一、200例无精子症患者的染色体核型分析（论文文献综述）
王宁馨,张绪柘,雷皓,龙克鸿[1]（2021）在《功能近红外光谱技术测量短时心率变异性的准确性评估》文中指出目的评估利用功能近红外光谱（fNIRS）测量短时心率变异性（HRV）的准确性。方法纳入2020年10月-2021年9月武汉大学及其周边高校的16名在校学生作为被试志愿者。利用心电图（ECG）与fNIRS同步测量被试志愿者在静息状态下的短时HRV;评估fNIRS在头部与手指处所测结果的一致性;以心电图结果为金标准,评估fNIRS测量结果的准确性。结果 fNIRS在头部与手指处所测得的短时HRV参数[交感神经指数（SNS指数）、副交感神经指数（PNS指数）、压力指数、RR间期的平均值（Mean RR）、RR间期的标准差（SDNN）、RR间期直方图的底宽（TINN）、近似熵（ApEn）、样本熵（SampEn）]差异均无统计学意义;除衡量时间序列复杂度的熵参数ApEn（P<0.05）和SampEn（P<0.01）外,fNIRS所测得的短时HRV参数（PNS指数、SNS指数、压力指数、Mean RR、SDNN、TINN）与ECG金标准间差异也无统计学意义。结论利用fNIRS数据测量短时HRV具有可行性和良好的准确性。
靳化,赵勇,钟建容,沈梦尘,陈蕾[2]（2021）在《550例男性不育症患者染色体核型和Y染色体微缺失情况分析》文中进行了进一步梳理目的分析男性不育症患者的染色体核型及Y染色体微缺失情况。方法回顾性分析2018年9月-2020年12月于解放军总医院第六医学中心生殖中心就诊的550例男性不育症患者的临床检验资料,其中无精子症187例,少精子症363例（极严重90例、严重101例、轻中度172例）。同时纳入健康男性246名作为对照。对所有男性进行染色体核型及Y染色体微缺失检测分析精子浓度与染色体核型、Y染色体微缺失的关系。对其中156例无精子症、70例极严重少精子症、75例严重少精子症及75例正常男性进行性激素（促黄体生成素、卵泡刺激素、催乳素、睾酮）检测,进而比较不同精子浓度及有无Y染色体微缺失人群的性激素水平。结果 550例男性不育症患者及246名健康男性中共有62例染色体核型异常或染色体正常多态性,其中染色体异常28例,染色体正常多态性34例。550例不育症患者中共检出Y染色体微缺失38例,其中无精子症17例、极严重少精子症18例、严重少精子症2例、轻中度少精子症1例,AZFc区缺失为最常见类型。无精子症、极严重少精子症及严重少精子症患者中,Y染色体微缺失者的卵泡刺激素水平高于无Y染色体微缺失者（P=0.032）。结论男性不育症患者可发生染色体异常,且Y染色体微缺失发生率较高;遗传学检查有助于明确是否患有遗传学疾病,从而选择合适的治疗方法及辅助生殖方式。
姜雨婷[3]（2021）在《非梗阻性无精子症临床遗传学分析及全外显子组测序低频突变关联研究》文中指出研究背景全球不孕不育发病率约为10～15%,其中男性因素约占30～50%。导致男性不育的病因包括内分泌因素、遗传因素、睾丸创伤、隐睾、精索静脉曲张、泌尿生殖系统感染、医源性损伤、代谢性疾病等,而遗传因素的影响较为严重。男性不育中最严重的疾病类型是非梗阻性无精子症（nonobstructive azoospermia,NOA）,表现为睾丸生精障碍。携带遗传因素异常的NOA患者进行药物、手术等治疗干预效果并不显着。由于NOA是由多因素引起的复杂疾病,临床表型具有高度异质性,使其遗传学诊断困难且复杂。染色体异常是NOA重要的遗传学病因,核型分析是染色体检查的常规方法,但仅能明确一部分NOA患者的诊断（如克氏综合征）,不同种类的染色体异常在NOA患者中的检出率、对应临床表型及机制尚不清楚。Y染色体AZF（Azoospermia factor）微缺失是目前仅次于克氏综合征的NOA患者主要遗传学病因。AZF微缺失目前主要采用序列标签位点（Sequence-tagged site,STS）-PCR法。但由于选定的STS位点有限,仅能检出一部分的AZF微缺失,无法对AZF区其他变异进行检测,导致一部分AZF区变异被漏检。除了染色体异常和AZF微缺失,仍有60～80%的NOA患者无法找到病因,最终被定义为特发性NOA,其中很大一部分是由未知的遗传因素引起的。明确诊断NOA患者的遗传学病因,有助于患者获得适当的遗传咨询及临床决策。临床上通过睾丸显微活检技术发现一部分NOA患者睾丸中有少量精子,结合胞浆内单精子注射（Intracytoplasmic sperm injection,ICSI）技术,NOA患者有机会生育自己的血亲后代。随着测序平台的快速发展,高通量测序技术（Next generation sequencing,NGS）已逐渐应用于癌症、智力缺陷、遗传性疾病、心脑血管疾病、糖尿病等疾病的临床检测中。近年来,对NOA患者分子机制的研究也取得了较大进步,一些NOA相关的易感位点及新的致病基因也陆续被报道,然而大部分新发现的致病基因并未在NOA散发患者或家系中得到进一步验证。虽然染色体和AZF微缺失技术已经在临床广泛应用,但是特殊的染色体异常和染色体断裂位点及AZF区亚区变异类型对男性生育力的影响尚无确定规律,临床遗传咨询困难。虽然新的高通量测序技术的应用能检出新的致病基因,但是大量的变异位点需要结合临床表型进行分析,也需要进一步的家系验证。因此,为了给临床患者提供更明确的遗传咨询,NOA患者的遗传因素仍需要进一步的深入研究和探讨。研究目的1.研究NOA患者染色体异常的种类、检出率及其对临床表型的影响。2.探讨NOA患者AZF区变异的种类、检出率及亚区变异类型。3.分析生精基因捕获测序筛查的检出效率及检出位点的致病性。4.探索全外显子组测序（WES）及低频突变关联分析（RVAS）结果,应用家系验证,对NOA相关致病基因进行筛选分析,为进一步开展NOA致病基因研究提供实验基础。研究方法本研究纳入2014年9月至2018年12月到吉林大学第一医院生殖医学·产前诊断中心就诊男性不育患者,经过精液常规分析、精液脱落细胞学检测、睾丸细针穿刺术或睾丸显微取精术后细胞学检查,排除梗阻性无精子症。对确诊为NOA的1739名患者进行临床信息采集及不育相应的检查结果收集。本研究经吉林大学第一医院伦理委员会同意。整体研究从以下四个部分进行:第1部分:对全部1739例NOA患者进行染色体核型分析。外周血淋巴细胞培养、染色体制备及G显带分析。对常规核型分析无法明确的染色体异常进行染色体微阵列分析、特异性探针-荧光原位杂交检测等方法联合诊断异常核型。对不同种类的染色体异常在NOA患者中的检出率、对应临床表型及相关影响机制进行分析。第2部分:对排除染色体异常的NOA患者进行AZF微缺失检测。采用STS-PCR法及NGS法两种方法并比较其检出率,对AZF亚区变异进行相关机制分析,并探讨其对NOA生精障碍的影响。第3部分:在排除染色体异常和AZF微缺失后,对同意参加生精基因研究的136例患者进行生精基因捕获测序Panel筛查分析。生精基因Panel是课题组前期研究成果,在这个部分进行基因变异筛查及致病性分析。第4部分:对生精基因Panel筛查未检出突变的NOA患者133例及已生育对照组343例进行WES检测,然后进行RVAS分析,对差异有显着性的基因进行蛋白互作关联分析,进一步召回11个家系进行一代测序验证及家系关联分析。结合RVAS及蛋白互作关联分析结果进行复核,筛选出可能导致NOA相关基因,并讨论这些基因与表型之间的关系。研究结果1.1739例NOA患者检出染色体异常299例,占比17.19%,其中性染色体非整倍体（整条或部分性染色体的重复或缺失）247例,在染色体异常的NOA患者中检出比例最高,占82.61%（247/299）。2.X染色体全部或部分重复组的睾丸体积、睾酮水平低于Y染色体全部或部分重复组及Y染色体全部或部分缺失组,有统计学差异（P<0.05）;而卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）高于另外两组,有统计学差异（P<0.05）。