料相比具有无比的优越性,是一种很有前途的骨植入材料。随着人们对支架材料性能要求的进一步提高,单相的生物支架材料已经难以满足临床的要求,因而将不同性质的材料进行复合以获取优良临床性能的复合生物材料已经成为当前材料领域研究的热点。有机高分子聚合物材料聚乳酸（Poly-lactide acid, PLA）,具有良好的生物相容性、可降解吸收性,聚乳酸作为新型生物可降解材料在生物医学应用方面占据着重要地位。其中,消旋聚乳酸（Poly-D,L-lactide acid, PDLLA）降解和吸收速度较快,更适宜选作骨替代材料。尽管聚乳酸具备诸多优点,但它存在高疏水性、细胞亲和性差、机械强度不足和产物易引起炎症反应等缺点使其应用受限。由于珍珠层的主要成分是CaC03晶体,具有一定的碱性、力学性能较好,与聚乳酸复合可弥补各自的缺点。因此,本课题组早期采用自行设计的“模压增强法”专利技术制作珍珠层／聚乳酸复合人工骨。经过一系列的体内外研究,均证实了这种复合材料具有良好的生物相容性和成骨能力；与此同时,我们也发现珍珠层的生物降解缓慢,降解速度与新生骨的生长速度不成比例。近年来人们对纳米材料的研究,取得了广泛的进展。为此,本着如何改善珍珠层人工骨降解性能和保持其生物学活性的目的,本课题组试图探讨纳米珍珠层人工骨在生物学领域应用。我们利用行星式球磨机制备纳米级珍珠层粉,然后将纳米级珍珠层粉与消旋聚乳酸复合,按照溶剂浇铸、热压铸模、溶质沥滤的工序,制成纳米珍珠层人工骨,初步研究表明纳米珍珠层人工骨原材料粒径小,有利于降解吸收,并具有良好的生物相容性及生物活性。由于纳米珍珠层与消旋聚乳酸混合制备人工骨材料,总体上降低了珍珠层的含量,从而降低了人工骨的潜在骨诱导性；加上我们课题组系列前期研究证实PDGF-BB可以加速骨缺损的修复,同时促进破骨细胞的骨吸收功能,在调节骨组织改建中发挥重要作用。因此,我们在改善复合支架材料理化性能的基础上尝试将PDGF-BB与纳米珍珠层／聚乳酸支架复合,增强其骨诱导性,从而促进其修复骨缺损的能力。本实验研究是在上述仿生的思路下和本课题组前期研究的基础上,采用粒子沥滤-模压成型-冷冻干燥技术制备缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架,并对支架的理化性能、力学性能、生物相容性和成骨能力进行综合评价,为新材料的临床应用提供实验依据。目的：1.探讨缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架的制备方法及其性能；2.观察缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架材料对MC3T3-E1粘附、增殖及分化等生物行为的影响；3.探讨缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架材料的动物体内生物相容性和使用安全性；4.探索将缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架植入兔桡骨15mm临界性骨缺损,观察其体内成骨情况及修复骨缺损的效果。方法：1.缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架的制备及表征（1）纳米珍珠层粉的制备以海水珍珠层粉为原料,利用行星式球磨机制备纳米级珍珠层粉,对所得珍珠层粉采用超高分辨率场发射扫描电子显微镜进行检测和X射线衍射分析。（2）缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架的制备采用溶剂浇铸-粒子沥滤法制备聚乳酸支架（S1支架）和纳米珍珠层／聚乳酸支架（S2支架）,接着将PDGF-BB与纤维蛋白胶混合注入S2支架,冷冻干燥后制成缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架（S3支架）。三种支架通过万能测试机测试抗压强度、扫描电子显微镜观察表面形貌以及阿基米德法测定孔隙率,对以上检测结果进行对比分析；利用ELISA法检测S3支架降解过程中PDGF-BB释放量。2.缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架的细胞相容性将MC3T3-E1细胞分别接种聚乳酸支架（S,支架组）、纳米珍珠层／聚乳酸支架（S2支架组）和缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架（S3支架组）,单纯细胞培养为空白对照组。在倒置相差显微镜下观察MC3T3-E1细胞贴附情况,在扫描电子显微镜下观察MC3T3-E1细胞在材料上生长情况,沉淀法和MTT法检测MC3T3-E1细胞的粘附和增殖情况,碱性磷酸酶试剂盒测定细胞碱性磷酸酶活性变化,茜素红钙结节染色观察MC3T3-E1细胞矿化能力的变化。3.缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架的组织相容性（1）将制备好的缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架放入生理盐水中获取材料浸取液,然后进行急性全身毒性试验、皮内刺激试验以及热原实验。（2）动物体内筋膜下植入试验：取新西兰大白兔12只,在兔皮下筋膜组织中植入聚乳酸支架（S1支架组）、纳米珍珠层／聚乳酸支架（S2支架组）和缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架（S3支架组）。分别于术后1、4、8、12周分别行X-ray检查,取材后行HE染色、光学显微镜下观察组织反应情况。4.缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架的成骨能力（1）实验分组体重2-3kg的成年雄性新西兰大白兔36只,随机分为4组,两侧桡骨制造15mm骨缺损。分别植入聚乳酸支架（S1支架组）,纳米珍珠层／聚乳酸支架（S2支架组）和缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架（S3支架组）,不植入支架材料的为空白对照组。（2）兔桡骨临界性骨缺损模型的建立手术过程：动物麻醉后,备皮、消毒、铺中,沿桡骨干长轴方向切开皮肤、皮下组织、深筋膜,钝性分离肌肉,骨膜剥离器剥离骨膜,暴露桡骨中段,手持式电动摆锯截取兔双侧桡骨中段,造成约15mm骨和骨膜节段性骨缺损模型,按组别分别将各组支架材料放置于骨缺损部位。（3）取材及观察指标在植入支架材料后4,8,12周观察各组实验动物饮食、活动及伤口愈合等大体情况,以及骨缺损部位X射线变化,并取材行大体观察、Micro-CT扫描重建、骨密度测量和组织学观察。结果：1.X射线衍射分析结果表明所选样品96%为文石型CaC03,平均粒度为70.3nm。超高分辨率场发射扫描电子显微镜测试表明珍珠层粉中的文石颗粒粒径45-95nm,颗粒大小不等,存在团聚现象。