一、生长因子促进再植肢侧枝循环的研究进展（论文文献综述）
周春泽[1]（2020）在《CD103+DCs在肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究》文中研究指明机体器官或组织遭受缺血、缺氧打击,在恢复血供氧供后不仅不能恢复该器官或组织的结构和功能,反而出现其结构和功能损伤加重的现象被称为缺血灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,IRI）。全身各个脏器均可发生IRI,其中肝脏IRI最为常见和严重,肝脏IRI的发生会造成肝功能损伤甚至肝衰竭,严重者出现全身多脏器功能障碍/衰竭,IRI亦会增加移植器官排斥几率,增加肿瘤复发转移机会,直接影响到疾病的预后,故进一步探寻肝脏IRI的发生机制及并据此制定更有针对性的防治措施将对未来肝脏手术及介入治疗的发展起到重要的作用。肝动脉栓塞（transcatheter arterial embolization,TAE）是中晚期肝癌、肝转移癌及部分肝良性肿瘤的常用治疗方法,TAE术后肝功能损伤甚至肝功能衰竭是术后最常见的并发症,但TAE是否会导致IRI的研究极少,TAE导致的肝损伤是否与IRI有关尚不明确。从理论上来说,在TAE术后其同样经历着组织器官缺血-血流恢复的过程,故同样可能出现IRI损伤,但TAE术后没有栓塞血管的立即再通过程,其病理生理过程不同于既往研究的IRI过程。故TAE术后是否存在IRI?其导致的IRI是否与肝功能损伤有关?这些问题都值得被重视及进一步研究。在肝脏IRI的病理过程中,固有免疫细胞如:树突状细胞、巨噬细胞、中性粒细胞都扮演了重要的角色。树突状细胞（dendritic cells,DCs）是目前已知的最重要的抗原递呈细胞,它是连接固有免疫和适应性免疫应答的重要桥梁。DCs存在于大多数的组织器官中,其中包括实质性脏器如肝脏、肾脏、肺脏等,国内外许多研究表明DCs在多种肝脏疾病中发挥了重要的作用。近期研究发现肝脏DCs同样在肝脏IRI的过程中扮演重要角色,但所得出的结论却存在差异性,究其原因可能与DCs群体的高度的异质性相关,对不同来源的DCs如局部定居或循环来源以及局部组织中分化为不同亚群的DCs如pDCs（plasmacytoid dendritic cells）、cDCs（classical dendritic cells）在疾病和各阶段的病程中所发挥的功能不尽相同。DCs可分为几类亚群,其中包括经典DCs、单核细胞来源的DCs和浆细胞样DCs。而经典DCs依据表面标志和功能的不同在非淋巴器官中可进一步分出CD103+DCs这一亚群。CD103+DCs定居于实质性脏器如肝脏、肾脏、肺脏等,数量比例均在局部定居的DCs总群体中占多数,并且既往很多研究指出其参与了多种疾病的病程,在机体的免疫应答中发挥了重要的作用,然而在肝脏IRI中有关CD103+DCs的研究却鲜有报道。因此明确CD103+DCs在肝脏IRI疾病中的变化及所发挥的功能是一个值得深入探讨的课题。在CD103+DCs亚群中具有一些独特的分子标记与组织中其他亚群的DCs细胞有所区分,如转录因子（Batf3、IRF8）和生长因子受体（FMS-like tyrosine kinase 3,Flt3）等。其中Flt3可通过磷酸化活化与其配体（Flt3 ligand,Flt3L）结合发挥作用,对DCs的分化、成熟起到重要的作用,并且相较其他亚群DCs,CD103+DCs的发育和成熟更加依赖Flt3,因此我们推测Flt3/Flt3L是一个可用来调控CD103+DCs功能的靶点。调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）是T淋巴细胞一个重要的亚群,在机体维持免疫稳态中发挥着关键的作用,很多研究中表明增加Treg的表达可以减轻炎症和损伤的程度。相继有研究报道CD103+DCs可诱导初始T细胞向Treg转化,进而发挥其保护性的免疫调节作用有利于疾病的缓解。然而目前通过CD103+DCs活化Treg细胞进而缓解疾病进展的研究多集中在自身免疫性疾病领域,而对于炎症性疾病的作用了解甚少。因此在以炎症为主要发病机制的肝脏IRI疾病中,CD103+DCs所扮演的角色,以及其作用机制都值得进一步去探究,以便明确是否有希望针对CD103+DCs进行靶向调节治疗肝脏IRI。目的1.动态监测肝癌栓塞手术前后SOD、MDA、IL-6、ALT、AST、LDH等与肝IRI相关的指标,分析缺血再灌注指标与肝功能之间的相关性,初步评估肝动脉栓塞术后是否存在IRI并探讨肝功能损伤与IRI相关性;2.通过检测肝脏IRI动物模型中再灌注不同时间点的肝脏组织损伤、肝脏功能、炎症细胞因子及肝脏组织中DCs及DCs亚群CD103+DCs的数量和比例,观察肝脏IRI病程与CD 103+DCs的相关性;3.通过给予流式分选小鼠的CD103+DCs,提前回输至模型小鼠体内,检测经过干预后肝脏功能、组织损伤、炎症细胞因子及CD103+DCs数量、比例的变化,探讨CD103+DCs在肝脏IRI疾病中发挥的作用;4.采用Flt3抑制剂、Flt3L及si-Flt3转染的不同方式在肝脏IRI小鼠模型中干预CD103+DCs上Flt3/Flt3L靶点的表达以调控CD103+DCs的功能。通过动物实验检测肝脏功能、组织损伤、炎症细胞因子、凋亡蛋白表达等指标,进而探讨通过Flt3/Flt3L调控CD103+DCs影响肝脏IRI病程的作用机制;5.采用Flt3抑制剂、Flt3L及si-Flt3体外干预CD103+DCs后与T细胞进行混合淋巴细胞培养,证实CD103+DCs对于Treg增殖、功能的影响;通过体外实验CD103+DCs对肝细胞缺氧复氧模型进行干预,检测肝细胞凋亡变化。探讨CD 103+DCs改善肝脏IRI疾病程度的作用机制。方法按照纳入及排除标准选取因肝癌接受肝动脉化疗栓塞术（TACE）的患者。分别于TACE术前、TACE术后1d、2d、3d早晨抽取患者外周静脉血标本,分别送检检测病人LDH及肝功能指标ALT、AST;氧化应激指标:MDA和SOD;炎性细胞因子水平:IL-6。比较各指标在不同时间点各项指标的变化并比较不同栓塞剂量下肝功能损伤指标、氧化应激指标、炎症指标的差异。SPF级雄性C57BL/6小鼠168只,体重20-25g,设立一期实验（动物模型构建）:对照组、假手术组、模型组（Oh、6h、12h、24h亚组）,二期实验:对照组、假手术组、阴性对照组（肝脏IRI模型）、PBS处理阴性对照组（PBS处理肝脏IRI模型）、干预组（过继转移CD103+DCs预处理组、Flt3抑制剂预处理组、Flt3抑制剂与过继转移CD103+DCs共处理组和Flt3L预处理组）,每组8只。常规清洁饲养,室温24℃左右,12小时明暗交替。采用无创血管夹阻断肝脏左叶和中叶的出入血管,使70%的肝脏缺血;假手术组仅分离小鼠肝动脉和门静脉,未予夹闭血管;对照组中小鼠无任何干预。干预组各组小鼠按实验方案予以预处理,除模型构建小鼠外,其余各组小鼠均予肝脏缺血6小时后处死取材,留取外周血标本采用ELISA检测肝脏功能,肝脏标本用作组织病理检测,-80℃冻存用作分子生物检测,其余肝脏标本用作流式细胞检测及分选。采用ELISA检测各组小鼠血清中肝脏功能（ALT、AST、LDH）的水平、炎症细胞因子TNF-α IL-1β、IL-6,Treg相关的细胞因子IL-10、TGF-β的含量,RT-qPCR检测ICAM-1、TNF-α、IL-1β的基因表达水平,WB检测IL-1β、ICAM-1炎症细胞因子的蛋白表达水平;HE染色观察小鼠肝脏病理损伤改变,TUNEL染色检测肝脏细胞凋亡程度;流式细胞仪检测肝脏组织中CD103+DCs和Treg细胞的数量和比例的数量、比例以及体外实验检测肝细胞凋亡比例。采用SPSS17.0统计软件包进行分析。计量资料先检验是否符合正态分布,符合者以均数±标准差（x±s）表示,两组数据之间比较采用t检验,三组及以上数据采用单向方差分析,方差齐用Bonferroni检验,方差不齐则用Tamhane检验,重复测量资料采用重复测量资料方差分析,不符合正态分布者采用非参数检验。校验水准α=0.05。采用Image J软件对免疫组化及免疫荧光结果进行统计。采用Graph pad 5.0对结果进行处理并作图。结果1.按照纳入标准及排除标准,纳入肝癌患者43例,其中男31例,女12例。TAE术后1d、2d、3d患者ALT、AST较术前明显升高,两者均在术后第2d升高最明显,LDH在术后亦明显升高,术后1d升高最为明显。TAE术后1d、2d、3d患者MDA及IL-6指标均较术前明显升高,且都在术后1d达到高峰,其后缓慢下降,但均高于术前水平（P<0.05）,SOD在术后第一天明显下降（P<0.05）,术后2-3d仍低于术前水平。以术后1d为例,在碘油>12ml组（n=17）,肝功能ALT、AST指标、IRI指标LDH、MDA及IL-6指标明显高于<12ml组（n=26）,而SOD明显低于<12ml组;2.肝脏IRI模型构建:观察给予肝脏缺血60min,再灌注Oh、6h、12h、24h各组小鼠模型的肝脏损伤显示:小鼠肝脏组织学损伤随着再灌注时间的延长逐渐升高,小鼠血清ALT、AST、LDH水平随着再灌注时间的延长逐渐升高,于再灌注12 h达到高峰,而后有所恢复。炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平在再灌注6h达到高峰,CD103+DCs在肝脏IRI模型中的变化与之呈负相关,再灌注6h后CD103+DCs 比例最低。3.