性染色体非整倍体导致拟常染色质区（PARs）非整倍体,16种异常核型中14种存在PARs区非整倍体,PARs区非整倍体的异常率占全部性染色体非整倍体93.93%（232/247）。3.45,X/46,XY嵌合体及其衍生核型中AZF微缺失检出率为87.5%（7/8）,多为AZFb+c区缺失。4.XX-男性综合征形成的原因多是由于Xp-Yp易位,导致性别决定基因（SRY）易位至X染色体,占比92.86%（13/14）。5.联合应用染色体微阵列检测、特异性探针-荧光原位杂交检测、AZF微缺失检测等方法,诊断了t（Y;D/G组）染色体易位2例、X/Y染色体不平衡易位1例、Y染色体结构异常嵌合体1例、Y染色体来源的小标记染色体2例。6.染色体平衡性结构异常NOA患者睾丸体积、FSH、LH、睾酮水平接近正常男性。16例平衡性结构异常共检出31个断裂点,分布于18条染色体上。5q15、11q25、22q13断裂点发生频率均为二次,提示其断裂点上相关生精基因与NOA发生有关。7.STS-PCR法在868例NOA患者中检出109例AZF微缺失,检出率12.56%。NGS法在572例NOA患者中检出172例AZF区变异,检出率30.07%。检出异常不仅包括传统微缺失类型,还包括多种AZF亚区缺失模式。单纯缺失7类,其中AZFb+c区部分缺失及AZFc区部分缺失又分12种缺失模式。单纯重复3类,其中AZFc区部分重复分为2中重复模式。重复+缺失9类。缺失+倒位1类。多种AZF亚区变异导致Y染色体不稳定性增加。8.通过生精基因Panel筛查分析,检出TEX11基因突变2例及AR基因突变1例。TEX11（c.1985T>C,p.Leu662Pro）及AR（c.528C>A,p.Ser176Arg）可能是NOA的致病位点。TEX11突变导致生精阻滞于精原细胞及初级精母细胞早期阶段。AR基因突变的临床表型不完全表现为雄激素不敏感,具有异质性。本研究生精基因Panel筛查的检出率2.21%（3/136）。9.WES检测结果显示,NOA患者组检出已经过验证的NOA相关基因6个（TEX15、BRCA2、FAM47C、MEIOB、SYCP3、TDRD7）。通过NOA组及对照组RVAS分析,筛选出最显着（P<0.0001,OR>1）基因5个（DHRS4、WARS、PICK1、RRBP1、ENTPD2）及校验合格（P=0.0001～0.05,在睾丸中表达>6,OR值>6或因对照组未检出而无法估计）基因187个,其中包括已经过验证的NOA相关基因3个:BRCA2、TDRD7、SYCP3。10.对最显着基因（5个）、校验合格基因（184个）、校验合格的已经过验证的NOA相关基因（3个）及文献中已经过验证的NOA相关基因（28个）进行蛋白互作关联分析,得到117个关联蛋白,结果显示这些关联蛋白集中于减数分裂相关的蛋白互作通路。11.对11个被召回的家系进行一代测序验证及家系关联分析,结合RVAS分析及蛋白互作关联分析,得到6个家系验证过的生精相关基因:ACTL8、TRA2B、IDE、FIBP、NUP37、PIGT。12.WES检测结合生信分析共筛出9个生精基因:ACTL8（家系验证）、TRA2B（家系验证）、IDE（家系验证）、FIBP（家系验证）、NUP37（家系验证）、PIGT（家系验证）、BRCA2（文献验证）、TDRD7（文献验证）、SYCP3（文献验证）,检出率为6.76%（9/133）。研究结论1.性染色体非整倍体是NOA染色体异常的主要类型。X染色体全部或部分重复可导致严重生精障碍。染色体断裂点5q15、11q25、22q13可能与精子发生相关,可能存在生精相关基因。2.AZF亚区存在多种变异形式（部分缺失、部分重复、部分缺失+部分缺失、部分缺失+倒位等）,可能是通过影响Y染色体稳定性导致NOA。3.TEX11（c.1985T>C,p.Leu662Pro）及AR（c.528C>A,p.Ser176Arg）可能为NOA致病变异。生精基因Panel筛查检出率为2.21%。4.家系验证ACTL8、TRA2B、IDE、FIBP、NUP37、PIGT基因及已经过验证的BRCA2、TDRD7、SYCP3基因可能与NOA发生相关。WES及RVAS对NOA可能的致病候选基因检出率为6.76%。
耿冬峰[4]（2021）在《不育男性遗传学异常对IVF/ICSI结局的影响及健康活产结局的相关因素研究》文中研究指明回顾性分析男性染色体核型异常、AZF微缺失夫妇的IVF/ICSI生育结局,研究这些遗传学异常对生育及子代健康的影响。此外,挖掘不育男性IVF/ICSI健康活产结局的相关影响因素,为男性不育夫妇进行辅助生殖技术生育的临床咨询和诊疗工作,起到参考和指导的作用。本研究从以下几个部分分别进行研究:1、不育男性染色体核型异常对IVF/ICSI结局的影响;2、不育男性AZF微缺失对IVF/ICSI结局的影响;3、不育男性AZF微缺失合并染色体核型异常对IVF/ICSI结局的影响;4、不育男性IVF/ICSI健康活产结局的相关因素研究。研究中主要涉及以下关键指标:1、IVF/ICSI实验室及妊娠结局指标,包括受精率、2PN受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、囊胚形成率、可用囊胚形成率、生化妊娠率、临床妊娠率、种植率、早期流产率;2、IVF/ICSI分娩及子代出生结局指标,包括平均孕龄、分娩率、早产率、双胎率、出生体重、活产率、围产儿死亡率、出生缺陷率。一、不育男性染色体核型异常对IVF/ICSI结局的影响方法:选取2012年1月2019年12月期间于吉林大学第一医院生殖医学·产前遗传中心因男方因素或男女双方因素首次行IVF或ICSI治疗的不孕夫妇。根据相应筛选标准共纳入2800对夫妇。按男方染色体核型是否异常分为染色体异常组（46对）、染色体多态性组（136对）和染色体正常组（2618对）。分别统计和比较IVF/ICSI实验室及妊娠结局、分娩及子代出生结局指标的差异。结果:1、染色体异常组的受精率显着低于染色体正常组（71.18%vs 78.55%,P<0.05）,染色体异常组的优质胚胎率、生化妊娠率显着高于染色体正常组（58.90%vs 49.25%,78.57%vs 63.24%,P<0.05）,其它实验室及妊娠指标无统计学差异（P>0.05）。染色体异常的不同类型中,染色体数目异常与染色体结构异常组的受精率均显着低于染色体正常组（72.12%,69.18%,vs 78.55%,P<0.05）,染色体数目异常与染色体结构异常组的优质胚胎率均显着高于染色体正常组（59.11%,58.43%,vs 49.25%,P<0.05）,其它实验室及妊娠指标无统计学差异（P>0.05）。2、染色体多态性组的各实验室及妊娠指标与染色体正常组比较均无统计学差异（P>0.05）。染色体多态性的不同类型中,D/G异常组的受精率显着低于染色体正常组（74.64%vs 78.55%,P<0.05）,Y染色体多态性组的受精率、2PN受精率显着高于对照组（84.66%vs 78.55%,78.41%vs 65.99%,P<0.05）;其它各项实验室及妊娠指标无统计学差异（P>0.05）。3、分娩及子代出生结局指标在染色体异常组与染色体正常组间无统计学差异（P>0.05）,在染色体数目异常组、染色体结构异常组与染色体正常组间无统计学差异（P>0.05）。4、分娩及子代出生结局指标在染色体多态性组与染色体正常组间比较,无统计学差异（P>0.05）。染色体多态性的不同类型中,9号染色体臂间倒位组的出生缺陷率统计学上高于染色体正常组（18.18%（2[双胎,髋关节发育不良]/11）vs 1.61%（23/1433）,P<0.05）,其它指标无统计学差异（P>0.05）。