成功制得S1支架,S2支架和S3支架三种材料,均为3.5mmx3.5mm×15mm和8mm×8mm×l5mm的实心圆柱体。2.通过电镜观察,S1支架,S2支架和S3支架三种材料,均具有良好的三维多孔结构,孔径分别为（330.0±55.6）μm、（322.5±50.8）μm和（303.3±47.0）μm,差异无统计学意义（P=0.141）；采用阿基米德法测定孔隙率分别为81.0±1.1%、82.5±0.8%和80.2±0.7%,差异无统计学意义（P=0.211）；生物力学测试结果显示抗压强度分别为（3.6±0.12） MPa、（5.0±0.35） MPa和（5.1±0.26）MPa, S1与S2和S3有显着性差异（P<0.001）。 ELISA实验结果表明S3支架中复合的PDGF-BB释放长达30d,呈持续缓慢释放。3. MC3T3-E1细胞在S3支架上能良好的粘附、增殖,并向支架孔内生长,明显优于S1和S2支架。培养4h和24h后S3支架组细胞粘附率均显着高于S1和S2支架组,差异均有统计学意义（P<0.001）。 MTT检测MC3T3-E1在各组中均生长良好,4值均随时间延长而增大,同组各时间点比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;各时间点组间比较,S3支架组与其余三组比较差异有统计学意义（P<0.001）。各组ALP活性在第7d时达到最高峰,各时间点细胞ALP活性表达S3组最高,与其余各组比较有显着性差异（P<0.001）。支架材料与MC3T3-E1细胞共培养3周后,经茜素红染色,可见大小不一、形态各异的红色结节,与S1支架组、S2支架组和空白对照组相比, S3支架组的矿化结节数目和面积明显增加。4.通过急性全身毒性试验、皮内刺激试验、热原试验和动物皮下植入试验表明,缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架材料无毒性作用,不引起皮内刺激反应,不具有致热原作用,体内植入后无明显组织反应,符合相应标准要求,具有良好的生物安全性。5.一般情况：术后所有动物伤口愈合良好,未发生骨折,活动进食情况和精神状态基本正常。X线检查：S3支架组在术后4周时截骨端及缺损区有密度较低的骨痂形成,缺损区部分为骨痂填充；术后8周时骨缺损处己有大量新生骨所填充,两断端间形成桥接,可见部分髓腔再通；术后12周时骨缺损处完全为新生骨桥接,密度较均一,骨缺损基本完全愈合,髓腔再通；各时间点Lane-Sandhu X线评分,S3支架组均优于S2支架组,有显着性差异（P<0.05）；S2支架组优于S1支架组和空白对照组,有显着性差异（P<0.05）。骨密度测量：各时间点S3支架组的骨密度显着高于S1与S2支架组,有显着性差异（P<0.001）,12周时S3支架组的骨密度值与正常值无显着性差异（P>0.05）。大体标本观察：术后12周时S3支架组材料完全被骨痂包裹,界限消失,不易分辨出骨缺损端,皮质完全连接；S2支架组可见断端出现骨性连接,修复尚不完全；S,支架组仅尺侧有少量骨相连,空白对照组骨缺损清晰可见。Micro-CT扫描重建：术后12周S1支架组重建后只能看到零星的新生骨结构；S2支架组重建后可见形成的新骨结构不规则,部分骨缺损未能修复；S3支架组重建后可见形成的新骨结构连续、完整、规则,骨缺损基本完全修复；空白对照组未见成骨,桡骨保持了骨缺损状态。组织学检查：S3支架组术后4周,骨断端与支架材料结合部、支架材料内部均可见少量的新生软骨,有类骨样组织出现,支架结构较完整,可见纤维结缔组织长入,并有少量血管存在；术后8周,骨缺损处新生骨组织增多,出现成熟的骨细胞和编织骨,支架材料部分降解,内部有血管生成；术后12周,新生骨逐渐改建,骨断端与材料界限不清,两者以大量的编织骨或成熟的板层骨连接,髓腔再通。结论：1.缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架材料具有高孔隙率、合适的孔径和孔与孔之间的贯通性,其生物力学特性达到了组织工程对支架材料的性能要求,并且持续缓慢释放PDGF-BB。2.缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架材料属于无细胞毒性的生物材料,具有良好的生物相容性,有利于MC3T3-E1细胞的粘附与生长,并且在一定程度上促进MC3T3-E1细胞的分化和矿化。3.缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架材料无毒性作用,不引起皮内刺激反应,不具有致热原作用,体内植入后无明显组织反应,具有良好的生物安全性,符合作为骨组织工程材料基本条件。4.体内、外实验证实缓释PDGF-BB的纳米珍珠层／聚乳酸／纤维蛋白胶复合支架具有良好的骨传导作用和骨诱导性,是一种成骨活性良好的骨缺损修复材料。
廖云君[8]（2011）在《应用去分化脂肪细胞构建工程化脂肪组织的实验研究》文中进行了进一步梳理背景及目的随着整复重建外科的发展,自体组织移植及人工材料替代修复软组织缺损成为重要的治疗手段,尽管这能有效地改善受区的组织缺损状况,但自体移植物的来源十分有限,又常受到血供及其供区的继发畸形的限制,游离脂肪移植的自体吸收率较高,人工材料易产生排斥反应等,故目前这些方法的治疗效果均不是十分理想,难以完全满足临床的需要。组织工程技术的出现为临床上更好的解决组织缺损等难题提供了一个新的思路。近年来,组织工程技术能以少量种子细胞,经体外扩增后与生物材料复合,修复较大的组织或器官缺损,重建生理功能,为真正实现无损伤修复组织缺损和真正意义上的形态、结构与功能重建开辟了新的途径。组织工程学的发展需要几个必备的因素,即：（1）可获得的种子细胞,并能控制其生长和组织形成；（2）结构精确的三维支架,以适合再造需要的组织量和形状,而且与细胞具有良好的组织相容性；（3）适宜的微环境,能提供充分的血供和营养,维持细胞增殖和组织功能。近年来,人脂肪组织来源的干细胞（Adipose derived stem cells, ASCs）成为当今干细胞研究领域的一大热点。但ASCs是位于人脂肪组织内的一个混杂细胞群体。只有大约40%的细胞能向脂肪细胞分化。因此,ASCs并不能完全满足脂肪组织工程的发展需要。故寻找一种分离容易、增殖能力强、成脂分化率高的更优秀的种子细胞仍然是研究热点。脂肪组织内含有多种不同的细胞,主要有成熟脂肪细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、组织细胞和干细胞等。大量的脂质聚集使脂肪细胞具有的漂浮性,导致细胞难于体外培养,因此对该细胞的特性研究很少。脂肪细胞由此被认为是处于分化终末期,缺乏增殖能力的一种细胞。有研究表明,成熟脂肪细胞在体外培养的过程中,能脱去脂滴,重新启动增殖机制,开始分裂增生。我们把这种生理转变称之为脂肪细胞去分化。脂肪细胞去分化将开创细胞生理学一个令人惊喜的领域,改变人们对于组织再生能力的许多观点。然而,关于去分化脂肪细胞（dedifferentiate adipocyte, DA）的细胞生物学特性研究还很少。