给予肝脏IRI模型小鼠预先外源性回输CD103+DCs后,流式细胞仪检测肝脏组织中CD103+DCs的变化,发现肝脏组织中CD103+DCs的比例较IRI模型组明显升高,IRI组的CD103+DCs比例占总DCs的8.85%,而外源性回输组中比例为14.2%,肝脏损伤程度与IRI模型小鼠相比有明显改善,表现为过继转移CD103+DCs后:1)肝脏功能指标如:ALT、AST和LDH较模型小鼠明显降低;2)肝脏组织病理HE染色可见细胞水肿及炎性细胞浸润程度明显改善,肝脏损伤评分明显减低,TUNEL染色可见肝脏组织中细胞未见明显凋亡;3)肝脏组织凋亡相关的基因（Fas、Bax）和蛋白（Bcl-2）的表达降低。4.分别在建立肝脏缺血再灌注模型前给与Flt3抑制剂（MLN518）、CD103+DCs过继转移（DCs infusion）、MLN518 联合过继转移 CD103+DCs（MLN518+DCs infusion）和补充Flt3L处理,再灌注6小时后收集各组小鼠的肝脏组织标本。1)流式结果显示,与IRI组相比,MLN518组的肝脏组织中CD103+DCs比例显着降低,且具有统计学差异（P<0.05）;Flt3L组肝脏组织中CD103+DCs比例显着升高（P<0.05）;与 DCs infusion 组相比,MLN518+DCs infusion 组肝脏组织中CD103+DCs比例显着降低,且具有统计学差异（P<0.05）;2)肝脏功能及组织病理结果显示:与IRI组相比,Flt3L组ALT、AST和LDH水平及肝脏损伤评分都显着降低（P<0.05）,与CD103+DCs infusion组相比,MLN518+CD103+DCs infusion组ALT、AST和LDH水平及肝脏损伤评分都显着升高,且具有统计学差异（P<0.05）;3)肝脏组织凋亡相关检测显示:与IRI组相比,MLN518组肝脏组织中促凋亡基因Fas和Bax的表达显着升高,抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达显着降低（p<0.05）;Flt3组肝脏组织中促凋亡基因Fas和Bax的表达显着降低,抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达显着升高（p<0.05）;与DCs infusion组相比,MLN518+DCs infusion组肝脏组织中促凋亡基因Fas和Bax的表达显着升高,抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达显着降低（p<0.05）;4)RT-qPCR检测肝脏组织炎症因子表达显示与IRI组相比,MLN518组的肝脏组织中TNF-αIFN-γ、ICAM-1、IL-2mRNA 以及 IL-1β 蛋白表达显着增加（p<0.05）;Flt3 组肝脏组织中TNF-α、IFN-γ、ICAM-1、IL-2 mRNA以及IL-lβ蛋白表达显着降低（p<0.05）;与 DCs infusion 组相比,MLN518+DCs infusion 组肝脏组织中 TNF-α、IFN-γ、ICAM-1、IL-2mRNA 以及 IL-1β 蛋白表达显着增加（p<0.05）。5.在建立肝脏缺血再灌注模型前给与Flt3抑制剂（MLN518）、CD103+DCs过继转移（DC infusion）、MLN518 联合过继转移 CD103+DCs（MLN518+DCs infusion）和补充Flt3L不同处理,流式结果显示,与IRI组相比,MLN518组的外周血中Treg细胞比例显着降低,且具有统计学差异（P<0.05）。Flt3L组外周血中Treg细胞比例显着升高（P<0.05）,与DCs infusion组相比,MLN518+DCs infusion组外周血和肝脏组织中Treg细胞比例显着降低,且具有统计学差异（P<0.05）。在混合淋巴细胞反应实验中将CD4+T细胞与不同条件的 CD103+DCs（阴性对照组、si-Flt3+Flt3L 组、si-RNA+Flt3L 及 Flt3L 组）共培养后,检测Treg细胞在CD4+T细胞中的比例。结果显示:与PBS对照组相比,Flt3L组Treg细胞比例显着升高（P<0.01）,TGF-β和IL-10的基因表达水平显着升高;与Flt3L组相比Flt3L+si-Flt3组Treg细胞比例显着降低（P<0.01）,TGF-β和IL-10的基因表达水平显着降低（P<0.01）;而Flt3L组与Flt3L+si-RNA组之间无显着差异（P>0.05）。6.在缺氧复氧模型中,缺氧再给氧处理后肝细胞的凋亡率显着提高。将L02肝细胞系与不同处理后的CD103+DCs共培养（阴性对照组、si-Flt3+Flt3L组、si-RNA+Flt3L及Flt3L组）,与PBS对照组相比,Flt3L组肝细胞凋亡比例显着降低（P<0.01）。与Flt3L组相比Flt3L+si-Flt3组肝细胞凋亡比例显着升高（P<0.01）。而 Flt3L 组与 Flt3L+siRNA 组之间无显着差异（P>0.05）。结论1.肝癌TAE术后,被栓塞的肿瘤组织及正常肝组织可发生IRI,IRI的程度与肝损伤的程度存在相关性;肝损伤及IRI程度与被栓塞面积呈正相关;2.过继转移CD 103+DCs可减轻肝脏IRI模型小鼠肝脏损伤和炎症状态,改善肝脏功能。3.CD103+DCs在肝脏IRI模型中的肝脏保护作用是通过调控其表面Flt3/Flt3L靶点的表达来实现的。4.CD103+DCs可促进肝脏IRI模型中Treg的分化和增殖进而减轻肝脏IRI。
曾欢[2]（2020）在《穴位注射结合梅花针治疗周围性面瘫的临床研究》文中认为目的:本课题以鼠神经生长因子为切入点对穴位注射结合梅花针治疗周围性面瘫进行临床观察,探讨其对周围性面瘫的临床疗效,为临床治疗周围性面瘫提供一项新的选择。方法:本研究对象选取了从2019年1月至2019年12月期间至广州中医药大学第一附属医院针灸科门诊就诊,且确诊为周围性面瘫的66例患者。然后采用随机数表的方法,将他们分配至观察组和对照组,每组各33例,然后对他们进行临床疗效的观察。在治疗方面,两组均采用基础药物治疗,即口服两个疗程的甲钴胺片,在此基础上,对照组予梅花针治疗,观察组予鼠神经生长因子穴位注射结合梅花针治疗。观察组首先进行梅花针叩刺,选取穴位为阳白、攒竹、牵正、翳风。而后对其进行鼠神经生长因子穴位注射,选穴为颧髎、地仓、颊车、下关。应用鼠神经生长因子30ug加入注射用水2ml,每穴0.5ml。而对照组只采用梅花针叩刺,选穴、操作与观察组相同。穴位注射及梅花针叩刺均为每3天治疗1次。15天为1个疗程,共治疗2个疗程。治疗后记录观察组及对照组各自House-Brackmann症状评分、House-Brackmann分级评分,将其进行统计学分析。结果:1.治疗后,观察组和对照组的House-Brackmann症状评分、House-Brackmann分级评分较治疗前均有显着提高（P<0.05）。2.治疗后,观察组House-Brackmann症状评分差值、House-Brackmann分级评分差值均明显高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:鼠神经生长因子穴位注射结合梅花针与单纯梅花针对治疗周围性面瘫均能取得理想的疗效,然而前者优于后者。因此治疗周围性面瘫方面,鼠神经生长因子穴位注射结合梅花针这种方法值得临床推广运用。
陈爽[3]（2021）在《超短波通过对膝关节囊CTGF及TGF-β1表达的调控减轻兔伸直型膝关节挛缩的实验研究》文中研究指明目的应用超短波对兔伸直型膝关节挛缩模型进行干预,初步探讨超短波疗法对关节囊纤维化的治疗作用及其机制。方法将32只新西兰兔随机分为空白对照组（O组,不予特殊处理,自由活动12周后处死）、单纯固定组（P组,固定8周后处死）、自然恢复组（N组,固定8周后解除固定,自然恢复4周后处死）、超短波治疗组（M组,固定8周后解除固定,超短波治疗4周后处死）。固定方法为应用管型石膏对兔左膝关节于完全伸直位进行固定,范围为自腹股沟至近端足趾处。处死后使用关节活动度测量仪测量肌切开术后膝关节活动度,应用Masson染色检测膝关节后方关节囊胶原沉积情况,应用RT-PCR和Western Blot分别检测膝关节后方关节囊转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）的m RNA和蛋白表达情况。结果（1）与空白对照组相比,单纯固定组的肌切开术后膝关节活动度显着下降（P<0.05）,膝关节后方关节囊内胶原沉积、TGF-β1的m RNA和蛋白表达、CTGF的m RNA和蛋白表达显着升高（P<0.05）。（2）与单纯固定组相比,自然恢复组的肌切开术后膝关节活动度无明显差异（P>0.05）,膝关节后方关节囊内胶原沉积、TGF-β1的m RNA和蛋白表达显着下降（P<0.05）,CTGF的m RNA表达显着升高（P<0.05）,CTGF的蛋白表达无明显差异（P>0.05）;超短波治疗组的肌切开术后膝关节活动度显着升高（P<0.05）,膝关节后方关节囊内胶原沉积、TGF-β1的m RNA和蛋白表达显着下降（P<0.05）,CTGF的m RNA表达无明显差异（P>0.05）,CTGF的蛋白表达显着下降（P<0.05）。（3）与自然恢复组相比,超短波治疗组的肌切开术后膝关节活动度显着升高（P<0.05）,膝关节后方关节囊内胶原沉积、TGF-β1的m RNA和蛋白表达、CTGF的m RNA和蛋白表达显着下降（P<0.05）。结论（1）在兔伸直型膝关节挛缩模型固定期间,发生关节功能障碍和膝关节后方关节囊纤维化,8周的固定可导致兔的稳定关节挛缩。膝关节后方关节囊纤维化作为关节源性挛缩的重要原因之一,其可能与TGF-β1和CTGF的表达水平升高相关。（2）在兔伸直型膝关节挛缩模型恢复期间,关节功能障碍和膝关节后方关节囊纤维化均有着不同程度的恢复。（3）与自然恢复组相比,超短波可能通过降低关节囊内TGF-β1和CTGF表达,减轻膝关节后方关节囊纤维化,进而改善伸直型膝关节挛缩。（4）微热剂量的超短波介入对于兔膝关节挛缩的进展有抑制作用。但关于治疗的最佳剂量仍需进一步探讨。