结论:1、染色体数目和结构异常均负面影响IVF/ICSI受精,对胚胎发育质量、胚胎发育潜能和临床妊娠结局无明显影响。2、整体上,染色体多态性对IVF/ICSI受精、胚胎发育质量、胚胎发育潜能和临床妊娠结局无明显负面影响。D/G组异常可能降低受精率,但影响不大。3、染色体数目与结构异常、染色体多态性及其不同类型对IVF/ICSI分娩及子代出生结局无明显影响。二、不育男性AZF微缺失对IVF/ICSI结局的影响方法:选取2012年1月2019年12月期间于吉林大学第一医院生殖医学·产前遗传中心因男方因素或男女双方因素首次行IVF或ICSI治疗的不孕夫妇。根据相应筛选标准共纳入921对夫妇。按AZF是否缺失分为AZF缺失组（143对）与AZF正常组（778对）。分别统计和比较IVF/ICSI实验室及妊娠结局、分娩及子代出生结局指标的差异。结果:1、AZF微缺失组的实验室及妊娠指标与AZF正常组比较,无统计学差异（P>0.05）。2、AZFc区不同缺失类型中,gr/gr缺失组的受精率、2PN受精率、可用囊胚形成率、种植率均显着高于AZF正常组（83.37%vs 77.25%,77.68%vs 69.02%,43.56%vs 33.47%,62.16%vs 43.28%,P<0.05）,b1/b3缺失组的2PN受精率显着低于AZF正常组（57.63%（68/118）vs 69.02%（5771/8361）,P<0.05）。3、不同精液质量组中,无精子症患者AZF微缺失组的受精率、2PN受精率显着低于AZF正常组（58.42%vs 77.31%,54.46%vs 70.37%,P<0.05）;严重少精子症患者AZF微缺失组的受精率、生化妊娠率显着低于AZF正常组（74.71%vs 78.30%,60.00%vs 73.33%,P<0.05）;少精子症患者AZF微缺失组的各项实验室及妊娠指标与AZF正常组无统计学差异;精子浓度正常患者AZF缺失组的受精率、2PN受精率高于AZF正常组（83.99%vs 76.57%,70.68%vs 64.07%,P<0.05）。4、分娩及子代出生结局指标在AZF微缺失组与AZF正常组中无统计学差异（P>0.05）。AZFc区不同缺失类型的分娩及子代出生结局指标与AZF正常组无统计学差异（P>0.05）。5、不同精液质量组,分娩及子代出生结局指标在AZF微缺失组与AZF正常组中无统计学差异（P>0.05）。结论:1、整体上,AZF微缺失对IVF/ICSI受精、胚胎发育质量、胚胎发育潜能和临床妊娠结局无负面影响。但AZFc区b1/b3缺失可能降低正常受精率。2、AZF微缺失影响不同精液质量不育男性的IVF/ICSI受精,负面影响无精子症和严重少精子症患者的受精率。3、AZF微缺失、AZFc区不同缺失类型均对IVF/ICSI分娩及子代出生结局无明显影响。4、AZF微缺失对不同精液质量不育男性的分娩及子代出生结局无明显影响。三、不育男性AZF微缺失合并染色体核型异常对IVF/ICSI结局的影响方法:选取2012年1月2019年12月期间于吉林大学第一医院生殖医学·产前遗传中心因男方因素或男女双方因素首次行IVF或ICSI治疗的不孕夫妇。根据相应筛选标准共纳入930对夫妇。按男方AZF、染色体核型分析结果分为AZF微缺失合并染色体核型异常组（12对）、单纯染色体核型异常组（57对）、单纯AZF微缺失组（140对）、AZF与染色体均正常组（721对）。分别统计和比较IVF/ICSI实验室及妊娠结局、分娩及子代出生结局指标的差异。结果:1、AZF微缺失合并染色体核型异常组的优质胚胎率、囊胚形成率、可用囊胚形成率、生化妊娠率,显着低于单纯染色体核型异常组、单纯AZF微缺失组、AZF与染色体均正常组,有统计学差异（34.44%vs 57.24%,47.27%,48.30%;34.48%vs 50.47%,51.78%,49.69%;18.97%vs 35.05%,35.04%,33.47%;41.67%vs 73.68%,68.57%,68.52%,P<0.05）。2、AZF微缺失合并染色体核型异常组的临床妊娠率、种植率与单纯染色体核型异常组、单纯AZF微缺失组、AZF与染色体均正常组之间虽然没有统计学差异（P>0.05）,但呈现降低的趋势（临床妊娠率41.67%vs 64.91%,60.00%,60.19%;种植率33.33%vs 48.62%,41.90%,43.28%）。3、分娩及子代出生结局指标在AZF微缺失合并染色体核型异常组与单纯染色体核型异常组、单纯AZF微缺失组、AZF与染色体均正常组之间无统计学差异（P>0.05）。结论:1、AZF微缺失合并染色体核型异常对不育男性IVF/ICSI受精无明显影响,对胚胎发育质量和胚胎发育潜能有负面影响。对临床妊娠结局可能有负面影响。2、AZF微缺失合并染色体核型异常对IVF/ICSI分娩及子代出生结局无明显影响。四、不育男性IVF/ICSI健康活产结局的相关因素研究方法:选取2012年1月2019年12月期间于吉林大学第一医院生殖医学·产前遗传中心行IVF或ICSI治疗的不孕夫妇。根据相应筛选标准共纳入2766对夫妇作为研究对象。按照是否有健康活产结局进行分组。通过Logistic单因素分析,筛选出有统计学意义的因素,然后再进行Logistic多因素分析,挖掘出有统计学意义的变量引入回归方程,构建不育男性健康活产结局的评估模型并绘制列线图。结果:1、单因素Logistic分析结果显示,女方年龄、男方年龄、不孕年限、不孕因素、女方不孕类型、男方不育类型、窦卵泡数（AFC）、女方体重指数、HCG日E2水平、获卵数、优质胚胎数、女方基础FSH、精液质量、移植胚胎数、胚胎移植日内膜厚度、移植周期类型、移植胚胎类型是与健康活产结局相关的变量（P<0.05）。男性染色体核型异常与AZF微缺失与健康活产结局相关性没有统计学意义（P>0.05）。2、多因素Logistic分析结果显示,女方年龄、精液质量、优质胚胎数、移植周期类型、移植胚胎数、移植胚胎类型、胚胎移植日内膜厚度是与健康活产结局相关的独立因素（P<0.05）。3、构建健康活产结局的评估模型P如下:P=1/（1+exp（-y））,其中y=-0.616×（女方年龄<35=1,35≤年龄<40=2,≥40岁=3）+（精子浓度正常=0,无精子症=0.331,严重少精子症=0.186,少精子症=-0.210）+0.083×（优质胚胎数,>15以15计算）+（冻融移植周期=0.333,新鲜移植周期=0）+（移植胚胎数1个=0,2个=0.598,3个=0.250）+（囊胚=0.482,卵裂期胚胎=0）+（胚胎移植日内膜厚度≤6mm=0,710mm=2.017、≥11mm=2.586）-2.847。本模型进行似然比检验,回归方程有统计学意义（=252.6,P<0.001）。ROC曲线下面积=0.665,95%CI:0.644-0.685,P<0.001。P=0.433作为诊断界点,对应的敏感度为69%,特异性为56%。根据回归模型绘制了列线图,C指数为0.665,校准图显示根据列线图估计的健康活产概率和真实的发生频率具有较好的一致性。结论:1、发现影响不育男性IVF/ICSI健康活产结局的主要因素。2、女方年龄是健康活产结局的不利因素。3、优质胚胎数、移植胚胎数为2个、胚胎移植日内膜厚度、无精子症、冻融周期移植、囊胚移植,是健康活产结局的有利因素。4、成功构建不育男性IVF/ICSI健康活产的评估模型,绘制了预测健康活产概率的列线图。