前期研究证实DA在体外定向诱导培养下具有向成脂、成骨、成软骨分化等多向分化能力,且较之ASCs有更高的成脂能力。因此,DA有可能成为脂肪组织工程更具前景的种子细胞来源。组织工程常用的支架材料分为天然材料和人工合成材料,天然材料包括：天然多糖类材料有纤维素、甲壳素、透明质酸等；天然蛋白质类材料有胶原和纤维蛋白等；人工合成的材料有聚乳酸（PLA）、聚乙醇酸（PGA）或两者聚合物聚乳酸-聚乙醇酸（PLGA）、聚四氟乙烯、羟基磷灰石、聚乙烯醇、海藻酸盐等。依据他们各自特点,被不同程度地应用于组织工程的研究。由于应用脂肪细胞组织工程技术修复软组织缺损近期才引起学者们的关注,故而用于构建脂肪组织工程有效的生物材料支架研究不多,目前常用的有可降解的多孔泡沫,如PLGA、透明质酸、膨体聚四氟乙烯等,然而,究竟何种材料能成为脂肪组织工程种子细胞的理想载体尚不十分明确,如果能找出最适合构建工程化脂肪的支架材料,将能大大促进脂肪组织工程的研究。本实验拟研究人DA向脂肪细胞、成骨细胞体外定向诱导分化中相关基因表达,同时判断种子细胞与Ⅰ型固态胶原支架及纤维蛋白胶可注射支架复合后在体内构建组织工程化脂肪组织的可能性,以寻找适宜的脂肪组织工程种子细胞载体,探索构建组织工程化脂肪组织的有效方法；另外,对DA进行AD、EGFP体外荧光标记,观察该标记物对细胞生物性状的影响,为种子细胞研究寻找理想的细胞标记方法。方法1、DA、ASCs的分离、培养及检测自成人吸脂术后抽吸物提取成熟脂肪细胞及ASCs,天花板贴壁培养法诱导成熟脂肪细胞去分化,观察细胞形态变化,获得DA。同时对细胞进行体外定向成脂、成骨诱导分化,并以油红0染色、茜素红染色进行鉴定。Real-time PCR分析细胞内PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、Leptin、LPL、RUNX2、SOX9的表达水平。2.Ad.EGFP转染并标记DAAd.EGFP按不同感染复数（multiphcity of infection, MOI）值（MOI=0,10,20,30,50,100）体外转染DA,进行EGFP荧光标记,倒置显微镜及荧光显微镜观察细胞生长情况及传代后荧光强度的变化；测定腺病毒转染DA的效率；油红0染色检测细胞标记后成脂能力。使用MTT比色分析法检测标记前后细胞的增殖情况,同时将培养细胞上清液进行乳酸脱氢酶（LDH）含量测定,检测Ad.EGFP对细胞的毒性。3、DA与海绵状Ⅰ型胶原蛋白、纤维蛋白胶生物相容性的检测将标记后的DA分别与Ⅰ型胶原蛋白海绵支架、纤维蛋白胶体外联合培养,测定细胞在支架上的黏附率,相差显微镜及电子显微镜动态观察细胞在支架上黏附、伸展、生长和增殖情况；使用台盼蓝拒染法检测细胞活力,油红0染色检测细胞复合支架后成脂能力。4、体内工程化脂肪组织的构建将Ⅰ型胶原支架与纤维蛋白胶可注射支架分别与GFP标记的成脂诱导后DA或ASCs混合,设空白支架为对照组,同体双侧植入裸鼠背部皮下,12周后取出植入物。进行组织工程新生物大体观察和湿重测定后荧光显微镜观察大体组织标本,最后组织学检测、HE染色定性。血管计数法检测新生物血管密度。结果1.分离培养的DA形态类似于成纤维细胞,具有很强的增殖及多向分化能力。在脂肪、成骨分化诱导培养基的作用下,分化出成熟的脂肪细胞和成骨细胞,油红0、茜素红染色阳性。细胞诱导分化前,DA内PPARγ、C/EBPβ的表达高于ASCs,而RUNX2.SOX9的表达低于ASCs.细胞成脂诱导后,DA内PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、Leptin、LPL的基因表达始终高于ASCs,增加的幅度更大；而成骨诱导后,ASCs内RUNX2的表达水平始终高于DA。2.Ad.EGFP可成功进入DA。24h可见绿色荧光,5d荧光表达强度明显较高,DA传代后仍有强荧光表达。转染DA后,不影响其增殖活性。MOI为0、10、20、30、50、100时转染率分别为0%、11.3%、28.5%、43.7%、95.8%、96.3%。细胞标记后不影响向脂肪细胞分化的能力。3.DA可以在海绵状Ⅰ型胶原蛋白支架、纤维蛋白胶支架上生长并逐渐黏附,细胞与不同的支架混合,细胞在支架上的黏附率也不同：DA在海绵状Ⅰ型胶原蛋白支架组（n=6）的细胞黏附率为77.67%±3.33%；DA在纤维蛋白胶组（n=6）的细胞黏附率为91.83%±2.79%,两组采用独立样本t检验比较差异有统计学意义（t=7.996,P<0.001）。而DA在海绵状Ⅰ型胶原蛋白支架组（n=6）的细胞成脂分化率为63.0%±3.0%；DA在纤维蛋白胶组（n=6）的细胞成脂分化率为63.2%±3.3%,两组采用独立样本t检验比较无显着性差异（t=0.091,P=0.929）。DA与支架混合培养后不影响细胞的形态、生长增殖状况,细胞与支架复合后不影响向脂肪细胞分化的能力。4.术后12w取材发现,DA-胶原蛋白组、ASCs-胶原蛋白组、DA-纤维蛋白胶组、ASCs-纤维蛋白胶组于移植物包埋区均可观察到新生组织形成；空白对照组（完全培养基-胶原支架组、完全培养基-纤维蛋白胶组）均未见新生组织形成。DA-胶原蛋白组（n=6）新生组织平均湿重为0.0728±0.0184g；ASCs-胶原蛋白组（n=6）新生组织平均湿重为0.0732±0.0198g；DA-纤维蛋白胶组（n=6）新生组织平均湿重为0.1109±0.0020g, ASCs-纤维蛋白胶组（n=6）新生组织平均湿重为0.1080±0.0028g。DA-胶原蛋白组与ASCs-胶原蛋白组、DA-纤维蛋白胶组与ASCs-纤维蛋白胶组之间湿重比较,无显着性差异（均为P>0.05）。HE染色证实新生组织均为成熟脂肪组织,支架已完全吸收降解；免疫荧光染色阳性证实新生组织为外源性。各组新生微血管密度分别为：DA-胶原蛋白组11.22±2.53;ASCs-胶原蛋白组15.22±2.39；DA-纤维蛋白胶组10.72±2.42:ASCs-纤维蛋白胶组15.00±2.54。DA-胶原蛋白组与ASCs-胶原蛋白组、DA-纤维蛋白胶组与ASCs-纤维蛋白胶组之间微血管密度比较,差异有统计学意义（P均<0.05）。各组新生物纤维化程度分别为：DA-胶原蛋白组24.90%±0.49%；ASCs-胶原蛋白组25.10%±0.73%;DA-纤维蛋白胶组25.00%±0.75%；ASCs纤维蛋白胶组24.70%±0.72%。DA-胶原蛋白组与ASCs-胶原蛋白组、DA-纤维蛋白胶组与ASCs-纤维蛋白胶组之间纤维化程度比较,无显着性差异（均为P>0.05）。在体内,DA表达内皮细胞表面标记——CD31,参与血管的形成。讨论种子细胞是构建组织工程脂肪核心问题之一。在脂肪组织中成熟脂肪细胞已被证实能去分化为DA, DA具有强增殖能力,多向分化能力,高成脂分化率。本实验从人脂肪组织成功获取脂肪细胞,天花板贴壁培养诱导去分化获得DA。DA作为种子细胞与其他细胞相比具有相当的优越性,该细胞来源广泛、取材容易,大量获取,高成脂分化率。组织工程另一核心内容是寻找具有组织再生潜力的支架材料。