吴超[4]（2019）在《SIK-2对脑缺血再灌注损伤的影响及机制研究》文中研究指明目的:明确SIK2在脑缺血再灌注损伤过程中的作用,阐明SIK2参与调控脑缺血再灌注损伤后血管再生的分子机制。方法:利用PSI血流灌注仪辅助建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,将实验大鼠分为Control组、缺血2h组、缺血再灌3h组、6h组、12h组、24h组、48h组,Q-PCR和Western-blot检测SIK2的表达量。腺病毒脑部立体定位注射构建SIK2过表达动物,实验动物分组为:Control、Control+hSIK2、MCAO、MCAO+hSIK2。TTC染色检测各组大鼠脑组织梗死情况;伊文思蓝染色观察各组大鼠脑组织水肿程度和血脑屏障损伤情况;免疫荧光标记CD31观察各组大鼠侧枝循环血管再生情况;Western-blot检测各组大鼠脑组织中SIK2、CREB、pCREB、VEGF蛋白质的表达情况。结果:1.PSI血流灌注仪辅助建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型及鉴定假手术组大鼠脑血流灌注图像可以清晰的观察到脑部血流灌注情况和血管分布,假手术组大鼠各项数据正常。MCAO组缺血2h,右侧大脑中动脉血流出现中断,中动脉供血区血流灌注量明显下降,差异有统计学意义（p<0.05）,恢复再灌24h后右侧大脑中动脉恢复血流灌注,但是仍然有部分供应区域的血流灌注量下降,无法恢复到正常水平（p<0.05）。TTC染色结果提示模型组大鼠右侧脑组织均存在明显的梗死灶,而假手术组正常。HE病理染色结果显示:假手术组脑组织结构正常,神经细胞形态规则,无明显异常。模型组大鼠缺血侧脑组织:可见皮质区和缺血半暗带区神经细胞变性、坏死、胶质纤维崩解、液化,缺血中心区淡染、呈筛网状,部分区域呈灶性坏死。2.SIK2表达水平在脑缺血再灌注损伤发生时的变化趋势Q-PCR结果显示,与Control组相比,缺血2h组大鼠SIK2的表达水平开始下降,但无统计学意义（P>0.05）,恢复再灌3h后SIK2的表达明显下降（P<0.05）,再灌6h后达到最低（P<0.01）,然后逐渐上升,再灌24h后逐渐接近正常水平。同时通过Western blot检测发现,与Control组相比,缺血2h大鼠SIK2的表达水平开始下降（P<0.05）,随着脑栓塞血管的再通,SIK2的表达水平呈下降趋势,恢复再灌6h后达到最低（P<0.01）,然后逐渐上升,再灌24h后逐渐接近正常水平。两种技术手段检测的结果基本一致。3.SIK2过表达重组腺病毒转染动物模型构建及鉴定Western blot结果显示:Ad-SIK2-siRNA组大鼠脑组织中SIK2的表达水平明显高于Control组（P<0.01）,而Ad-GFP大鼠脑组织中SIK2的表达水平与Control组相比无统计学意义（P>0.05）。4.SIK2表达水平变化对脑缺血再灌注损伤的影响脑组织TTC染色结果显示:Control组和Control+hSIK2组脑组织染色呈红色,无梗死灶;MCAO组和MCAO+hSIK2组脑组织有明显的白色梗死灶,且MCAO+hSIK2组大鼠脑组织梗死体积百分比（32.2±2.3）%明显大于MCAO组（28.0±3.1）%,两者相比具有统计学差异（P<0.05）。伊文思蓝（EB）染色结果显示:与Control组大鼠相比,MCAO组大鼠和MCAO+hSIK2组大鼠血脑屏障通透性显着升高（P<0.05）,且MCAO+hSIK2组大鼠血脑屏障通透性要高于MCAO组,两者相比具有统计学差异（P<0.05）。免疫荧光结果显示:与Control组相比,MCAO组缺血区血管增生明显增加（P<0.05）,而Control+hSIK2组无明显变化（P>0.05）;与MCAO组相比,MCAO+hSIK2组缺血区增生血管要低于MCAO组（P<0.05）。5.在脑缺血再灌注损伤中,SIK2调控侧枝血管再生的分子机制Western-blot检测大鼠脑组织中SIK2与CREB、pCREB以及VEGF之间的相关性,结果显示,与Control组相比,MCAO组大鼠脑组织中SIK2的表达水平显着下降（P<0.01）,而pCREB、和VEGF的表达水平则明显升高（P<0.01）,CREB的表达水平则无明显变化（P>0.05）。当Control+hSIK2组中SIK2的表达水平显着增高时（P<0.01）,而CREB、pCREB以及VEGF的表达水平无明显变化（P>0.05）;与MCAO组相比,MCAO+hSIK2组大鼠脑组织中SIK2的表达水平高于MCAO组（P<0.05）,而pCREB、和VEGF的表达水平表现为下降趋势（P<0.05）,CREB的表达水平则无明显变化（P>0.05）。结论:PeriCam PSI血流成像仪指导制备的MCAO大鼠模型具有很好的稳定性和可靠性。SIK2参与脑缺血再灌注损伤的发生发展,并随着疾病的进展SIK2的表达水平有明显变化趋势。大鼠脑组织SIK2的过表达可以加重脑组织缺血再灌注损伤。脑缺血再灌注损伤发生过程中,SIK2能够通过核转录因子CREB来调控下游靶基因VEGF的表达,SIK2表达水平与pCREB以及VEGF表达呈现负相关,从而影响侧枝血管再生。
常拓[5]（2016）在《扶芳藤对缺氧/复氧后人心内膜微血管内皮细胞的增殖作用及对VEGFR-2、VEGF的影响》文中提出目的:研究壮药扶芳藤对人心内膜微血管内皮细胞缺氧/复氧后的增殖作用的影响,以及对血清内的VEGFR-2、VEGF表达的影响。方法:取第3代人心内膜微血管内皮细胞（HUMCE）,分为非造模组（N）和造模组（Z）,其中造模组包括:扶芳藤组（F）、卡托普利1组[10-4μmol/L（Cap）]、卡托普利2组[10-3μmol/L（Cap）]、卡托普利3组[10-2μmol/L（Cap）];对照组（DZ）。对选取的造模组进行缺氧/复氧（H/R）处理后,添加相应的含药血清干预培养24h,非造模组不做缺氧/复氧处理。采用MTT比色法检测各组细胞吸光值及酶联反应吸附法（ELISA）检测其内VEGFR-2、VEGF的含量,研究扶芳藤对人心内膜微血管内皮细胞缺氧/复氧后的保护作用机制及扶芳藤对内皮细胞增殖作用的影响。结果:造模组的MTT值明显高于非造模组（P<0.05）,有统计学意义,表明缺氧/复氧后的人心内膜微血管内皮细胞增殖及再生现象明显下降;扶芳藤组细胞增殖水平高于对照组（P<0.05）,有统计学意义,表明扶芳藤组能够明显提高人心内膜微血管内皮细胞的增殖作用,有效抑制其凋亡;对照组较非造模组VEGFR-2、VEGF水平明显增高（P<0.05）,有统计学意义,表明缺氧/复氧状态能够明显提高血清内生长因子及其受体的水平;扶芳藤组、卡托普利组较非造模组VEGFR-2、VEGF水平均增高,较对照组水平低（P<0.05）,有统计学意义,扶芳藤组VEGFR-2、VEGF水平较卡托普利3组低,较卡托普利2组高（P<0.05）,有统计学意义;临床疗效观察显示观察组较对造组患者胸闷痛、心悸、气短、倦怠乏力、自汗等症状均下降（P<0.05）,有统计学意义,说明达到治疗效果。结论:（1）扶芳藤可以明显提高MIRI模型血清内VEGF、VEGFR-2的水平,促进心肌内皮细胞再生。（2）扶芳藤能够明显提高人心内膜微血管内皮细胞的增殖及贴壁作用,有效提高人心内膜微血管内皮细胞的增生水平。（3）扶芳藤可以在一定程度上控制人心内膜微血管内皮细胞的增殖水平,抑制人心内膜微血管内皮细胞过度增生,其调控水平可以介于卡托普利调控水平的一定区间范围内。
周庆[6]（2016）在《急性主动脉夹层根部、主动脉弓及降主动脉新型手术治疗方法的临床应用》文中指出本论文分为5个部分:（1）主动脉夹层的诊疗进展;（2）急性Stanford A型主动脉夹层应用主动脉弓开窗支架的临床结果;（3）Stanford A型主动脉夹层的根部处理策略;（4）不同主动脉弓和降主动脉手术方式对远端主动脉的影响;（5）新型血流调节器的临床应用。1.主动脉夹层的诊疗进展:介绍了主动脉夹层的流行病学、发病的高危因素、遗传学机制、预后相关因素和诊断相关的生物标志物。详细介绍了三种涉及主动脉弓术式（半弓置换术、部分主动脉弓置换术+降主动脉支架植入术和主动脉弓三分支支架植入术）的适应证、技术细节、近期结果、远期预后和优缺点。详细介绍了主动脉根部的手术方式,包括根部加固重建、胶水粘合和根部置换,描述各种术式的技术特点和临床应用效果。系统阐述了保留主动脉分支血管的腔内隔绝术,介绍了各种术式的适应证和优缺点。2.急性Stanford A型主动脉夹层应用主动脉弓开窗支架的临床结果:借鉴腔内隔绝术原位开窗支架的理念,根据国人主动脉夹层病人的主动脉弓解剖结构,设计了主动脉弓开窗支架。应用回顾性病例分析的方法观察主动脉弓开窗支架的临床应用效果,研究发现开窗支架植入简单、快捷,简化了主动脉弓及降主动脉修复手术,并达到封闭原发破口、扩大真腔、促进假腔闭合及重塑主动脉的目的,围术期死亡率和并发症发生率低,随访发现假腔闭合率高,无远期并发症发生,临床应用效果良好。3.Stanford A型主动脉夹层的根部处理策略:分析了多种主动脉根部处理方法的优缺点,提出了主动脉根部处理的理念,并设计了新的主动脉根部重建技术:涤纶片填充累及根部的夹层加固主动脉窦部,内膜垫衬带状涤纶片加固主动脉内膜,固定主动脉瓣撕脱的交界矫治瓣膜关闭不全。应用回顾性病例分析法,初步总结这种改良根部重建方法的近中期疗效。研究提示改良根部重建方法主动脉根部保留比例高,围术期死亡率和并发症发生率与同类研究类似,术后主动脉瓣反流程度减轻,主动脉窦直径缩小。随访期间,无主动脉根部病变相关的死亡病例。随访期间共有7例病人新发主动脉根部事件（主动脉瓣反流程度≥2和/或主动脉窦部直径≥45mm）,其中1例病人在首次术后1年因重度主动脉瓣关闭不全、主动脉窦部直径50mm接受二次Bentall手术,其余病人予以继续随访。研究结果显示这种改良根部重建方法简单、可靠,近期结果良好。4.不同主动脉弓和降主动脉手术方式对远端主动脉的影响:采用回顾性病例分析法,通过比较远端主动脉假腔状态和整体主动脉直径,明确CronusR术中支架、三分支支架和开窗支架对主动脉弓和降主动脉的修复效果,并研究不同直径的支架对远端主动脉假腔闭合率的影响。研究发现,CronusR术中支架、三分支支架和主动脉弓开窗支架植入术这三种主动脉弓及近端降主动脉修复术具有相似的远端主动脉假腔闭合率,远期效果良好。同样类型的支架,直径较大的支架植入后远端主动脉假腔闭合率更高,最佳直径选择应是术前测量主动脉直径的90-100%。5.新型血流调节器的临床应用:分析了多种保留主动脉分支血管的腔内隔绝术的适应证、优缺点,借鉴了多层裸支架的设计理念和多层裸支架植入后血流动力学改变的特点,设计了一种新型的血流调节器。这种血流调节器为自膨式覆膜支撑型人工血管,覆膜为涤纶制成,涤纶径线和纬线形成1mm2的网孔,金属支架为镍钛合金。本组实验为临床验证研究,在主动脉分支血管应用这种新型血流调节器,观察血流调节器对主动脉夹层假腔和/或真性动脉瘤的隔绝效果以及分支血管近期通畅率。该研究入组14例病人,封闭分支血管22根（不包括肋间动脉）。随访期间,分支血管通畅率95.5%,无截瘫发生,主动脉夹层假腔和/或真性动脉瘤隔绝率84.6%。血流调节器植入技术简单,可安全的应用于需要保留主动脉分支血管的腔内隔绝术,主动脉夹层内膜破口和动脉瘤腔封闭率高。