汤冬冬[5]（2021）在《人类特发性非梗阻性无精子症的致病基因筛查及功能探讨》文中认为研究背景:不育症已经成为一个21世纪全球性的健康问题,大约困扰着8%-12%的育龄夫妇。在不育症的病因中,男女双方大约各占一半左右,其中由男方因素所导致的不育症,称为男性不育症。在男性不育症中,非梗阻性无精子症（non-obstructive azoospermia,NOA）被认为是临床上最严重的类型,约占男性不育症病因的3%-5%左右。作为NOA患者中发生率最高的特发性NOA,一般很少能找到明确的致病因素,其发生可能受到遗传和环境因素等多方面的影响,一些单基因突变也被发现可能会导致NOA的发生,如TEX11,FANCM,STAG3等。目的:以特发性NOA患者为研究对象,通过全外显子测序技术（Whole exome sequencing,WES）,联合生物信息学分析,筛选并鉴定与NOA相关的已知致病基因的相关变异,同时筛选NOA的未知候选基因,以期为特发性NOA的基因诊断、遗传咨询及个体化治疗提供理论依据。方法:收集来自安徽医科大学第一附属医院生殖医学中心的60例特发性NOA患者进行编号（NOA1-NOA60）,对其外周血样进行全外显子测序。首先,对测序获得的数据进行变异筛选及生物信息学分析,筛选已知致病基因突变及新的候选致病基因突变:第一步比对目前已知的NOA致病基因及遗传模式,筛选已知致病基因突变;第二步在已知致病基因不能解释的病例中,重点关注罕见、有害的睾丸特异表达/高表达的基因,以期发现特发性NOA新的候选基因。其次,针对发现的已知致病基因突变和候选致病基因突变通过Sanger测序验证测序结果的准确性以及进行家系共分离分析,以明确基因突变的家系来源。最后,通过HE染色、免疫荧光共染不同生精细胞标记物等技术分析不同基因变异的特发性NOA患者睾丸组织的病理类型,并且通过免疫荧光技术、免疫组化、实时荧光PCR以及Western Blot技术检测候选致病基因在人类睾丸组织中的定位及定量表达情况。结果:首先,通过变异筛选及生物信息学分析,我们在5例患者中发现了3个新的NOA候选致病基因——HFM1、FER1L6以及SRRM5突变:（1）在患者NOA5和NOA26中我们分别发现并鉴定了HFM1基因的纯合突变。其中NOA5患者携带HFM1基因的纯合无义突变（NM＿001017975:exon32:c.3490C>T:p.Q1164X）;NOA26患者携带HFM1基因的纯合错义突变,软件预测突变位点是有害的。两例患者睾丸组织病理类型鉴定为精母细胞停滞型NOA,免疫荧光实验提示HFM1蛋白主要表达于对照组睾丸组织生精小管内的精母细胞的细胞核中,而在患者NOA5和NOA26睾丸组织中的表达显着减少,QRT-PCR实验及Western Blot实验提示两例患者的HFM1m RNA和蛋白表达水平显着降低。（2）在患者NOA8和NOA44中发现并鉴定了FER1L6的双等位基因突变。其中患者NOA8携带FER1L6基因的纯合错义突变（NM＿001039112:exon9:c.722C>T:p.P241L）,软件预测突变位点是有害的,患者睾丸组织病理类型鉴定为唯支持细胞综合征型NOA;在患者NOA44中,我们发现了FER1L6基因的复合杂合突变（NM＿001039112:exon13:c.1693G>A:p.G565R/exon23:c.2905del C:p.P969fs）,患者睾丸组织病理分析鉴定为精母细胞阻滞型NOA。通过免疫荧光实验,我们发现FER1L6蛋白主要表达于对照组睾丸组织生精小管内,而在患者NOA5和NOA26睾丸组织中的表达显着减少。（3）在患者NOA10中发现并鉴定了SRRM5的纯合突变（SRRM5:NM＿001145641:exon1:c.1531C>T:p.Q511X）,患者的病理表型鉴定为精母细胞停滞型NOA。其次,我们通过比对分析目前已知的NOA致病基因,我们在10例患者共发现7个已知致病基因的多个有害突变,包括3个隐性遗传基因,2个X连锁遗传基因以及2个显性遗传基因。（1）3个隐性遗传致病基因:（1）在患者NOA2中发现并鉴定了MSH4基因的罕见纯合突变（MSH4:NM＿002440:exon12:c.1552C>T:p.Q518X）,患者睾丸组织病理类型鉴定为精母细胞停滞型NOA。免疫荧光实验提示MSH4蛋白主要表达于对照组睾丸组织生精小管内的精母细胞中,而在NOA2患者睾丸组织中未见明确表达,QRT-PCR实验也提示患者的MSH4-m RNA表达水平显着降低。（2）在患者NOA9中发现MEI1基因的纯合片段缺失（MEI1:NM＿152513.3:exon19-intron19:c2262＿2268+9del ACGTGAGGTATGGACC）。（3）在患者NOA16中我们发现并鉴定了FANCA基因的纯合错义突变（FANCA:NM＿000135:exon33:c.3263C>T:p.S1088F）,患者睾丸组织病理表型鉴定为唯支持细胞综合征型NOA;在患者NOA50中我们发现并鉴定了FANCA的两个错义突变（FANCA:NM＿000135:exon19:c.1729C>G:p.P577A/exon33:c.3263C>T:p.S1088F）,患者睾丸组织病理表型鉴定为唯支持细胞综合征型NOA。（2）2个X连锁遗传致病基因:（1）在患者NOA7中发现了AR基因的一个半合子错义突变（AR:NM＿000044:exon5:c.2263T>C:p.F755L）,该患者睾丸组织病理类型鉴定为唯支持细胞综合征型NOA。（2）分别在患者NOA39和患者NOA49中发现了一个X连锁的NOA已知致病基因TEX11的半合子错义突变（NM＿031276:exon7:c.466A>G:p.M156V）以及半合子移码突变（NM＿031276:exon8:c.559＿560del:p.M187fs）,这2例患者睾丸组织的表型分别为精子发生低下型NOA和精母细胞阻滞型NOA。（3）2个显性遗传致病基因:（1）在患者NOA22和NOA25中我们分别发现并鉴定了一个已知NOA显性遗传致病基因DMRT1的杂合错义突变（DMRT1:NM＿021951:exon2:c.425C>T:p.A142V以及exon1:c.340G>A:p.V114M）,2例患者睾丸组织病理表型鉴定均为唯支持细胞综合征型NOA。（2）在患者NOA42中我们发现并鉴定了一个已知NOA显性遗传致病基因PLK4的杂合有害错义突变（PLK4:NM＿001190799:exon15:c.2785A>G:p.M929V）,患者睾丸组织病理表型鉴定均为唯支持细胞综合征型NOA。结论:通过全外显子测序结合Sanger测序验证技术可以高效的鉴定NOA的已知致病基因,在我们的60例NOA患者中,已知致病基因突变可以解释16.67%的病例;其中来自于近亲婚配家庭的特发性NOA患者已知基因突变所致的比例高达30%,因此,这类患者有更高的遗传风险,建议进行深入的遗传学检测指导临床治疗。另外,我们的研究结果也提示HFM1和FER1L6是很可能NOA新的候选致病基因,其纯合或者复合杂合突变可能导致NOA的发生。我们的发现为特发性NOA患者的基因诊断及遗传咨询提供了一些新的理论依据,为这类患者的个体化治疗提供了参考。