在生物材料方面,已开发和研制了适用于不同组织构建的生物支架材料。各类材料都具有各自的优点和缺点,而胶原蛋白在组织工程构建中作为支架材料的效果已被肯定。在这个实验中,显示胶原蛋白作为支架材料与ASCs有良好的相容性及黏附性,对细胞无毒性,不影响细胞增殖。同时,细胞标记一直是困扰组织工程技术修复机制研究的一大难题,其在干细胞来源的种子细胞的缺损修复研究中尤为重要。寻找一种直观、长期稳定,同时不影响细胞组织形成能力的标记方法非常重要。在本实验中,EGFP对DA成功进行了标记,且具有上述优点。在这个实验中,脂肪分化诱导后的DA与ASCs一样,与Ⅰ型胶原、或纤维蛋白胶支架混合培养后能在裸鼠皮下新生结构功能完整的脂肪组织块。该研究提示,DA作为种子细胞的确可以应用于脂肪组织的组织工程研究,并且能合成具有三维结构及功能的脂肪组织。结论1、本实验成功地从人皮下脂肪组织中诱导培养出DA,建立了一整套有关DA分离、培养和鉴定的较简便的方法。DA具有很强的增殖和自我更新能力,具有向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞分化的潜能,尤其是高成脂分化力。DA来源丰富、取材容易,创伤小,是理想的组织工程种子细胞,具有广阔的应用前景。2、腺病毒是较好的基因载体,是一个高效、安全快捷的基因修饰操作系统,EGFP在DA中能持续稳定表达,将为基因治疗和细胞示踪提供有效的实验方法。EGFP对细胞无毒副作用,安全性高,对细胞的生长增殖及成脂分化无明显影响。3、DA可以在海绵状Ⅰ型胶原蛋白、纤维蛋白胶支架上逐渐黏附,细胞黏附率高,生长、增殖良好。支架对细胞无毒性反应。海绵状Ⅰ型胶原蛋白、纤维蛋白胶材料与DA之间具有良好的生物相容性。4、以胶原蛋白和可注射型纤维蛋白胶为支架材料,复合体外培养的人DA,能在体内成功构建成熟的脂肪组织块,并证实细胞参与血管内皮的构成。该研究提示,DA也能为将来软组织缺损的组织工程修复提供重要的种子细胞来源,并为体内研究脂肪细胞的生长代谢提供了研究模型。
徐晓红[9]（2010）在《纤维蛋白基纳米纤维的交联、表征及生物相容性研究》文中指出由于天然材料具有良好的生物相容性,近年来已成为组织工程领域的研究热点。其中,纤维蛋白（fibrin）是生物材料中常见的一种天然高分子材料,是血液凝固过程中经过一系列凝血级联反应产生的一种天然蛋白质。由于纤维蛋白原从血浆中提取而来,具有良好的组织相容性,能够为细胞黏附和细胞间相互作用提供必要的生物信号,促进组织再生,因而纤维蛋白基材料在组织工程领域中具有更广泛的应用前景。静电纺丝是现阶段一种非常简单有效的制备纳米纤维的方法。由于纳米纤维所具有的高的比表面积,高孔隙率,很适合用来模拟细胞外基质环境。因此在组织工程领域具有潜在的应用价值。本文从仿生的角度出发,采用静电纺丝的方法制备纤维蛋白原纳米纤维,找到了合适的纺丝工艺。但是由于天然材料本身降解快,遇水无法保持其完整的纤维形态,其力学性能难以满足组织工程对生物支架力学性能的要求。因此,在生物材料特别是作为组织工程支架材料的使用过程中,为了克服天然材料自身的缺点,通过添加一种人工合成聚合物混纺或对天然材料本身进行化学修饰无疑是目前改善材料性能的重要手段。本实验中通过京尼平、戊二醛交联,以乙醇作为对照处理,以及与P（LLA-CL）混纺的方法对制备的纤维进行改性,并且交联中改善了以往浸泡交联的方法,分别采用京尼平蒸汽、戊二醛蒸汽,乙醇蒸汽处理,并对其外观形貌（SEM）、结晶晶相结构（XRD）、热稳定性（TG）、化学结构（FTIR）、亲疏水性、力学性能及生物相容性进行了研究。结果表明通过京尼平蒸汽交联处理后的纳米纤维膜的各种性能得到了明显的改善,而通过混纺制备的各种比例的复合纳米纤维中,纤维蛋白原/P（LLA-CL）为40:60和60:40的比例分别在应力和应变中表现出了较为明显的优势。生物相容性实验表明,细胞的粘附和增殖性能并没有受到明显的影响。以上研究表明通过共混和交联,能够制备出性能更为优异的纤维蛋白基纳米纤维,这种材料有望用于血管、皮肤等软组织修复和支架构建。
董青山[10]（2009）在《动静脉短路环法构建血管化组织工程骨的实验研究》文中进行了进一步梳理骨组织工程的最主要障碍是早期中心的血管化不足,营养和氧份不能保证细胞的成活。既往虽然有很多促使血管化的方法应用,如埋植在富血管的机体组织内、植入血管束等,有一定的效果,构建出小块的组织工程骨,但它们的成活主要是依赖组织液的渗透,最多只能达到组织内100300μm,这种血管化称为“外生性血管化”。与之相对应的是“内生性血管化”,即支架材料预先构建血管化,完成内循环交通系统,再加入成骨细胞等构建成骨。方法之一是体外生物反应器内孵育形成内循环;二是植入动静脉短路环法体内构建内生性血供。该方法早期是整形外科用于皮瓣等构建,发现这种血管环可以高效地诱导血管新生,因手术创伤、炎症反应和血流动力学改变等,激发内皮细胞上调血管内皮生长因子、出芽、再生血管。2006年开始用于骨组织工程。本课题主要策略是利用动静脉环模型原理,首次选取新西兰兔股动静脉,吻合成动静脉短路环,导入天然珊瑚中,外包裹隔离膜,使珊瑚在一个相对独立的空间内产生内血管化,再加入成骨生长因子,构建出带血管蒂的组织工程骨。其特点在于:1.动静脉短路后形成的局部环可以高效地诱导血管新生;2.隔离膜既可以阻断外来纤维组织的过度长入,又可以自由伸缩,满足复杂的组织形态变化需求;3.珊瑚是良好的骨修复材料和骨组织工程支架材料;4.珊瑚发生了内生性血管化,解决了组织工程骨的内部血供和营养障碍,成骨效果明显加强。实验比较了动静脉血管环法和常规的动静脉血管束法在珊瑚中诱导血管新生的能力,验证了动静脉环法的优越性;通过血管墨汁灌注、血管铸型、血管内膜电镜等方法,探讨了血管新生的原理主要是内皮出芽生长和动脉生长;进一步在血管环周围和珊瑚表层增加纤维蛋白胶,减小血管所受刺激,优化了实验方案;最后以纤维蛋白胶作为载体,融附骨形成蛋白,加入预血管化的珊瑚中,构建出带血管的组织工程骨。本实验共分六部分。实验一天然滨珊瑚无害化处理后形态学和抗压强度的变化目的:检测天然滨珊瑚经化学和物理方法处理后大体、显微结构以及抗压强度等变化。方法:天然滨珊瑚磨改制备成6×8×10 mm3的椭圆形方块,放入5%次氯酸钠溶液中浸泡两周,煮沸3个周期、超声清洗5个周期,然后烤干,最后高温高压消毒。检测珊瑚抗压强度变化,体视镜下和扫描电镜下观察珊瑚表面和孔隙清洁度、大小等变化。结果:三个阶段珊瑚的抗压强度无明显变化。经浸泡和超声处理后珊瑚表面和孔隙内明显清洁,异物减少,而孔隙大小和结构无明显改变。高温高压消毒后珊瑚表面和孔隙与处理后组一致。结论:天然滨珊瑚经物理、化学处理后,表面和内部异物被清除,外观结构和抗压强度不受影响。实验二动静脉短路环法和血管束法诱导珊瑚血管化能力的初步研究目的:用AV环和AV束两种血管载体预构珊瑚支架材料血管化,探索哪种方法有更强的诱导血管新生能力。方法:解剖分离出新西兰兔左侧股静脉和股动脉及其腘动脉分支。A组（n=18）是将腘动脉和股静脉末端切断,近心端行血管端端吻合,形成动静脉短路环,环绕套入天然珊瑚块的侧槽中。