邝容[7]（2015）在《纳米纤维多孔微球支架材料在牙髓牙本质组织再生中的应用研究》文中进行了进一步梳理龋病、牙髓病是人类常见的口腔疾病,发病率高,危害大。目前的治疗方法主要是彻底去除病变组织,严密消毒,利用银汞、复合树脂、牙胶等合成的牙科材料充填组织缺损处,达到修复病变组织的目的。然而,此类材料只能充填缺损,恢复一定的牙齿形貌,并不完全具备牙髓牙本质组织的生理功能,往往造成牙齿活性降低甚至丧失、变色、脆性增加;长此以往,患者的咀嚼与消化功能也会受到影响,甚至影响心理发展和社交活动。组织工程技术的出现为牙本质牙髓组织修复提供了新的契机,通过种子细胞、生长因子和支架材料的联合应用,有望再生具有功能的牙髓牙本质组织。支架材料在组织工程再生中起着关键的作用,不仅是种子细胞的载体,还是种子细胞的生存微环境,为目标组织的形成构建平台。对于再生仅通过狭小根尖孔与外界相通的牙髓牙本质复合体来说,支架材料的设计与选择显得尤为重要。理想的支架材料首先应该能够将细胞输送至不规则的、微小的组织缺损处,并且应当能够为细胞生长、黏附提供良好微环境,引导细胞分化形成新生组织。在前期研究中我们应用相分离技术构建出具有多孔结构和良好机械性能的纳米左旋聚乳酸（nf-plla）支架材料,已成功证实了其促进牙髓干细胞向成牙本质细胞分化的作用。基于口腔临床的应用目标,可注射式材料更复合临床应用的需求,因此我们研发了星状聚乳酸高分子共聚物,并以此为原材料合成了可注射式纳米纤维多孔微球支架材料（nf-sms）,在本研究中我们将人牙髓干细胞（hdpscs）接种于nf-sms支架材料上,检测nf-sms对hdpscs向成牙本质细胞分化的作用;并进一步尝试将nf-plla与nf-sms联合应用,复合hdpscs构建实验性牙髓牙本质复合体;此外,我们还为hdpscs三维培养自制了低氧装置,检测了低氧预处理对nf-sms上的hdpscs成血管能力的影响,在裸大鼠磨牙牙髓原位修复模型中获得了有一定形态和功能的牙本质牙髓样组织,为进一步摸索nf-sms在牙髓牙本质再生的临床应用潜能,提供了有意义的研究基础。所取得的研究成果如下:1.nf-sms促进hdpscs向成牙本质细胞分化和矿化的实验研究本实验通过测试hdpscs在nf-sms微环境中的黏附、增殖、分化,摸索应用nf-sms的恰当接种比例,检测hdpscs在nf-sms上向成牙本质细胞分化的能力。实验结果表明:hdpscs在nf-sms微环境中生长良好,较s-ms和nf-ms环境增殖快,矿化能力强,碱性磷酸酶（alp）活性、新生组织钙含量以及牙本质矿化相关基因表达明显上调,免疫缺陷鼠皮下注射结果显示了矿化组织形成,且牙本质涎磷蛋白（dspp）表达阳性,进一步证明了nf-sms促进hdpscs向成牙本质细胞分化的作用,提示nf-sms具有牙本质牙髓组织工程临床应用的前景。2.实验性人工牙髓牙本质复合体的研究本实验通过nf-plla支架材料接种细胞诱导矿化或者负载bmp-7缓释微球,尝试构建牙本质样组织,模拟牙髓再生的外周环境,进而诱导接种于nf-sms上的hdpscs分化形成牙髓,最终二者联合形成实验性牙髓牙本质复合体。实验结果表明:单独的牙本质样结构可以通过细胞接种nf-plla支架或者负载bmp-7缓释微球获得,hdpscs在nf-sms上复合后皮下注射获得血管生长丰富的组织,具有形成牙髓样结构的潜质,但二者机械结合并未获得具有生物活性的牙髓牙本质样结构,提示我们需要进一步探索构建牙髓样组织的微环境。3.低氧预处理与nf-sms联合应用于牙髓组织工程的实验研究本实验建立了一套细胞三维培养的低氧处理装置,通过比较不同结构的微球支架材料对低氧环境的敏感性,筛选促进hdpscs上调表达血管生长因子（vegf）的材料与表达VEGF的模式,通过检测自制低氧装置与市售低氧仓的细胞反应,确定低氧作用的效果;在筛选出的微球材料中进一步观察低氧诱导因子（HIF-1）和VEGF的表达关系与时间表达模式,筛选低氧预处理的条件,再通过皮下注射模型、皮下移植牙模型和裸大鼠原位牙髓再生模型进一步求证低氧预处理促进hDPSCs在NF-SMS微环境中形成牙髓样组织的可能性。实验结果显示:与纳米无孔微球、实体光滑微球相比,纳米多孔微球上接种的细胞对低氧敏感性高,hDPSCs在低氧环境下于NF-SMS上表达HIF-1和VEGF,时间早,增幅大,持续数日,NF-SMS是理想的低氧预处理细胞载体;皮下注射低氧预处理后的hDPSCs与NF-SMS混合物,可以看到低氧预处理组比常氧预处理组新生血管更丰富;皮下移植牙模型显示,牙髓腔内新生组织血管丰富,并且在牙本质内壁检测到DSPP表达;裸大鼠原位牙髓修复模型显示NF-SMS可以深入根管并降解,为新生组织让出了空间,新生组织血管丰富,在根管壁有DSPP表达。这些结果提示低氧预处理能够促进hDPSCs在NF-SMS微环境中分化新生牙髓样组织。
李刚[8]（2015）在《基于“祛瘀生新”治则应用活血化瘀药物干预显微外科术后组织修复的实验及临床研究》文中研究指明实验研究部分第一部分祛瘀生新治则指导下复元活血汤方对大鼠离断股动脉显微吻合术后模型“血-脉-物”级联新生的实验研究目的：探讨“祛瘀生新”治则治法理论及其代表方药复元活血汤在显微外科血管损伤修复术后治疗中的指导意义,评估其对血管损伤术后“血、脉、物”级联新生的有效性干预,挖掘该治则在本领域的内涵与外延。方法：96只SD大鼠随机分为四组,制备大鼠股动脉离断吻合修复术模型,分别采取生理盐水、复元活血汤方、低分子右旋糖酐合罂粟碱、低右罂粟碱与复元活血汤方联合应用进行术后干预,24小时、3天、7天、15天时进行相应指标观测。从“瘀祛”后“生新血、脉、物”三角度评定术后组织新生修复疗效。应用四个时间点血流变、血清6-Keto-PGF10、TXB2含量测定评价血流状态的改变即“生新血”情况；通过实时荧光定量PCR检测血管组织中VEGF、Flk-1、A ng-1、Tiel mRNA,血管组织标本在光镜下形态学观察及扫描、透射电镜下细胞超微结构改变的观测,对血管修复新生即“生新脉”药物干预后结果进行评定;借助靶向肌肉组织匀浆SOD活力、MDA含量的测定评价肌肉组织及其微循环结构中相应的状态变化,即“生新物”级联新生情况。综合上述三方面对组织修复新生进行系统总结,从理论上解析“祛瘀生新”治则在显微外科的含义。结果：显微外科血管修复术后复元活血汤干预组大鼠血流变、血清6-Ket o-PGF10、TXB2含量方面与抗凝解痉西药对照组疗效相当,均显着优于空白对照组（p<0.05）,且“生新血”部分指标较西药组更为优异。复元活血汤组或中西药联用组在大鼠血管组织中VEGF. Flk-1、Ang-1、Tiel mRNA表达即“生新脉”方面整体显着优于两对照组（p<0.05）,血管组织标本在光镜下形态学观察及扫描、透射电镜下细胞超微结构改变的观测方面也较对照组为优,联合用药组提示对于早期形态学及超微结构改变方面较单纯应用中药为优,电镜定量观测提示存在统计学差异（p<0.05）,后期无统计学意义（p>0.05）；各时段靶向肌肉组织SOD活力、MDA含量应用中药与对照组比较均存在统计学意义（p<0.05）。综合评定中药组疗效优于对照组,即“祛瘀生新”治则治法理论及其代表方药复元活血汤在大鼠显微外科血管吻合术后各级组织新生方面有正向干预作用,其在显微外科术后进一步疗效作用及该理论的治疗指导意义可通过临床研究进行更为深入的探讨。第二部分祛瘀生新治则指导下复元活血汤方干预大鼠坐骨神经吻合术后血-脉-物级联新生及神经修复的实验研究目的：探讨“祛瘀生新”治则治法理论及其代表方药复元活血汤在显微外科周围神经损伤修复术后治疗中的指导意义,评估其对周围神经损伤术后“血、脉、物”级联新生及神经修复的有效性干预,同时挖掘该治则在本领域的内涵与外延。方法：120只SD大鼠随机分为四组,制备大鼠坐骨神经离断吻合修复术模型,分别采取生理盐水、复元活血汤方、甲钴胺进行术后灌胃给药干预,1周、4周、8周、12周时进行相应指标观测,从“瘀祛”后“生新血、脉、物”三角度评定术后组织新生修复疗效。通过相应时间点血清EPO,组织CD34、VEGF蛋白表达等方面,验证复元活血汤对显微外科术后血、脉新生的促进作用,即“祛瘀生新”法在周围神经术后微循环血管新生与改善神经再生环境的作用；借助荧光金逆行示踪,BDNF、Par-3、PO. S100等神经新生相关因子mRNA测定,NGF、胶原蛋白含量评估,再生神经光镜、电镜观测联合电生理、行为学分析和瘢痕评定等指标,探讨复元活血汤在“生新血、脉”基础上加速体内神经新生修复的作用；同时通过靶向肌肉形态、组织学变化分析该理论与周围神经损伤术后血管新生、神经再生、靶向肌肉新生“血-脉-物”级联新生的关联。