余文华[6]（2020）在《Y染色体上DBY基因在无精子症患者睾丸组织中的缺失研究》文中研究表明目的Y染色体上无精子因子（AZF）微缺失约占男性不育症病因的10%,是导致男性不育的主要原因之一。AZF是男性具备生精功能的主要条件;其缺失会导致生精功能障碍,临床上主要表现为少精子症和无精子症。AZFa出现微缺失的概率较AZFb、AZFc小,其一旦出现缺失则会造成后果严重。DBY基因是Y染色体上AZFa区域中主要候选基因之一。本研究通过PCR方法检测Y染色体上DBY基因在无精子症患者睾丸组织中的缺失情况,探讨Y染色体微缺失与男性不育症临床表现的关系,为男性不育症的临床诊断和治疗提供理论基础。方法收集2017年12月至2019年10月就诊于甘肃省第二人民医院及甘肃省人民医院无精子症患者无精子症患者41例（后经检测发现6例染色体核型异常,其中2例为克氏综合征）为实验组;34例少精子症患者为阳性对照组。正常生育力的就诊于甘肃省第二人民医院及甘肃省人民医院的睾丸外伤患者25例为阴性对照组。实验通过伦理委员会和患者的同意。实验组和对照组在局麻下用穿刺活检针穿刺两侧睾丸约5mm大小的组织,将组织分为2mm和3mm两块;2mm的睾丸组织作常规病理检查;3mm睾丸组织提取DNA用于PCR扩增。以性别决定基因（SRY基因）引物为内控对照,采用PCR法扩增DBY基因。实验结果采用四格表的Fisher确切概率法进行统计学分析。结果实验组及对照组的睾丸组织标本均可以扩增出SRY条带,这表明睾丸组织提取的DNA模板与实验要求相符。25例对照组所有基因位点均可见扩增条带,说明没有DBY基因的缺失。35例无精子症患者中5例未发现DBY基因扩增条带,表明有DBY基因的缺失,占无精子症患者的14.3%（5/35）。无精子症患者和阴性对照组DBY基因缺失统计学分析P<0.05（P=0.048）,表明DBY基因在无精子症患者和阴性对照组中的缺失具有统计学意义。5例微缺失患者睾丸组织活检病理均表现为Ⅰ型唯支持细胞综合征（SCOSⅠ）;符合DBY基因微缺失的睾丸病理学上改变,这表明DBY基因和精子生成关系紧密,进一步证实DBY基因和睾丸精子发生可能相关。结论1.研究发现DBY基因在无精子症患者中出现缺失,而阳性对照组和阴性对照组中无缺失,说明DBY基因与无精子症关系密切,DBY基因可能在精子发生过程中具有重要作用,其缺失可能会导致无精子症,进而引起男性不育。本研究中34例少精子症患者中没有检测到DBY基因缺失,可能与标本数量、位点选择、种族和地区差异等有关。2.DBY基因微缺失引起的无精子症患者在患者自愿情况下可以进行供精人工授精助孕实;或者从根本上找出病因对相关基因敲除或导入。3.对男性不育患者,可以对患者进行Y染色体的检测的同时行睾丸活组织检查来明确不育症的病因,可以避免一些不必要的治疗,减轻患者精神上的压力和经济上的负担。
于洋[7]（2019）在《非梗阻性无精子症行显微取精获精结局的预测因素分析》文中研究表明目的:通过对非梗阻性无精子症（NOA）患者术前和术中的各项指标的研究及评估,寻找对显微取精（Microdissection testicular sperm extraction,Micro-TESE）获精结局有预测价值的方法及评估手段,为临床医生选择更为合理的治疗方案提供理论参考,最大程度的减少患者不必要的损伤。方法:回顾性分析2016年3月至2019年1月,在吉林大学第一医院行Micro-TESE的189例NOA患者。通过对NOA患者临床指标,病因,病理,术中睾丸曲细精管的评估,以预测显微取精的成功率及指导手术方案。术前常规临床指标包含临床病因,临床指标（年龄,睾丸体积,生殖激素）及常规病理学诊断;术中评估指标包含曲细精管均一性及曲细精管直径。并探索新的研究方法（包含遗传学病因）的进一步检测及分类,病理的进一步分类。常规临床指标的分类方法:（1）年龄:≤30岁组,>30岁组;（2）睾丸体积:≤5ml组,5-10ml组,≥10ml组;（3）促卵泡刺激素（FSH）:≤12.4m IU/l组,12.4-24.8m IU/l组,≥24.8m IU/l组;（4）促黄体生成素（LH）:≤8.6m IU/l组,8.6-17.2m IU/l组,≥17.2m IU/l组;（5）睾酮（T）:≤9.9nmol/l组,>9.9nmol/l;（6）病因:克氏综合征（KS）,Y染色体微缺失,隐睾,睾丸炎,特发性NOA;（7）常规病理分型:唯支持细胞综合征（SCOS）,生精阻滞（MA）,生精功能低下（HS）,透明样变。新的研究方法如下:（1）增加染色体核型检查的核型数,寻找小比例的嵌合型KS与获精的相关性。（2）高通量测序法增加Y染色体微缺失检查的STS位点,明确缺失的片段及新的STS缺失位点。（3）基因捕获测序技术筛查基因突变位点。（4）病理一致性分型:根据是否仅含有单一的病理组织类型进一步分为8类:完全型SCOS,混合型SCOS,完全型MA,混合型MA,完全型HS,混合型HS,完全型透明样变,混合型透明样变;（5）术中评估方法:（1）术中曲细精管均一性:均一曲细精管组,不均一曲细精管组;（2）曲细精管直径:≥100μm组,<100μm组。结果:1.总获精率:入组189例,获精61例,获精率为32.3%。2.ROC曲线显示病理,睾丸体积,T具有预测价值。3.临床指标分析（1）获精组T水平和睾丸体积显着低于未获精组（P=0.038;P=0.013）。（2）睾丸体积分组:≤5ml组的获精率显着高于5-10ml组（P<0.001）以及≥10ml组（P=0.032）。（3）T水平分组:≤9.9nmol/l组获精率显着高于>9.9nmol/l组（P=0.009）。（4）年龄,FSH,LH对获精率无影响,无统计学差异。4.病因学分析（1）获精率:特发性NOA获精率显着低于克氏综合征（P=0.001）和隐睾组（P<0.001）。（2）各种病因的获精组与未获精组的获精率比较均无统计学差异。（3）克氏综合征:增加染色体核型检查数可以测出小比例嵌合型KS,含有46,XY正常核型的嵌合体获精率增高。（4）Y染色体微缺失:高通量测序方法可检测新的缺失位点,明确具体缺失的区域及大小,较常规PCR方法更具优势。（5）基因筛查:基因捕获测序共检测NOA患者35例,5例为阳性结果,检出率为14.3%。发现的变异基因分别为TEX11,KISS1R,HSF2,NR5A1,DNAH11。其中TEX11,HSF2,NR5A1具有NOA致病性,具有一定的指导意义。5.病因结合临床指标分析:（1）在特发性NOA中,睾丸体积≤5ml且FSH≥24.8m IU/ml获精率显着高于睾丸体积5-10ml且FSH 12.4-24.8m IU/ml组（P=0.026）。（2）在特发性NOA中,睾丸体积≤5ml且任一LH组获精率均显着高于睾丸体积5-10ml组且LH 8.6-17.2m IU/ml组（三组均P<0.05）。（3）在特发性NOA中,当睾丸体积≤5ml且T水平正常的获精率显着高于睾丸体积5-10ml组且T水平低下组（P=0.006）及正常组（P=0.01）;睾丸体积≥10ml且低T水平组获精率显着高于睾丸体积5-10ml组且低T水平组（P=0.041）。6.病理组织学分析（1）获精率:SCOS组的获精率显着低于HS组（P<0.001）和透明样变组（P=0.001）;MA组的获精率显着低于HS组（P=0.002）。（2）SCOS获精组睾丸体积显着低于未获精组（P=0.002）。其他病理分型无统计学差异。7.病理结合临床指标分析:（1）SCOS组中,睾丸≤5ml组获精率显着高于睾丸体积5-10ml组（P=0.043）及≥10ml组（P=0.016）。（2）透明样变性组中,LH水平8.6-17.2m IU/ml获精率显着高于LH≥17.2m IU/ml（P=0.041）。（3）MA组和HS组中,低T水平获精率显着高于正常T水平组（分别为P=0.026;P=0.004）。其他无统计学差异。8.病理组织单一性分析（1）获精率:混合型病理组织组显着高于单一型病理组织组（P<0.001）,混合型SCOS获精率显着高于单一型SCOS（P=0.019）。（2）单一型病理获精组的T水平显着低于未获精组（P=0.024）;混合型病理组间无统计学差异。9.术中评估（1）获精率:不均一曲细精管组的获精率显着高于均一组（P<0.001）;一侧未获精,不均一组的对侧睾丸获精率显着高于均一组（P<0.001）。（2）获精组与未获精组获精率无统计学差异。10.病因/病理结合术中评估（1）在特发性NOA（P<0.001）及克氏综合征（P=0.007）组中,不均一曲细精管组的获精率显着高于均一组。其他无统计学差异。（2）特发性NOA一侧未获精,不均一组对侧睾丸获精率显着高于均一组（P=0.007）。（3）SCOS组及透明样变性组,不均一曲细精管组的获精率显着高于均一组获精率（P=0.003,P=0.002）。其他无统计学差异。（4）SCOS组中,曲细精管直径≥100μm的获精率显着低于<100μm组（P<0.001）。≥100μm组行对侧睾丸手术31例,全部未获精。结论:1.睾丸体积≤5ml或者睾酮≤9.9nmol/l对获精率具有较低的预测价值。2.不同病因中,特发性NOA获精率低,当其结合睾丸体积及生殖激素时可提高预测的准确性;增加克氏综合征患者核型检测数量可以找到小比例嵌合,含有46,XY嵌合体克氏综合征获精率高;致病基因筛查可以发现未知的病因,指导手术方案的选择。3.睾丸病理组织分型中,唯支持细胞综合征获精率显着低于生精功能低下,对NOA获精结局具有较好的预测价值;病理组织分型结合不同临床指标以及病理组织的单一性分型进一步提高了获精率预测的准确性。4.特发性NOA或唯支持细胞综合征结合术中评估为均一型曲细精管时,或唯支持细胞综合征结合曲细精管直径≥100μm时一侧睾丸未获精,另一侧获精率极低,在患者知情同意后可行另一侧睾丸的浅层手术甚至取消手术。