B组（n=18）是股动静脉血管束保持血流通畅,不切断,动静脉分开套入珊瑚块的两边侧槽中。植入体外加ePTFE膜包裹隔绝,固定于腹股沟皮下。2、4、6周行标本的墨汁灌注和大体观察,墨汁灌注后珊瑚脱钙、HE染色组织学观察,分析珊瑚孔隙中组织结构和血管新生情况,计数每份标本的平均血管密度作定量统计学分析。结果:珊瑚植入体内后表面和深部有大量纤维血管样组织生长。墨汁灌注显示血管广泛分布在珊瑚表层和间隙内,结构成熟,4周已贯穿珊瑚块的全层。2、4、6周血管密度逐渐加大,A组较B组血管生成密度有明显统计学差别（P<0.01）。结论:AV环方法和AV束方法均可以构建出血管化珊瑚支架,前者诱导血管新生的能力更强,说明这种动物模型是可行的。实验三两种血管束法诱导珊瑚血管化能力的比较目的:比较末端结扎和不结扎两种血管束法诱导珊瑚血管化的能力。方法:选择新西兰兔的股动脉和股静脉解剖分离形成血管束,A组（n=9）是血管束保持血流通畅,动静脉分别套入珊瑚支架的两侧槽中。B组（n=9）是末端切断结扎形成动静脉环,环绕套入珊瑚支架的侧槽中。两组均外加ePTFE膜包裹隔绝,植入腹股沟皮下。C组（n=3）是单纯珊瑚块直接埋植于皮下作为空白对照。2、4、6周行大体形态学和组织学检查,分析珊瑚孔隙中组织结构和血管新生情况,血管密度作定量统计学分析。结果:珊瑚侧槽、表层和深层间隙内均有一定程度的血管和纤维结缔组织新生,4周基本充满珊瑚大部分,6周血管化明显,贯穿大部分。组织学和定量分析显示血管通畅组较末端结扎组和空白对照组血管生成更明显,空白组主要是纤维组织增生。结论:两种血管束法也可以不同程度地诱导珊瑚血管化,血管通畅组效果最好,操作简单,可以作为构建血管化组织工程骨的一种方法。实验四纤维蛋白胶复合珊瑚促进动静脉环血管新生能力的研究目的:检测纤维蛋白胶复合珊瑚后能否促进AV环的血管生成,从而优化设计AV环模型。方法:同样将新西兰兔腘动脉和股静脉吻合成动静脉短路环。A组（n=15）是将AV环套入天然珊瑚块的侧槽后直接用ePTFE膜包裹隔绝,固定于腹股沟皮下。B组（n=15）是将AV环套入天然珊瑚块的侧槽后,血管环和珊瑚周边均匀喷涂纤维蛋白胶,再用ePTFE膜包裹隔绝,固定于腹股沟皮下。2、4、6周行标本的大体观察和墨汁灌注检查,墨汁灌注后珊瑚脱钙、HE染色、组织学观察,分析珊瑚孔隙中组织结构和血管新生情况,血管密度作定量统计学分析。结果:两组珊瑚植入体内后表面和深部均有大量纤维血管样组织生长。墨汁灌注显示血管广泛分布在珊瑚表层和间隙内,结构成熟,纤维蛋白胶组血管生成更明显,2周已贯穿珊瑚块的全层,胶体已基本吸收。2、4、6周血管密度逐渐加大,2周和4周时,B组较A组血管生成密度有统计学差别（P<0.05）,6周无明显差别。结论:纤维蛋白胶复合珊瑚后可能减少了对血管的刺激,早期可促进血管新生,比单纯珊瑚中血管新生能力更强,为优化AV环模型提供了一个途径。实验五动静脉环法和动静脉束法诱导珊瑚血管新生的机制研究目的:从形态学上探讨和分析AV环、AV束诱导珊瑚血管新生的机制。方法: A组（n=12）是将新西兰兔腘动脉和股静脉吻合成AV环,环绕套入天然珊瑚块的侧槽中并加ePTFE膜包裹隔绝。B组（n=12）是股动静脉血管束保持血流通畅,不切断,动静脉分开套入珊瑚块的两边侧槽中,外加ePTFE膜环绕包裹隔绝。4、8周行两组标本的珊瑚、血管内膜扫描电镜和血管铸型检查,同时取对侧正常股动静脉内膜作电镜为正常对照,血管铸型标本行大体解剖和腐蚀后血管分布等观察。了解血管与珊瑚的关系,血管内膜的变化,以及血管新生程度和来源。结果:扫描电镜结果显示A组血管化的珊瑚内部和表层有大量的血管结构,伴行在主干动静脉旁偏多,且相互交通,发育成熟;血管内膜凹凸不平,可见内陷发芽孔洞;B组珊瑚内血管明显偏少,主干血管旁也较多;血管内膜无明显变化,排列规则,与正常内膜形态接近。血管铸型显示A组血管环周边和珊瑚表层充满小血管;B组血管明显稀疏。腐蚀铸型显示A组血管环动静脉段芽生和伴行有丰富的小血管,在入口处形成网状结构,并相互吻合交通;B组主干动脉血管无发芽新生血管,仅有周边伴行的部分小血管长入。结论:进一步证实AV环方法和AV束方法均可以促进珊瑚的血管化,前者诱导血管新生的能力更强,两者血管生成的机制完全不同,AV环血管主要是通过血管发芽新生的方式,血管生长效率高,AV束血管主要是伴随性长入,可能是动脉生长的方式。实验六动静脉环法异位构建血管化组织工程珊瑚骨的初步研究目的:AV环加珊瑚复合骨形成蛋白（BMP）,异位构建出带血管蒂的组织工程珊瑚骨。方法: A组（n=6）同前方法形成兔左侧腘动脉和股静脉吻合的AV环,套入珊瑚块的侧槽中,用ePTFE膜包裹隔绝,关闭伤口,术后4周再解剖开ePTFE膜,珊瑚打孔,表面和中央加入含BMP的纤维蛋白胶,重新封闭固定。B组（n=6）:珊瑚中央打孔,表层和孔洞内加入含BMP的生物蛋白胶后直接埋置于大腿肌袋内,关闭伤口,作为对照组。所有标本4周和8周分别经平片和CT、墨汁灌注组织切片,HE染色和三色法等检查,观察珊瑚内成骨情况。结果:两组珊瑚均有一定程度的吸收,A组和B组的放射线检查示珊瑚块有不均匀的密度影,组织学显示A组4周组表层有一定程度的骨和软骨样组织形成,8周骨密度加大,结构更成熟,有的形成板层骨,中央也可见少量骨生成;对照B组组织学显示仅表层有少量骨和软骨样组织形成。结论:AV环珊瑚模型可能存在内生性血管化功能,加入骨诱导因子BMP可促进预血管化的珊瑚成骨,最终异位构建出带蒂组织工程骨。珊瑚的预血管化有一定意义,可作为构建血管化组织工程骨新方法。成骨的生理机制和过程需待进一步研究。纤维蛋白胶可以作为BMP的载体用于骨缺损修复。
二、增强组织工程支架:纤维蛋白胶稳定性的初步研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、增强组织工程支架:纤维蛋白胶稳定性的初步研究（论文提纲范文）
（1）聚合物基仿生医用胶黏剂的开发与应用（论文提纲范文）
| 1 聚合物基仿生医用胶黏剂的开发策略与黏合机理 |
| 1.1 生物仿生胶黏剂 |
| 1.1.1 纤维蛋白胶（fibrin glue,FG) |
| 1.1.2 转谷氨酰胺酶催化的胶黏剂 |
| 1.1.3 基于大鲵皮肤分泌物的组织黏合剂 |
| 1.1.4 活细菌胶黏剂 |
| 1.2 化学仿生胶黏剂 |
| 1.2.1 多酚类胶黏剂 |
| 1.2.2 沙堡蠕虫仿生胶黏剂 |
| 1.3 物理仿生胶黏剂 |
| 1.3.1 壁虎仿生胶黏剂 |
| 1.3.2 章鱼、吸盘鱼仿生胶黏剂 |
| 1.3.3 常春藤仿生胶黏剂 |
| 1.4 蛞蝓仿生等其他仿生胶黏剂 |
| 2 仿生胶黏剂的应用 |
| 2.1 软/硬组织再生修复 |
| 2.1.1 伤口黏合剂 |
| 2.1.2 止血剂 |
| 2.1.3 密封剂 |
| 2.1.4 硬组织胶黏剂 |
| 2.1.5 慢性伤口修复 |
| 2.1.6 其他组织再生修复 |
| 2.2 胶黏剂药物载体 |
| 2.3 医用胶黏剂在医疗美容中的应用初探 |
| 3 结论与展望 |