结果：显微外科周围神经损伤修复术后复元活血汤干预组大鼠相应时段E PO、VEGF、CD34蛋白表达均显着优于两对照组（p<0.05）,即“血、脉新生”指标为最优。复元活血汤组在荧光金逆行示踪,BDNF、Par-3, PO, S100mRNA表达测定方面与甲钴胺组疗效相当（p>0.05）,均显着优于空白对照组（p<0.05）,且在神经电生理、行为学分析等部分时段指标测定结果较甲钴胺组更为优异（p<0.05）。NGF、胶原蛋白含量评估,瘢痕评定三头肌湿质量等指标观测结果均提示各组间比较存在统计学差异（p<0.05）,应用中药各时段与对照两组比较疗效均相对更优。综合评定复元活血汤中药组疗效优于生理盐水对照组,与甲钴胺组相当,即“祛瘀生新”治则治法理论及其代表方药复元活血汤在大鼠显微外科周围神经修复术后各级组织新生方面有正向干预作用,其在显微外科术后进一步疗效作用及该理论的治疗指导意义可通过临床研究进行更为深入的探讨。临床研究部分第一部分祛瘀生新治则指导下辨证应用复元活血汤方干预断指再植术后成活及功能恢复的临床研究目的：客观评价“祛瘀生新”治则治法理论及其代表方药复元活血汤在显微外科断指再植手术后治疗的指导意义,探讨其“血、脉、物”级联新生与断指再植术后早期成活、后期功能等方面的治疗作用,进一步从临床中揭示该治则在显微外科领域的内涵与外延。方法：将60例急诊行断指再植手术患者随机分为治疗组与对照组,每组30例患者。完善各项相关检查并行再植手术后,两组在早期抗凝解痉药物基础上,治疗组患者全程口服复元活血汤作为术后核心治疗内容。通过早期各时段血流变、凝血四项测定及成活等级,综合评定早期成活情况。通过术后不同时间点随访,从X线检查、微循环指标观测及功能等级量化评分,对两组患者术后功能恢复情况进行对比研究,评定验证“祛瘀生新”理论指导下复元活血汤方通过“血、脉、物”级联新生对于断指再植术后各阶段的治疗效果。借助断指再植临床试验研究进一步分析“祛瘀生新”治则在本领域的概念内涵。结果：术后复元活血汤治疗组早期各时段血流变、凝血四项指标、成活等级评定方面均显着优于对照组（p<0.05）,即应用中药在早期“血、脉”新生基础上对再植手指成活各方面疗效更为优异。治疗组在术后随访X线观察、微循环指标观测及功能等级量化评分方面均显着优于对照组（p<0.05）,即应用中药在后期“脉、物”级联新生基础上,对再植手指成活后各相关组织修复新生及功能改善方面疗效均较对照组为优。综合评定“祛瘀生新”治则治法理论及其代表方药复元活血汤对临床中显微外科断指再植术后各级组织新生疗效方面有正向干预意义。第二部分祛瘀生新治则指导下辨证应用复元活血汤方干预胫骨皮瓣游离移植术后成活及功能恢复的临床研究目的：客观评价“祛瘀生新”治则治法理论及其代表方药复元活血汤,在显微外科复合组织瓣移植术后治疗中的指导意义,探讨其“血、脉、物”级联新生与复合组织瓣移植术后早期成活、后期功能、各组织再生等方面的治疗作用,深层次揭示该治则在显微外科领域的内涵与外延。方法：将40例拟行胫骨皮瓣游离移植手术患者随机分为治疗组与对照组,每组20例患者。完善各项相关检查并行游离移植手术后,两组在早期抗凝解痉药物基础上,治疗组患者全程口服复元活血汤作为术后核心治疗内容。通过早期各时段血流变、凝血四项测定、组织瓣成活状态等级、供区植皮成活、血循等情况综合评定早期复合组织瓣成活及供区修复愈合情况。通过术后随访供受区骨质X线检查计量平分,双侧肢体血循、肌力、局部愈合情况,组织瓣血循、感觉、微循环定量指标观测及相应等级量化评分,对两组患者术后供受区组织修复新生情况进行对比研究。评定验证“祛瘀生新”理论指导下复元活血汤方通过“血、脉、物”级联新生对于胫骨皮瓣游离移植术后各阶段的治疗效果。借助胫骨皮瓣游离移植临床试验进一步分析“祛瘀生新”治则在本领域的概念内涵。结果：术后复元活血汤治疗组早期各时段血流变、凝血四项测定、皮瓣成活状态等级、供区植皮成活、血循等情况大部分计量指标均优于对照组（p<0.05）,即应用中药在早期组织新生基础上对游离组织瓣成活方面、供区修复愈合方面疗效更为优异。治疗组在术后随访供受区骨质X线检查计量平分,双侧肢体血循、肌力、局部愈合情况,组织瓣血循、感觉、微循环等定量指标或等级量化评分指标方面大部分均显着优于对照组（p<0.05）。即应用中药在后期“血、脉、物”级联新生基础上,对游离胫骨皮瓣移植术供受区各相关组织修复新生及功能改善方面疗效较对照组为优。综合评定“祛瘀生新”治则治法理论及其代表方药复元活血汤,对临床中显微外科组织瓣游离移植术后各级组织新生疗效方面有正向干预意义。
韩操,李忠义,王正东,颜南,韩晓锐,朱世龙[9]（2015）在《PD-L1促进大鼠断尾再植成活及可能机制》文中研究说明目的研究程序性死亡受体-1（PD-L1）对断尾再植成活的影响,探讨可能的机制。方法建立大鼠断尾再植模型,随机选取40只断尾再植模型成功大鼠,分为两组:PD-L1组（术后立即环手术切口浸润注射重组大鼠PD-L1蛋白生理盐水溶液）和生理盐水组（术后立即环手术切口浸润注射生理盐水0.1ml）,另取10只正常大鼠作为对照。ELISA检测手术前后各个时间点的血清样本中PD-L1水平,应用重组大鼠PD-L1蛋白干预断尾再植大鼠的断尾成活,评价术后断尾发生血管危象请况,Western blot法检测断尾再植大鼠尾组织中血管内皮生长因子（VEGF）、CD34蛋白表达水平。结果术后PD-L1水平显着增高（<0.05）,至术后48 h时达最高值,之后开始降低,至术后7d接近术前水平。经重组大鼠PD-L1蛋白干预的大鼠断尾血液循环较好,血管危象发生几率显着低于生理盐水预处理组。与正常大鼠相比,PD-L1蛋白干预组、生理盐水干预组断尾再植鼠尾组织中VEGF、CD34蛋白表达水平均显着增高（<0.05）,与生理盐水干预组相比,PD-L1蛋白干预组术后48h鼠尾组织中VEGF、CD34蛋白表达均显着增高（<0.05）,术后12d鼠尾组织中仅见VEGF蛋白表达显着增高（<0.05）。结论 PD-L1促进断尾再植成活可能与上调VEGF及CD34表达相关。
邰沁文[10]（2013）在《自体肝移植的临床和相关实验研究》文中进行了进一步梳理目的：1)探讨离体全肝切除和自体肝移植术（Ex-vivo liver resection and autotransplantation, ELRA）治疗晚期肝脏泡球蚴病（Alveolar echinococcosis, AE）的适应症,可行性,安全性和有效性；评价三维重建影像评估系统与个体化虚拟手术的临床意义；初步探讨ELRA术后移植物增生的规律；评价ELRA术经济和社会效益；2)建立Wistar大鼠极限肝切除模型,评价极限肝切除术后的肝再生和存活率；3)建立Wistar大鼠慢性肝损伤模型,探讨骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cell, BMSCs）和慢性肝纤维化肝再生修复的关系及可能机制；4)探讨TLR3通路与BMSCs在慢性肝纤维化中的相互作用和与肝纤维化肝再生修复的可能机制。方法：第一部分：1)总结2010年8月至2013年08月按纳入标准实施的10例ELRA术治疗晚期肝AE患者的临床资料,分析临床资料,探讨临床适应症；2)通过术前CT与三维肝脏重建软件测量数据和手术探查所见与移植物实际质量结果分析,分析个体化虚拟手术设计的准确性和可行性。3)通过患者术中情况、并发症和住院总费用等临床资料,分析手术可行性和安全性。4)术后CT随访1,3和6月移植肝体积（GV）和受体标准肝体积（SLV）比,结合术后PET/CT检查结果,分析半年内肝脏增生变化。第二部分：对Wistar大鼠分别行70%、80%、90%肝体积极限切除,统计术后各组大鼠的存活率,并检测外周血清中ALT及AST浓度,对比术后14天存活大鼠肝脏质量。HE染色观察三组肝脏组织形态学变化。第三部分：取雄性大鼠股骨和胫骨骨髓,提取、分离培养、纯化、扩增BMSCs,使用光学显微镜观察BMSCs的形态,用免疫组织化学（IHC）检测BMSCs表面CD31、CD45、CD44、CD105、CDllb、CD29的表达阳性率。用二乙基亚硝胺（DEN）配成0.01%浓度饮用水供雌性大鼠饮用16周换正常水,建立慢性肝损伤模型,第4、8、12、16周经尾静脉输注1×106个BMSCs,并设置单纯造模组及空白对照组；20周核磁共振（MRI）检查大鼠肝脏；21周处死大鼠,HE染色观察肝脏组织形态变化：原位杂交技术检测大鼠肝脏SrY表达；VG染色观察肝脏中胶原纤维量；IHC检测α-SMA、LR3; Western-blotting检测肝脏α-SMA、 TLR3、TRIF、NF-kBp65、IRF3表达,FQ-RT-PCR检测TLR3、IRF3mRNA表达。结果：第一部分：1)10例移植物均存活,符合纳入标准时手术安全性较高。2)术中探查与移植物体积和术前CT与肝脏三维重建结果一致,10例患者GV/SLV在41%-78%之间,平均60.6%,其中9例患者虚拟切除移植物体积695.11±142.14cm3,实际余肝脏体积687.78±130.81cm3（P>0.05）；3)术中1例经脐静脉低温灌注外,余9例经门静脉灌注；2例无肝期下腔静脉未重建,3例行自体下腔静脉重建,5例人造血管暂时性门腔分流；手术11.5～20.5h,平均15.2h,无肝期200-435min,中位时间285.5min,术中输注红细胞悬液0～15u,术后住院时间21～58d,总并发症发生率6例（60%）；住院总费用10.16～43.48万元,中位费用17.44万元；4)CT测术后第1月移植物体积平均增加14.75%；术后2～3月平均每月增加3.75%；术后4～6月平均每月增加3.08%；术后半年移植物/标准肝体积比平均87.5%；PET/CT测18氟-脱氧葡萄糖（18F-FDG）的平均标准摄取率（SUVave）0.9～1.9;随访时间2～37个月,1例术后6个月死亡,最长存活时间27个月。