张晓翠,孙雪梅,伊江燕,黄卫东[8]（2019）在《518例男性无精症的染色体核型分析》文中进行了进一步梳理目的通过对518例因无精子症而不育的患者进行细胞遗传学检查分析,探讨无精子症与外周血染色体核型异常的关系,并分析研究染色体核型异常在男性不育中的诊断意义。方法选取518例生殖门诊就诊的男性无精子症患者,采用外周血染色体核型分析法进行分析。应用常规外周血淋巴细胞培养、收获、滴片、固定、制片及G显带技术进行染色体核型分析。结果 518例患者经外周血染色体核型分析后,共检出100例异常染色体核型,即染色体异常发生率为19.23%,与文献报道异常发生率19.6%基本相符。异常核型主要归为下列三大类:1.染色体数目异常52例:（1）47,XXY,克氏综合征,共48例,（2）嵌合型,共4例;2.染色体结构异常,共39例:（1）染色体平衡易位,共4例,（2）染色体倒位,共7例,（3）染色体多态性,共23例;3.性反转:46,XX,性反转综合征9例。结论染色体核型异常是导致男性无精的重要原因之一,对于无精症的患者进行染色体检查,有助于病因的分析,并可以为生育提供重要的依据。
聂茹[9]（2019）在《849例男性不育患者的染色体核型分析》文中研究表明目的利用回顾性研究对朝阳地区849例男性不育症患者进行外周血染色体核型诊断,分析异常染色体对不育的影响。方法对来我院男科门诊就诊的849例成年男性患者进行外周血染色体核型诊断,分析异常核型患者的不育原因。结果 849例不育患者外周血染色体检出75例异常核型,其中染色体数目异常32例,结构异常43例。32例染色体数目异常患者克氏综合征患者28例,其中25例是由于无精子症就诊患者,3例少精子症患者。43例染色体结构异常患者中,平衡易位15例（包括罗伯逊易位7例）,9号染色体臂间或臂内倒位7例,大Y（Y≥18）19例,2例性反转患者。结论外周血染色体核型异常会导致无精子症或少、弱精子症发生,异常核型是引起男性不育的重要因素,对这类患者进行核型分析是非常重要的。
杨红,王振强,郑艳莉,姜虹,武学清[10]（2019）在《山西地区生精障碍患者染色体核型及Y染色体微缺失分析》文中认为目的探讨山西地区Y染色体AZF微缺失、染色体核型分析及性激素水平与男性生精障碍的关系。方法采用聚合酶链反应技术对935例男性不育患者（包括454例无精子症、452例严重少精子症及29例弱精子症患者）的外周血进行Y染色体微缺失检测,同时对其外周血进行染色体核型分析及性激素测定。结果在935例男性不育患者中共检出101例Y染色体微缺失,检出率为10.8%（101/935）;染色体核型异常56例,检出率为5.99%（56/935）。其中AZFc区域缺失占总缺失的63.37%（64/101）,是最为常见的Y染色体微缺失类型;47,XXY在染色体异常核型中占的比率最大2.46%（23/935）。染色体核型与Y染色体微缺失同时异常的有7例,占总样本的0.75%,而且发现Y染色体微缺失和染色体核型与激素水平都有相关性。结论染色体核型异常和Y染色体微缺失是导致男性不育的主要原因。对于准备行辅助生育的生精障碍患者,有必要将Y染色体微缺失和染色体核型分析作为常规检查,性激素水平可用于辅助检查,为男性不育的临床诊断和治疗提供重要依据。
二、200例无精子症患者的染色体核型分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、200例无精子症患者的染色体核型分析（论文提纲范文）
（1）功能近红外光谱技术测量短时心率变异性的准确性评估（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 数据处理 |
| 1.4 HRV参数 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 结 果 |
| 2.1 fNIRS在手指与头部测量的短时HRV的一致性 |
| 2.2 fNIRS与ECG测量的短时HRV的一致性 |
| 3 讨 论 |
（2）550例男性不育症患者染色体核型和Y染色体微缺失情况分析（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 检测指标分析 |
| 1.3 统计学处理 |
| 2 结 果 |
| 2.1 染色体核型情况 |
| 2.2 Y染色体微缺失情况 |
| 2.3 性激素检测结果 |
| 2.3.1 无精子症、极严重少精子症、严重少精子症及健康对照的比较 |
| 2.3.2 无精子症、极严重少精子症、严重少精子症中有无Y染色体微缺失患者性激素水平比较 |
| 3 讨 论 |
（3）非梗阻性无精子症临床遗传学分析及全外显子组测序低频突变关联研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一篇 绪论 |
| 1.1 NOA的鉴别诊断 |
| 1.2 NOA的遗传学病因 |
| 1.3 临床遗传学诊断技术 |
| 1.4 存在问题及实验方案 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第1部分 非梗阻性无精子症的染色体异常分析 |
| 1.1 研究对象与方法 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 研究结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 小结 |
| 第2部分 非梗阻性无精子症的AZF区变异分析 |
| 2.1 研究对象与方法 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.3 研究结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第3部分 非梗阻性无精子症的生精基因捕获测序筛查分析 |
| 3.1 研究对象与方法 |
| 3.2 研究方法 |
| 3.3 研究结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第4部分 非梗阻性无精子症外显子组测序及低频突变关联分析 |
| 4.1 研究对象与方法 |
| 4.2 研究方法 |
| 4.3 研究结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（4）不育男性遗传学异常对IVF/ICSI结局的影响及健康活产结局的相关因素研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 染色体异常 |
| 1.1.1 染色体数目异常 |
| 1.1.2 染色体结构异常 |
| 1.1.3 染色体多态性 |
| 1.2 染色体亚显微结构异常 |
| 1.2.1 Y染色体亚显微缺失 |