（2）功能化多孔复合材料的结构性能调控及在创伤救治中的应用研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写和符号清单 |
| 1 引言 |
| 2 文献综述 |
| 2.1 大出血救治及常用的止血材料 |
| 2.1.1 大出血救治背景 |
| 2.1.2 凝血系统 |
| 2.1.3 止血材料的研究进展 |
| 2.1.4 止血机理及止血性能的评价方法 |
| 2.2 皮肤创面修复及创面敷料的研究进展 |
| 2.2.1 创面愈合过程 |
| 2.2.2 皮肤创面愈合理论 |
| 2.2.3 皮肤创面修复材料 |
| 2.3 多孔材料及其在生物医学领域的应用 |
| 2.3.1 多孔材料简介 |
| 2.3.2 多孔材料的分类 |
| 2.3.3 多孔材料在生物医学领域的应用 |
| 2.4 课题的目的和意义及研究内容 |
| 2.4.1 课题来源 |
| 2.4.2 课题目的和意义 |
| 2.4.3 课题研究内容 |
| 3 生物因子锚定强化多孔材料的制备、表征及创伤止血性能的研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料及仪器 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 TCP多孔复合材料的制备 |
| 3.3.2 TCP的理化性能表征 |
| 3.3.3 TCP的生物相容性评价 |
| 3.3.4 TCP的体外凝血性能评价 |
| 3.3.5 TCP中凝血酶固化的稳定性测试 |
| 3.3.6 TCP的动物体内止血性能评价 |
| 3.3.7 TCP中凝血酶的长期稳定性测定 |
| 3.3.8 数据分析 |
| 3.4 实验结果分析 |
| 3.4.1 TCP化学结构表征 |
| 3.4.2 凝血酶在TCP上的分布及TCP微观结构的变化 |
| 3.4.3 TCP理化性能的研究 |
| 3.4.4 TCP生物相容性评价 |
| 3.4.5 TCP对血细胞的粘附 |
| 3.4.6 TCP对血栓动态形成的影响 |
| 3.4.7 TCP对凝血系统内、外源凝血途径的影响 |
| 3.4.8 TCP体外凝血性能评价 |
| 3.4.9 TCP中凝血酶的固化稳定性 |
| 3.4.10 TCP体内止血性能 |
| 3.4.11 TCP的止血机理及应用展望 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 双网络多机制多孔复合材料的制备、表征及创伤止血性能的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料及仪器 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 PACF多孔复合材料的制备 |
| 4.3.2 PACF的理化性能表征 |
| 4.3.3 PACF的生物相容性评价 |
| 4.3.4 PACF的体外凝血性能评价 |
| 4.3.5 PACF的动物体内止血性能评价 |
| 4.3.6 数据分析 |
| 4.4 实验结果分析 |
| 4.4.1 PACF的化学结构表征 |
| 4.4.2 PACF的微观形貌和表面结构性能分析 |
| 4.4.3 PACF力学性能分析 |
| 4.4.4 PACF吸液膨胀性能的研究 |
| 4.4.5 PACF细胞相容性评价 |
| 4.4.6 PACF对特征蛋白的吸附 |
| 4.4.7 PACF与血细胞的相互作用 |
| 4.4.8 PACF促血栓形成能力的研究 |
| 4.4.9 PACF对内、外源凝血途径的影响 |
| 4.4.10 PACF体外凝血时间 |
| 4.4.11 PACF体内止血性能 |
| 4.4.12 PACF止血机理的探讨和应用前景的展望 |
| 4.5 本章小结 |
| 5 纤维增强形状自适应多孔复合材料的制备、表征及创伤止血性能的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料及仪器 |
| 5.2.1 实验材料 |
| 5.2.2 实验仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 CMCP多孔复合材料的制备 |
| 5.3.2 CMCP的理化性能表征 |
| 5.3.3 CMCP的生物相容性评价 |
| 5.3.4 CMCP的体外凝血性能评价 |
| 5.3.5 CMCP的动物体内止血性能评价 |
| 5.3.6 统计分析 |
| 5.4 实验结果分析 |
| 5.4.1 CMC羧甲基取代度的测定 |
| 5.4.2 CMC的化学结构 |
| 5.4.3 CMC的宏观和微观形貌 |
| 5.4.4 不同取代度CMC的理化性能研究 |
| 5.4.5 CMCP微观形貌和表面性能 |
| 5.4.6 CMCP吸水性能 |
| 5.4.7 CMCP力学性能 |
| 5.4.8 CMCP自膨胀性能,动力膨胀力和抗冲力特性 |
| 5.4.9 CMCP细胞相容性和血液相容性 |
| 5.4.10 CMCP体外特征蛋白吸附以及对血细胞的粘附和激活 |
| 5.4.11 CMCP对血小板的刺激和活化 |
| 5.4.12 CMCP对血栓动态形成过程及凝血途径的影响 |
| 5.4.13 CMCP体外全血凝血的研究 |
| 5.4.14 CMCP体内止血性能 |
| 5.4.15 CMCP对伤口腔道及伤口周围组织的形状自适应能力 |
| 5.4.16 CMCP止血机理的探讨和应用前景的展望 |
| 5.5 本章小结 |
| 6 柔性超透明抗菌多孔复合膜的制备、表征及用于创面修复的研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验材料和仪器 |
| 6.2.1 实验材料 |
| 6.2.2 实验仪器 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 PBC和PHMB-PBC的制备 |
| 6.3.2 PHMB-PBC的理化性能表征 |
| 6.3.3 PHMB-PBC的氧气透过率、透光率和水蒸气透过率测试 |
| 6.3.4 PHMB-PBC的抗菌性能表征 |
| 6.3.5 PHMB的体外释放行为测试 |
| 6.3.6 PHMB与PHMB-PBC细胞相容性评价 |
| 6.3.7 PHMB-PBC的促创面愈合性能评价 |
| 6.3.8 数据分析 |
| 6.4 实验结果与分析 |
| 6.4.1 不同浓度PHMB的细胞毒性及PEG浓度的选择 |
| 6.4.2 PHMB-PBC化学结构 |
| 6.4.3 PHMB-PBC微观形貌与表面性能 |
| 6.4.4 PHMB-PBC力学性能 |
| 6.4.5 PHMB-PBC吸水和保水性能及组织贴附性 |
| 6.4.6 PHMB-PBC氧气透过率、透光率和水蒸气透过率 |
| 6.4.7 PHMB-PBC抗菌性能 |
| 6.4.8 PHMB-PBC体外PHMB释放行为和缓释抗菌作用 |