第二部分：1)大鼠肝切术后6h开始出现死亡,术后8-12h为死亡高峰,70%、80%、90%肝体积切除组2周存活率分别为86.7%、80%、7%。2)80%及90%肝体积切除组术后8h、12h时血清ALT、AST浓度比70%组显着增高（P<0.05）,而80%与90%组之间无差异（P>0.05）；80%组术后24h、3天时血清ALT及AST浓度比70%肝体积切除组高（P<0.05）；术后7天左右各组ALT及AST浓度基本恢复正常。3)术后14天80%组剩余肝体积明显大于70%肝体积切除组（P<0.05）。4)三组肝脏组织形态无明显异常。第三部分：1)P3代BMSCs细胞表面的CD31、CD45、CD44、CD105、CDllb、CD29的阳性率分别为（12.0%、8%、1.2%、62.2%、1.5%、16.7%）；2)原位杂交技术检测示仅有BMSCs移植组表达SrY。3)核磁共振结果示BMSCs移植组肝脏上结节数量比单纯造模组多（P<0.05）；4)HE染色显示单纯造模组8只轻度肝纤维化形成；BMSC移植组中9只形成明显的肝纤维化,1只形成肝癌；空白对照组无肝纤维化形成。5)免疫组化显示BMSCs移植组比单纯造模组α-SMA阳性表达率高（P<0.05）；空白对照组无表达。TLR3主要表达于肝细胞包浆中；6)VG染色BMSCs移植组胶原区的百分比数比单纯造模组高（P<0.05）。7)western blotting结果显示BMSCs移植组比单纯造模组α-SMA蛋白水平高（P<0.05）,BMSCs移植组肝脏中TLR3、 NF-kBp65、IRF3蛋白水平及TLR3、IRF3mRNA表达比空白对照组和单纯造模组都高（P均<0.05）,单纯造模组稍高于空白对照组（P<0.05）；而TRIF蛋白表达水平在三组间无明显差异（P>0.05）。结论：1)对于外科原位手术切除极为困难或侵及下腔静脉无法切除的晚期肝AE可以通过ELRA术治疗,适应症为本研究纳入标准；CT和三维肝脏重建软件能够在术前准确评估肝脏病灶与主要管道关系,评价病灶侵犯程度和预测移植物体积,提高手术安全性；在无肝期个体化处理进行自体或人造血管腔静脉暂时性门体分流技术,下腔静脉重建技术和离体肝切除血管重建技术等综合应用安全、有效；术后移植肝再生主要发生在移植术后半年内,尤其是术后第1个月,术后2～6月逐渐放缓,半年后基本接近患者标准肝体积；ELRA术治疗晚期肝AE有良好的经济社会效益和独特的应用前景,有助于在国内外推广应用；2)大鼠肝切除量在80%以下是安全的,提示对于正常成人极限肝切体积有可能超越70%；且肝脏切除量越大,其增生体积越多；3)BMSCs在DEN所致的慢性肝损伤模型中具有促进肝纤维化的作用,并有致肝癌的可能；4)TLR3通路上的相关蛋白可能参与了慢性肝损伤肝再生修复过程,BMSCs在TLR3通路激活的微环境中可能倾向于分化为肝星状细胞、肌成纤维细胞,TLR3与BMSCs之间相互影响,并相互作用于对方,最终导致慢性肝损伤后肝纤维化形成。
二、生长因子促进再植肢侧枝循环的研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、生长因子促进再植肢侧枝循环的研究进展（论文提纲范文）
（1）CD103+DCs在肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言及综述 |
| 参考文献 |
| 第一部分 肝动脉栓塞术后缺血再灌注损伤的初步观察性研究 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 小鼠肝脏缺血再灌注模型的建立 |
| 前言 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 CD103+DGS减轻肝缺血再灌注损伤 |
| 前言 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 CD103+DCS降低肝缺血再灌注损伤的机制研究 |
| 前言 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 研究局限性 |
| 参考文献 |
| 附表及附图 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 学位论文评阅及答辩情况 |
| 英文论文1 |
| 英文论文2 |
（2）穴位注射结合梅花针治疗周围性面瘫的临床研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 中医对周围性面瘫的研究概况 |
| 一、中医学对周围性面瘫的病因认识 |
| 二、中医学中对周围性面瘫病机的认识 |
| 三、中医学对周围性面瘫的治疗 |
| 第二节 现代医学对周围性面瘫的研究概况 |
| 一、现代医学对周围性面瘫病因病机的认识 |
| 二、周围性面瘫的病变位置及临床症状 |
| 三、鉴别诊断 |
| 四、周围性面瘫分期 |
| 五、现代医学对周围性面瘫的治疗 |
| 第二章 临床研究 |
| 第一节 病例收集 |
| 一、研究对象 |
| 二、诊断标准 |
| 第二节 研究内容 |
| 一、样本量估算 |
| 二、病例分组 |
| 三、治疗方案 |
| 四、注意事项 |
| 五、不良反应及处理 |
| 第三节 疗效观察 |
| 一、观察指标 |
| 二、疗效评定标准 |
| 三、评价时点 |
| 四、统计分析与数据处理 |
| 第三章 临床研究结果与统计分析 |
| 第一节 基本情况对比 |
| 一、两组患者性别比较 |
| 二、两组患者年龄比较 |
| 三、两组患者病程比较 |
| 第二节 治疗前指标对比 |
| 一、治疗前House-Brackmann症状评分对比 |
| 二、治疗前House-Brackmann分级评分对比 |
| 第三节 治疗后指标对比 |
| 一、治疗前后观察组House-Brackmann症状评分对比 |
| 二、治疗前后对照组House-Brackmann症状评分对比 |
| 三、治疗前后两组House-Brackmann症状评分差值的比较 |
| 四、治疗前后观察组House-Brackmann分级评分对比 |
| 五、治疗前后对照组House-Brackmann分级评分对比 |
| 六、治疗前后两组House-Brackmann分级评分差值的比较 |
| 七、总体疗效对比 |
| 八、不良反应情况对比 |
| 第四节 讨论 |
| 一、鼠神经因子穴位注射治疗周围性面瘫的理论基础 |
| 二、梅花针治疗周围性面瘫的理论基础 |
| 三、选穴依据 |
| 四、统计结果分析 |
| 五、不足与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（3）超短波通过对膝关节囊CTGF及TGF-β1表达的调控减轻兔伸直型膝关节挛缩的实验研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表(Abbreviation) |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 关节挛缩中关节囊纤维化的发生机制研究进展 |
| 参考文献 |
（4）SIK-2对脑缺血再灌注损伤的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究材料（资料、内容）与方法 |
| 1 研究材料 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 实验材料 |
| 1.2.1 主要试剂 |
| 1.2.2 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 利用PSI血流灌注仪建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型[19] |
| 2.2 PSI实时监测MCAO模型 |
| 2.3 脑组织TTC染色计算脑梗死体积 |
| 2.4 HE染色观察脑组织病理学改变 |
| 2.5 SIK2 过表达重组腺病毒转染动物构建及鉴定 |
| 2.6 Q-PCR检测SIK2 m RNA的表达量 |
| 2.7 免疫荧光标记新生血管 |
| 2.7.1 脑组织灌注固定 |
| 2.7.2 免疫荧光标记CD31 |
| 2.8 Western blot检测SIK2、CREB以及VEGF蛋白表达情 |
| 2.9 伊文思蓝(EB)检测血脑屏障(BBB)通透性 |
| 3.统计学处理 |
| 结果 |
| 1 PSI脑血流灌注成像仪监测结果 |
| 2 各组脑组织TTC染色及梗死体积测定 |
| 3 MCAO大鼠脑组织病理学改变 |
| 4 SIK2 表达水平在脑缺血再灌注损伤发生时的变化趋势 |
| 5 SIK2 过表达大鼠模型的构建及鉴定 |
| 6 SIK2 过表达对大鼠脑梗死体积影响 |
| 7 SIK2 过表达对大鼠血脑屏障的影响 |
| 8 SIK2 过表达对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管再生的影响 |
| 9 在脑缺血再灌注损伤中SIK2 调控血管再生的机制 |
| 讨论 |
| 1 脑缺血再灌注损伤动物模型的鉴定与评价 |
| 2 SIK2 与脑缺血再灌注损伤之间的相关性 |
| 3 脑缺血再灌注损伤与血管再生之间的相关性 |
| 展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 脑缺血再灌注损伤临床治疗的病理生理机制以及最新的研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 |
| 致谢 |