| 1.2.2 gr/gr缺失 |
| 1.3 X染色体连锁和常染色体基因突变 |
| 1.4 遗传学检测异常不育男性生育需要考虑的问题 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 主要仪器与试剂 |
| 2.1.1 主要实验仪器 |
| 2.1.2 主要实验试剂 |
| 2.2 研究对象及方法 |
| 2.2.1 研究对象 |
| 2.2.2 研究方法 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 精液常规检测 |
| 2.3.2 血清生殖激素检测 |
| 2.3.3 染色体核型分析 |
| 2.3.4 AZF微缺失检测 |
| 2.3.5 遗传咨询 |
| 2.3.6 IVF、ICSI促排卵及卵子获得 |
| 2.3.7 精子的获得及优选方法 |
| 2.3.8 IVF、ICSI授精方法 |
| 2.3.9 胚胎培养与胚胎评估 |
| 2.3.10 胚胎移植及妊娠检测 |
| 2.3.11 患者随访 |
| 2.3.12 观察指标的定义及计算方法 |
| 2.3.13 统计学方法 |
| 第3章 不育男性染色体核型异常对IVF/ICSI结局的影响 |
| 3.1 研究对象 |
| 3.1.1 研究对象分组 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 不育男性染色体核型异常分析 |
| 3.2.2 染色体核型异常与不育男性精液质量分析 |
| 3.2.3 染色体核型异常不育男性的IVF/ICSI妊娠结局分析 |
| 3.2.4 染色体核型异常不育男性的IVF/ICSI分娩及子代出生结局分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 不育男性人群染色体核型异常的检出率及异常类型 |
| 3.3.2 不育男性染色体异常类型与精液质量 |
| 3.3.3 染色体异常与IVF/ICSI实验室及妊娠结局的关系 |
| 3.3.4 染色体多态性与IVF/ICSI实验室及妊娠结局的关系 |
| 3.3.5 染色体异常与IVF/ICSI分娩及子代出生结局的关系 |
| 3.3.6 染色体多态性与IVF/ICSI分娩及子代出生结局的关系 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 不育男性AZF微缺失对IVF/ICSI结局的影响 |
| 4.1 研究对象 |
| 4.1.1 研究对象分组 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 不育男性AZF微缺失情况分析 |
| 4.2.2 AZF微缺失与不育男性精液质量分析 |
| 4.2.3 AZF微缺失不育男性的IVF/ICSI妊娠结局分析 |
| 4.2.4 AZF微缺失不育男性的IVF/ICSI分娩及子代出生结局分析 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 AZF微缺失与精液质量 |
| 4.3.2 AZF微缺失与IVF/ICSI实验室及妊娠结局的关系 |
| 4.3.3 AZF微缺失与IVF/ICSI分娩及子代出生结局的关系 |
| 4.4 小结 |
| 第5章 不育男性AZF微缺失合并染色体核型异常对IVF/ICSI结局的影响 |
| 5.1 研究对象 |
| 5.1.1 研究对象分组 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 AZF微缺失合并染色体核型异常的检出率 |
| 5.2.2 AZF微缺失合并染色体核型异常的不孕夫妇基本资料分析 |
| 5.2.3 AZF微缺失合并染色体核型异常的不育男性行IVF/ICSI妊娠结局分析 |
| 5.2.4 AZF微缺失合并染色体核型异常与IVF/ICSI分娩及子代出生结局分析 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 AZF微缺失合并染色体核型异常的检出率 |
| 5.3.2 AZF微缺失与染色体核型异常的关系 |
| 5.3.3 AZF微缺失合并染色体核型异常与IVF/ICSI结局的关系 |
| 5.4 小结 |
| 第6章 不育男性IVF/ICSI健康活产结局的相关因素研究 |
| 6.1 研究对象 |
| 6.2 研究方法 |
| 6.3 研究结果 |
| 6.3.1 研究对象的一般情况 |
| 6.3.2 健康活产结局的单因素Logistic分析 |
| 6.3.3 多因素Logistic分析与健康活产结局相关的独立因素 |
| 6.3.4 健康活产结局风险评估模型的建立 |
| 6.3.5 健康活产结局风险评估模型的评价 |
| 6.3.6 预测健康活产概率的列线图 |
| 6.4 讨论 |
| 6.4.1 女方年龄与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.2 男方年龄与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.3 体重指数与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.4 不孕年限与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.5 AFC与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.6 获卵数与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.7 优质胚胎数与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.8 子宫内膜厚度与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.9 移植周期类型与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.10 移植胚胎类型与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.11 精液质量与IVF/ICSI活产结局的关系 |
| 6.4.12 不育男性IVF/ICSI健康活产相关因素分析及构建风险评估模型的意义 |
| 6.5 小结 |
| 第7章 结论 |
| 创新点及意义 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（5）人类特发性非梗阻性无精子症的致病基因筛查及功能探讨（论文提纲范文）
| 英文缩略表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 1.引言 |
| 1.1 男性不育症和无精子症的研究现状 |
| 1.2 正常的精子发生过程 |
| 1.3 特发性非梗阻性无精子症的遗传学病因研究现状 |
| 1.4 本课题的研究设计及拟解决的科学问题 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 实验试剂 |
| 2.3 仪器与耗材 |
| 2.4 实验方法 |
| 3.结果 |
| 3.1 特发性NOA患者及对照组睾丸组织病理分型 |
| 3.2 60例特发性NOA患者全外显子测序结果分析寻找新的NOA候选致病基因突变 |
| 3.3 60例特发性NOA患者全外显子测序结果分析寻找已知NOA致病基因突变 |
| 4.讨论 |
| 4.1 已知致病基因突变导致NOA的发生 |