| 6.4.9 PHMB-PBC对细胞粘附和增殖的影响 |
| 6.4.10 PHMB-PBC促创面愈合的研究 |
| 6.5 本章小结 |
| 7 结论 |
| 本论文主要创新点 |
| 未来工作建议 |
| 参考文献 |
| 作者简历及在学研究成果 |
| 学位论文数据集 |
（3）脂肪干细胞在颅颌面骨再生中的作用与潜力（论文提纲范文）
| 0引言Introduction |
| 1 资料和方法Data and methods |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 纳入与排除标准 |
| 1.3 数据的提取 |
| 2 结果Results |
| 2.1 脂肪干细胞的生物学性能 |
| 2.2 miRNAs(microRNAs)对脂肪干细胞成骨分化的影响 |
| 2.3 提高脂肪干细胞成骨分化潜能的途径 |
| 2.3.1 与其他细胞共培养 |
| 2.3.2 与富血小板血浆联合应用 |
| 2.3.3 改性的钛金属增强脂肪干细胞成骨分化潜能 |
| 2.3.4 基因技术增强脂肪干细胞成骨分化潜能 |
| 2.3.5 增强脂肪干细胞成骨分化潜能的其他处理 |
| 2.4 脂肪干细胞复合可注射性支架在颅颌面骨再生中的应用 |
| 2.5 脂肪干细胞在颅颌面骨再生中的临床前研究 |
| 2.6 脂肪干细胞在颅颌面骨再生中的临床应用 |
| 3 讨论Discussion |
（4）不同配方明胶海绵/纤维蛋白胶支架对关节软骨碎块化后软骨细胞生物活性的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要英文缩略语索引 |
| 第1章 前言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 主要的实验试剂 |
| 2.1.3 取材耗材 |
| 2.1.4 组织培养耗材 |
| 2.1.5 主要的实验仪器设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 实验取材及其分组 |
| 2.2.2 实验用材料的制备 |
| 2.2.3 实验操作步骤 |
| 2.3 实验观察指标 |
| 2.3.1 碎块中软骨细胞迁出、增殖及新生组织的形成 |
| 2.3.2 番红O染色平均光密度值 |
| 2.3.3 Ⅱ型胶原免疫组化平均光密度值 |
| 2.3.4 软骨细胞的细胞表型 |
| 2.4 统计学分析 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 HE染色的组织学观察 |
| 3.2 软骨细胞的分布及细胞形态 |
| 3.3 番红-O-固绿染色的组织学观察及番红O染色平均光密度值 |
| 3.4 Ⅱ型胶原免疫组化平均光密度值 |
| 3.5 新生组织的鉴定 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 软骨碎块化的疗效 |
| 4.2 明胶海绵支架 |
| 4.3 纤维蛋白胶支架 |
| 4.4 细胞外基质的变化 |
| 4.5 本研究的缺陷 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的科研成果 |
| 致谢 |
（5）急救用抗菌止血材料的构建及止血机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 止血材料研究意义 |
| 1.2 止血材料研究现状 |
| 1.2.1 多聚糖类止血材料 |
| 1.2.2 无机类止血材料 |
| 1.2.3 生物制品止血材料 |
| 1.2.4 抗菌止血材料 |
| 1.3 止血机理研究现状 |
| 1.3.1 凝血系统 |
| 1.3.2 止血机理研究方法 |
| 1.4 论文设计思想 |
| 2 聚多巴胺/纳米二氧化硅抗菌止血材料的制备、性能及止血机理研究 |
| 2.1 实验部分 |
| 2.1.1 主要试剂及提纯方法 |
| 2.1.2 主要表征仪器 |
| 2.1.3 PDA/SiNP的合成 |
| 2.1.4 PDA/SiNP的表征 |
| 2.1.5 PDA/SiNP的止血性能测试 |
| 2.1.6 PDA/SiNP的抗菌性能测试 |
| 2.1.7 PDA/SiNP的止血机理测试 |
| 2.1.8 PDA/SiNP的生物相容性测试 |
| 2.1.9 统计方法 |
| 2.2 结果与讨论 |
| 2.2.1 PDA/SiNP的合成与表征 |
| 2.2.2 PDA/SiNP的止血性能 |
| 2.2.3 PDA/SiNP的抗菌性能 |
| 2.2.4 PDA/SiNP的止血机理 |
| 2.2.5 PDA/SiNP的生物相容性 |
| 2.3 本章小结 |
| 3 醛基葡聚糖海绵抗菌止血材料的制备、性能及止血机理研究 |
| 3.1 实验部分 |
| 3.1.1 主要试剂及提纯方法 |
| 3.1.2 主要表征仪器 |
| 3.1.3 DA海绵的合成与制备 |
| 3.1.4 DA的表征 |
| 3.1.5 DA海绵的止血性能测试 |
| 3.1.6 DA海绵的抗菌性能测试 |
| 3.1.7 DA海绵的促伤口愈合性能测试 |
| 3.1.8 DA海绵的止血机理测试 |
| 3.1.9 DA海绵的生物相容性测试 |
| 3.1.10 统计方法 |
| 3.2 结果与讨论 |
| 3.2.1 DA的合成与表征 |
| 3.2.2 DA海绵的形貌、孔隙度及压缩性能 |
| 3.2.3 DA海绵的止血性能 |
| 3.2.4 DA海绵的抗菌性能 |
| 3.2.5 DA海绵的促伤口愈合性能 |
| 3.2.6 DA海绵的止血机理 |
| 3.2.7 DA的生物相容性 |
| 3.3 本章小结 |
| 4 醛基葡聚糖/蒙脱土海绵抗菌止血材料的制备、性能及止血机理研究 |
| 4.1 实验部分 |
| 4.1.1 主要试剂及提纯方法 |
| 4.1.2 主要表征仪器 |
| 4.1.3 DAM海绵的合成 |
| 4.1.4 DAM海绵的表征 |
| 4.1.5 DAM海绵的止血性能测试 |
| 4.1.6 DAM海绵的抗菌性能测试 |
| 4.1.7 DAM的促伤口愈合性能测试 |
| 4.1.8 DAM海绵的止血机理测试 |
| 4.1.9 DAM海绵的生物相容性测试 |
| 4.1.10 统计方法 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 DAM海绵的合成与表征 |
| 4.2.2 DAM海绵的止血性能 |
| 4.2.3 DAM海绵的抗菌性能 |
| 4.2.4 DAM海绵的促伤口愈合性能 |
| 4.2.5 DAM海绵的止血机理 |
| 4.2.6 DAM海绵的生物相容性 |
| 4.3 本章小结 |