（5）扶芳藤对缺氧/复氧后人心内膜微血管内皮细胞的增殖作用及对VEGFR-2、VEGF的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 现代医学对心肌缺血再灌注损伤的认识 |
| 1 心肌缺血再灌注损伤的发生机制 |
| 1.1 基本认识 |
| 1.2 心肌缺血再灌注损伤的发生机制 |
| 1.2.1 氧自由基作用 |
| 1.2.2 钙超载 |
| 1.2.3 粒细胞浸润作用 |
| 1.2.4 ATP作用 |
| 1.2.5 细胞凋亡作用 |
| 1.2.6 其他作用 |
| 2 现代医学对缺血再灌注损伤的治疗 |
| 3 小结 |
| 第二节 祖国传统医学对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的认识 |
| 1 祖国传统中医、壮医学对MIRI病因病机的认识 |
| 1.1 心悸的病因病机 |
| 1.2 胸痹的病因病机 |
| 1.3 喘证的病因病机 |
| 2 心肌缺血再灌注损伤的中医药治疗原则 |
| 2.1 活血行气 |
| 2.2 益气化瘀 |
| 2.3 驱除邪淫 |
| 2.4 调理阴阳 |
| 2.5 辨病论治，随证加减 |
| 3 小结 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 实验材料与仪器 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 建立缺氧/复氧后人心内膜微血管内皮细胞所需主要材料 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要材料 |
| 第二节 实验方法 |
| 1 造模方法 |
| 1.1 HUMCE传代培养与实验分组 |
| 1.2 建立心内皮细胞缺氧/复氧模型 |
| 2 药物及制备方法 |
| 2.1 扶芳藤药液制备 |
| 2.1.1 扶芳藤提取工艺（醇提、水提比较实验） |
| 2.1.2 扶芳藤药液配置步骤 |
| 2.2 卡托普利制备 |
| 3 药液及血清准备 |
| 3.1 实验许可及实验动物分组 |
| 3.2 给药 |
| 3.3 扶芳藤剂量选择预实验 |
| 3.3.1 实验依据 |
| 3.3.2 剂量分组 |
| 3.3.3 提取方法 |
| 3.3.4 检测结果 |
| 3.3.5 结论 |
| 4 含药血清制备 |
| 5 标本采集 |
| 6 细胞实验步骤 |
| 第三节 实验结果 |
| 1 MTT增殖实验结果 |
| 2 ELISA法检测VEGFR-2、VEGF含量 |
| 3 统计处理 |
| 4 结果 |
| 第三章 讨论 |
| 1 VEGF、VEGFR对MIRI的作用 |
| 2 对扶芳藤治疗MIRI的认识及讨论 |
| 第四章 结论与评价 |
| 1 结论 |
| 2 评价 |
| 2.1 研究成果 |
| 2.2 课题创新点 |
| 2.3 不足之处 |
| 2.4 展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 综述 活血化瘀方药对血管内皮生长因子及其受体影响的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间的科研成果 |
（6）急性主动脉夹层根部、主动脉弓及降主动脉新型手术治疗方法的临床应用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 绪论 |
| 一、急性主动脉夹层的诊疗进展 |
| 二、主动脉弓部的手术方式 |
| 三、主动脉根部的手术方式 |
| 四、涉及主动脉分支血管的TEVAR手术 |
| 参考文献 |
| 第二章 急性Stanford A型主动脉夹层应用主动脉弓开窗支架的临床结果 |
| 1 引言 |
| 2 主动脉弓开窗支架的设计 |
| 3 资料与方法 |
| 4 结果 |
| 5 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 Stanford A型主动脉夹层的根部处理策略 |
| 1 引言 |
| 2 资料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 不同主动脉弓和降主动脉手术方式对远端主动脉的影响 |
| 1 引言 |
| 2 资料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 新型血流调节器的临床应用 |
| 1 引言 |
| 2 资料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）纳米纤维多孔微球支架材料在牙髓牙本质组织再生中的应用研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 NF-SMS支架材料促进HDPSCS向成牙本质细胞分化和矿化的实验研究 |
| 实验一 NF-SMS支架材料的制备及其与h DPSCs相容性的实验研究 |
| 实验二 NF-SMS支架材料对h DPSCs成牙本质细胞分化作用的体外实验研究 |
| 实验三 NF-SMS支架材料对h DPSCs成牙分化作用的动物体内实验研究 |
| 第二部分 NF-PLLA支架与NF-SMS支架材料联合构建实验性牙髓牙本质复合体 |
| 实验一 盘状NF-PLLA支架的制作与细胞接种诱导 |
| 实验二 微球载BMP7缓释纳米支架环的制作 |
| 实验三 NF-PLLA支架与NF-SMS支架材料联合构建实验性牙髓牙本质复合体的动物体内实验 |
| 第三部分 低氧预处理与NF-SMS支架材料对HDPSCS成牙髓样组织的联合作用 |
| 实验一 低氧三维培养体系的建立 |
| 实验二 低氧三维培养体系中h DPSCs在微球材料上血管新生能力比较 |
| 实验三 低氧预处理后h DPSCs在NF-SMS支架材料上血管新生能力的动物体内实验研究 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（8）基于“祛瘀生新”治则应用活血化瘀药物干预显微外科术后组织修复的实验及临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 中英文缩写一览表 |
| 引言 |
| 实验研究 |
| 实验研究第一部分 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验仪器及设备 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 1.4 实验药品 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 动物模型制备 |
| 2.3 干预药物制备 |
| 2.4 给药剂量及方法 |
| 2.5 观测指标及方法 |
| 2.5.1 一般情况观察 |
| 2.5.2 吻合血管手术显微镜下观察 |
| 2.5.3 吻合血管光镜观察 |
| 2.5.4 吻合血管透射及扫描电镜观察 |
| 2.5.5 血管组织中VEGF、Flk-1、Ang-1、Tiel mRNA表达 |
| 2.5.6 肌肉组织匀浆中SOD活力、MDA含量测定 |
| 2.5.7 血液流变标本的采集检测和分析 |
| 2.5.8 血清TXB_2,6-keto-PGF1_α含量测定 |
| 2.6 统计学方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 一般情况观察结果 |
| 3.2 吻合血管手术显微镜下观察结果 |
| 3.3 血液流变学的检测结果 |
| 3.4 血清TXB_2和6-keto-PGF1_α测定结果 |
| 3.5 光镜观察结果 |
| 3.6 电镜观察结果 |
| 3.6.1 各组透射电镜观察结果 |
| 3.6.2 各组扫描电镜观察结果 |
| 3.7 组织中VEGF、Flk-1、Ang-1、Tiel mRNA表达结果 |
| 3.8 肌肉组织中SOD活力测定结果 |
| 3.9 肌肉组织中MDA含量测定结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 瘀”概念的阐述与中西医比较理解 |
| 4.2 血管结构及显微外科血管修复与“瘀”关联性的探讨 |
| 4.3 “祛瘀生新”理论源流与含义浅析 |
| 4.4 各学科中医家对祛瘀生新治则应用的启迪及显微外科领域“生新”内涵的再理解 |
| 4.5 本次实验所选观测指标依据及意义 |
| 实验研究第二部分 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验仪器及设备 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 1.4 实验药品 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 动物模型制备 |
| 2.3 干预药物制备 |
| 2.4 给药剂量及方法 |
| 2.5 观测指标及方法 |
| 2.5.1 一般情况观察 |
| 2.5.2 坐骨神经功能指数SFI检测 |
| 2.5.3 神经电生理检测 |
| 2.5.4 神经手术显微镜下观察瘢痕分析 |
| 2.5.5 血清标本的采集制备及EPO的检测分析 |
| 2.5.6 吻合神经光镜观察 |
| 2.5.7 吻合神经组织透射电镜观察 |
| 2.5.8 NGF、CD34、VEGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原检测 |
| 2.5.9 Par-3、BDNF、S100、PO mRNA表达实时荧光定量PCR检测 |