| 4.2 我们发现的新的候选致病基因突变可能导致NOA的发生 |
| 4.3 本项研究中的不足之处 |
| 5.结论 |
| 6.参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 课题综述 非梗阻性无精子症的遗传学研究进展 |
| 参考文献 |
（6）Y染色体上DBY基因在无精子症患者睾丸组织中的缺失研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 资料与方法 |
| 1.1 研究资料 |
| 1.1.1 研究对象 |
| 1.1.2 纳入标准 |
| 1.1.3 排除标准 |
| 1.2 实验仪器和实验试剂 |
| 1.2.1 主要实验仪器 |
| 1.2.2 主要实验试剂 |
| 1.2.3 主要实验试剂的配制 |
| 1.3 G显带染色体分析 |
| 1.4 睾丸组织Y染色体基因检测 |
| 1.4.1 睾丸穿刺及病理检查 |
| 1.4.2 睾丸组织DNA的提取(酚-氯仿法) |
| 1.4.3 紫外分光光度计测定DNA浓度 |
| 1.4.4 单独扩增PCR反应体系 |
| 1.4.5 多重PCR扩增反应体系 |
| 1.4.6 琼脂糖凝胶电泳法检测PCR扩增产物 |
| 1.5 PCR扩增结果判断 |
| 1.6 统计学方法 |
| 第二章 结果 |
| 第三章 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 附表及附图 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（7）非梗阻性无精子症行显微取精获精结局的预测因素分析（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 无精子症概述 |
| 1.1.1 梗阻性无精子症 |
| 1.1.2 非梗阻性无精子症 |
| 1.2 外科取精技术的发展与比较 |
| 1.2.1 外科取精技术的发展 |
| 1.2.2 不同取精技术的比较 |
| 1.3 影响NOA显微取精结局的因素 |
| 1.3.1 临床指标 |
| 1.3.2 遗传性病因 |
| 1.3.3 非遗传性病因 |
| 1.3.4 病理组织学分型 |
| 1.4 显微取精的术中评估 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 主要仪器和试剂 |
| 2.1.1 主要仪器 |
| 2.1.2 主要试剂及材料 |
| 2.2 研究对象及方法 |
| 2.2.1 研究对象 |
| 2.2.2 研究方法 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 精液分析检查 |
| 2.3.2 血清生殖激素检测 |
| 2.3.3 睾丸体积测量 |
| 2.3.4 精浆生化检测 |
| 2.3.5 性高潮后尿液检查 |
| 2.3.6 染色体核型分析 |
| 2.3.7 荧光原位杂交技术检测染色体嵌合体率 |
| 2.3.8 Y染色体微缺失检测 |
| 2.3.9 目标基因捕获测序 |
| 2.3.10 睾丸组织病理学检查 |
| 2.4 显微取精术及术中评估 |
| 2.4.1 显微取精术 |
| 2.4.2 曲细精管的均一性评估 |
| 2.4.3 曲细精管的直径评估 |
| 2.5 统计学方法 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 入组患者临床资料 |
| 3.1.1 一般临床指标 |
| 3.1.2 病因构成 |
| 3.1.3 病理构成 |
| 3.2 初步预测效果评价 |
| 3.3 临床指标与获精的相关因素分析 |
| 3.3.1 获精组与未获精比较 |
| 3.3.2 临床指标的细化分析 |
| 3.4 病因与获精的相关因素分析 |
| 3.4.1 获精率 |
| 3.4.2 遗传性病因 |
| 3.4.3 非遗传性病因 |
| 3.4.4 特发性NOA |
| 3.4.5 病因结合临床指标 |
| 3.5 病理与获精相关因素分析 |
| 3.5.1 常规病理组织学分型 |
| 3.5.2 单一型和混合型分型 |
| 3.6 术中评估与获精的相关因素分析 |
| 3.6.1 曲细精管直径的均一性 |
| 3.6.2 曲细精管直径大小对获精率的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 入组患者临床资料 |
| 4.1.1 基本临床指标 |
| 4.1.2 病因构成 |
| 4.1.3 病理分型构成 |
| 4.2 初步预测效果评价 |
| 4.3 临床指标与获精的相关因素分析 |
| 4.3.1 获精组与未获精组比较 |
| 4.3.2 临床指标细化分析 |
| 4.4 病因与获精的相关因素分析 |
| 4.4.1 获精率 |
| 4.4.2 遗传性病因 |
| 4.4.3 非遗传性病因 |
| 4.4.4 特发性NOA |
| 4.4.5 病因结合临床指标 |
| 4.5 病理与获精相关因素分析 |
| 4.5.1 常规病理组织学分型 |
| 4.5.2 病理一致性与获精相关因素分析 |
| 4.6 术中评估与获精的相关因素分析 |
| 4.6.1 曲细精管直径的均一性 |
| 4.6.2 曲细精管直径大小对获精率的影响 |
| 第5章 结论 |
| 创新点及意义 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（8）518例男性无精症的染色体核型分析（论文提纲范文）
| 1. 研究资料和方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 研究方法 |
| 2. 研究结果 |
| 3. 结论 |
（9）849例男性不育患者的染色体核型分析（论文提纲范文）
| 1 研究对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 研究方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
四、200例无精子症患者的染色体核型分析（论文参考文献）
- [1]功能近红外光谱技术测量短时心率变异性的准确性评估[J]. 王宁馨,张绪柘,雷皓,龙克鸿. 解放军医学杂志, 2021(11)
- [2]550例男性不育症患者染色体核型和Y染色体微缺失情况分析[J]. 靳化,赵勇,钟建容,沈梦尘,陈蕾. 解放军医学杂志, 2021(11)
- [3]非梗阻性无精子症临床遗传学分析及全外显子组测序低频突变关联研究[D]. 姜雨婷. 吉林大学, 2021(01)
- [4]不育男性遗传学异常对IVF/ICSI结局的影响及健康活产结局的相关因素研究[D]. 耿冬峰. 吉林大学, 2021(01)
- [5]人类特发性非梗阻性无精子症的致病基因筛查及功能探讨[D]. 汤冬冬. 安徽医科大学, 2021(01)
- [6]Y染色体上DBY基因在无精子症患者睾丸组织中的缺失研究[D]. 余文华. 西北民族大学, 2020(08)
- [7]非梗阻性无精子症行显微取精获精结局的预测因素分析[D]. 于洋. 吉林大学, 2019(02)
- [8]518例男性无精症的染色体核型分析[J]. 张晓翠,孙雪梅,伊江燕,黄卫东. 新疆医学, 2019(11)
- [9]849例男性不育患者的染色体核型分析[J]. 聂茹. 中国优生与遗传杂志, 2019(11)
- [10]山西地区生精障碍患者染色体核型及Y染色体微缺失分析[J]. 杨红,王振强,郑艳莉,姜虹,武学清. 中国优生与遗传杂志, 2019(08)