| 5 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间科研成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 缓释PDGF-BB的n-Nacre/PDLLA/FG复合支架的制备及表征 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 缓释PDGF-BB的n-Nacre/PDLLA/FG复合支架的细胞相容性研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 缓释PDGF-BB的n-Nacre/PDLLA/FG复合支架的体内生物相容性研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 缓释PDGF-BB的n-Nacre/PDLLA/FG复合支架修复临界性骨缺损的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的成果 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 学位论文统计学审查合格证书 |
| 致谢 |
（8）应用去分化脂肪细胞构建工程化脂肪组织的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 去分化脂肪细胞分化过程中相关基因的检测分析 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 DA体外Ad.EGFP荧光标记及观察标记物对细胞生物性状的影响 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 DA与Ⅰ型胶原蛋白、纤维蛋白胶支架生物相容性的体外实验研究 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第四部分 DA复合Ⅰ型胶原蛋白、可注射性纤维蛋白胶为支架构建组织工程脂肪的体内实验研究 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词对照表 |
| 攻读学位期间的成果 |
| 致谢 |
| 统计学证明 |
（9）纤维蛋白基纳米纤维的交联、表征及生物相容性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 组织工程与生物材料 |
| 1.2 组织工程支架 |
| 1.3 静电纺纤维蛋白纳米纤维 |
| 1.3 天然高分子材料交联改性 |
| 1.4 本文的研究内容与意义 |
| 1.5 本文的主要创新点 |
| 第二章 静电纺纤维蛋白纳米纤维的制备与表征 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.4 本章结论 |
| 第三章 静电纺纤维蛋白纳米纤维膜的交联改性 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.4 本章结论 |
| 第四章 基于纤维蛋白原复合纳米纤维的制备及表征 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.4 本章结论 |
| 第五章 基于纤维蛋白原复合纳米纤维的生物相容性评价 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.4 本章结论 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 主要结论 |
| 6.2 存在问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 攻读硕士学位期间科研及撰写、发表论文情况 |
| 致谢 |
（10）动静脉短路环法构建血管化组织工程骨的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 骨组织结构、血供特点和骨生成相关生长因子 |
| 第二部分 组织工程血管化的研究进展 |
| 正文 |
| 实验一 天然滨珊瑚无害化处理后形态学和抗压强度的变化 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 5 附图 |
| 实验二 动静脉短路环法和血管束法诱导珊瑚血管化能力的初步研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 5 附图 |
| 实验三 两种血管束法诱导珊瑚血管化能力的比较 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 5 附图 |
| 实验四 纤维蛋白胶复合珊瑚促进动静脉环血管新生能力的研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 5 附图 |
| 实验五 动静脉环法和动静脉束法诱导珊瑚血管新生的机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 5 附图 |
| 实验六 动静脉环法异位构建血管化组织工程珊瑚骨的初步研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 5 附图 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
四、增强组织工程支架:纤维蛋白胶稳定性的初步研究（论文参考文献）
- [1]聚合物基仿生医用胶黏剂的开发与应用[J]. 吴可可,赵益涛,吴敏,李越,胡志奇,卢智慧,郭金山. 功能高分子学报, 2021(02)
- [2]功能化多孔复合材料的结构性能调控及在创伤救治中的应用研究[D]. 王岩森. 北京科技大学, 2021
- [3]脂肪干细胞在颅颌面骨再生中的作用与潜力[J]. 陈菊芳,田玉楼,郝鑫. 中国组织工程研究, 2021(13)
- [4]不同配方明胶海绵/纤维蛋白胶支架对关节软骨碎块化后软骨细胞生物活性的影响[D]. 雷运亮. 南华大学, 2020(01)
- [5]急救用抗菌止血材料的构建及止血机理研究[D]. 柳春玉. 大连理工大学, 2020(01)
- [6]纤维蛋白胶在血管组织工程研究中的应用[J]. 刘国锋,杨大平,何志娟,李庆春. 中华生物医学工程杂志, 2012(05)
- [7]缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的实验研究[D]. 肖文德. 南方医科大学, 2012(04)
- [8]应用去分化脂肪细胞构建工程化脂肪组织的实验研究[D]. 廖云君. 南方医科大学, 2011(04)
- [9]纤维蛋白基纳米纤维的交联、表征及生物相容性研究[D]. 徐晓红. 东华大学, 2010(08)
- [10]动静脉短路环法构建血管化组织工程骨的实验研究[D]. 董青山. 第四军医大学, 2009(12)