| 2.5.10 荧光金逆行示踪观测 |
| 2.5.11 靶向肌肉湿质量及恢复率测定计算 |
| 2.5.12 靶向肌肉形态学观察及萎缩程度测算 |
| 2.5.13 靶向肌肉ATP酶组织化学染色观察 |
| 2.6 统计学方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 一般情况观察结果 |
| 3.2 血清标本EPO的检测结果 |
| 3.3 CD34、VEGF蛋白表达检测结果 |
| 3.4 吻合神经手术显微镜下观察及瘢痕分析结果 |
| 3.5 坐骨神经SFI检测结果 |
| 3.6 神经电生理检测结果 |
| 3.7 NGF,Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白测定结果 |
| 3.8 Par-3、BDNF、S100、PO mRNA结果 |
| 3.9 神经组织光镜观察结果 |
| 3.10 神经组织透射电镜镜观察结果 |
| 3.11 荧光金逆行示踪观测结果 |
| 3.12 靶向肌肉湿质量恢复率结果 |
| 3.13 靶向肌肉形态学观察测定结果 |
| 3.14 靶向肌肉ATP酶染色观察结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 周围神经解剖概述及本次模型修复方式选择的依据 |
| 4.2 现代医学对神经损伤病理过程的认识及其与血供的关联探讨 |
| 4.3 周围神经修复术后的治疗内容及应用中药干预的优势 |
| 4.4 本次实验模型设计及所观测指标的依据及意义 |
| 4.5 论“痿”及祛瘀生新理论对“独取阳明”的进一步解读 |
| 4.6 现代医学治疗神经损伤与中医学“祛瘀生新”理论的汇通 |
| 临床研究 |
| 临床研究第一部分 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 手术治疗适应证标准 |
| 1.4 纳入病例标准 |
| 1.5 排除病例标准 |
| 1.6 脱落、剔出、中止试验标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 病例随机分组 |
| 2.2 两组受试对象一般资料 |
| 2.3 对照方法及盲法设计 |
| 2.4 药物选择 |
| 2.5 手术及用药治疗方法 |
| 2.6 试验要求及随访 |
| 3 研究内容 |
| 3.1 入组与完成试验情况 |
| 3.2 一般信息资料 |
| 3.3 效应性指标及观测方法 |
| 3.3.1 早期成活情况观察 |
| 3.3.2 后期恢复情况观察 |
| 3.4 安全性观察 |
| 4 统计学方法 |
| 5 结果与分析 |
| 5.1 入组及完成情况分析结果 |
| 5.2 一般信息资料基线均衡性分析结果 |
| 5.3 效应性指标分析结果 |
| 5.3.1 早期成活情况观察结果 |
| 5.3.2 后期恢复情况观察结果 |
| 5.4 安全性评价 |
| 6 讨论 |
| 6.1 “瘀血”的类型与显微外科的关联性讨论 |
| 6.2 二论“祛瘀生新”及“祛瘀”内涵的再思考 |
| 6.3 断指再植术概述与中医药在本领域研究的新问题 |
| 6.4 “祛瘀生新”理论研究与本次断指再植模型的关联性 |
| 临床研究第二部分 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 手术治疗适应证标准 |
| 1.4 纳入病例标准 |
| 1.5 排除病例标准 |
| 1.6 脱落、剔出、中止试验标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 病例随机分组 |
| 2.2 两组受试对象一般资料 |
| 2.3 对照方法及盲法设计 |
| 2.4 药物选择 |
| 2.5 手术及用药治疗方法 |
| 2.6 试验要求及随访 |
| 3 研究内容 |
| 3.1 入组与完成试验情况 |
| 3.2 一般信息资料 |
| 3.3 效应性指标及观测方法 |
| 3.3.1 早期组织瓣瓣成活情况观察 |
| 3.3.2 早期供区恢复情况观察 |
| 3.3.3 后期组织瓣恢复情况观察 |
| 3.3.4 后期供区恢复情况观察 |
| 3.4 安全性观察 |
| 4 统计学方法 |
| 5 结果与分析 |
| 5.1 入组及完成情况分析结果 |
| 5.2 一般信息资料基线均衡性分析结果 |
| 5.3 效应性指标分析结果 |
| 5.3.1 早期组织瓣瓣成活情况评价结果 |
| 5.3.2 早期供区恢复情况观察结果 |
| 5.3.3 后期组织瓣修复情况观察结果 |
| 5.3.4 后期供区修复情况观察结果 |
| 5.4 安全性评价 |
| 6 讨论 |
| 6.1 组织缺损显微外科治疗与“洛阳骨皮瓣”技术应用简述 |
| 6.2 伤科中西汇通医家论述“祛瘀生新”对骨皮瓣移植治疗的启示 |
| 6.3 保证胫骨皮瓣成活与加速其新生的相关治疗及研究重点 |
| 6.4 胫骨皮瓣作为祛瘀生新理论在显微外科研究中模型的必然性 |
| 6.5 复元活血汤作为祛瘀生新理论代表方药在显微外科研究中的意义 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1 临床试验研究第一部分病例观察表(节选) |
| 2 临床试验研究第二部分病例观察表(节选) |
| 3 综述 |
| 参考文献 |
| 4 个人简介 |
（10）自体肝移植的临床和相关实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 自体肝移植治疗晚期肝泡型包虫病临床研究 |
| 1. 资料和方法 |
| 1.1 临床资料 |
| 1.2 纳入标准和排除标准 |
| 1.3 手术前准备与评估 |
| 1.4 移植手术步骤 |
| 1.5 围移植期指标和临床路径探讨 |
| 1.6 病例随访 |
| 1.7 统计分析方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 第二部分 肝切除与再生的大鼠实验观察 |
| 1. 内容和方法 |
| 1.1 实验动物和分组 |
| 1.2 主要试剂和仪器 |
| 1.3 大鼠肝部分切除 |
| 1.4 术后观察指标 |
| 2 统计学方法 |
| 3. 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三部分 慢性肝损伤与再生修复的大鼠实验研究 |
| 实验一 骨髓间充质干细胞在慢性肝损伤与再生修复中的作用 |
| 1. 内容和方法 |
| 1.1 实验动物的选择与分组 |
| 1.2 主要试剂及仪器 |
| 1.3 骨髓间充质干细胞的的提取、分离培养、纯化、扩增 |
| 1.4 骨髓间充质干细胞的鉴定 |
| 1.5 肝损伤动物模型的建立 |
| 1.6 大鼠肝脏的影像学检查 |
| 1.7 标本采集与处理 |
| 1.8 大鼠肝脏HE染色 |
| 1.9 原位杂交检测大鼠肝脏SrY阳性细胞表达 |
| 1.10 大鼠肝脏α-SMA免疫组织化学的检测 |
| 1.11 VG染色检测大鼠肝纤维化情况 |
| 1.12 Western blot检测大鼠肝脏α-SMA表达水平 |
| 1.13 统计学分析方法 |
| 1.14 结果判定方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 实验二 TLR3通路在慢性肝损伤与再生修复中的作用 |
| 1. 内容和方法 |
| 1.1 实验动物的选择与分组 |
| 1.2 主要试剂及仪器 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 免疫组织化学检测大鼠肝脏TLR3的表达 |
| 1.3.2 Western Blotting法检测大鼠肝脏细胞TLR3、NF-Kapa65、IRF3、TRIF的蛋白水平 |
| 1.3.3 FQ-RT-PCR检肝脏组织TLR3、IRF3、mRNA表达 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
四、生长因子促进再植肢侧枝循环的研究进展（论文参考文献）
- [1]CD103+DCs在肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究[D]. 周春泽. 山东大学, 2020(11)
- [2]穴位注射结合梅花针治疗周围性面瘫的临床研究[D]. 曾欢. 广州中医药大学, 2020(06)
- [3]超短波通过对膝关节囊CTGF及TGF-β1表达的调控减轻兔伸直型膝关节挛缩的实验研究[D]. 陈爽. 安徽医科大学, 2021(01)
- [4]SIK-2对脑缺血再灌注损伤的影响及机制研究[D]. 吴超. 皖南医学院, 2019(12)
- [5]扶芳藤对缺氧/复氧后人心内膜微血管内皮细胞的增殖作用及对VEGFR-2、VEGF的影响[D]. 常拓. 广西中医药大学, 2016(05)
- [6]急性主动脉夹层根部、主动脉弓及降主动脉新型手术治疗方法的临床应用[D]. 周庆. 南京大学, 2016(05)
- [7]纳米纤维多孔微球支架材料在牙髓牙本质组织再生中的应用研究[D]. 邝容. 第四军医大学, 2015(03)
- [8]基于“祛瘀生新”治则应用活血化瘀药物干预显微外科术后组织修复的实验及临床研究[D]. 李刚. 湖南中医药大学, 2015(08)
- [9]PD-L1促进大鼠断尾再植成活及可能机制[J]. 韩操,李忠义,王正东,颜南,韩晓锐,朱世龙. 解剖科学进展, 2015(02)
- [10]自体肝移植的临床和相关实验研究[D]. 邰沁文. 新疆医科大学, 2013(02)