一、HSP70复合物抗人肝癌细胞免疫的初步研究（论文文献综述）
彭卓隽[1]（2020）在《艾灸干预胃荷瘤大鼠提取HSP70-PCs并回输大鼠体内对肿瘤细胞的抑制作用》文中研究指明目的:探索艾灸的抗肿瘤效应与诱导胃癌组织HSP70-PCs的相关性;观察将艾灸干预后胃癌组织HSP70-PCs提取物回输至荷瘤大鼠体内对肿瘤增殖及免疫功能的影响;观察艾灸后胃癌组织HSP70-PCs提取物对树突状细胞、T细胞、Walker-256肿瘤细胞的影响。探讨艾灸抗癌作用及可能机制,对艾灸-HSP70疫苗的研发提供初步的实验依据。方法:（1）16只SD大鼠以Walker-256细胞来源的腹水造皮下瘤模型,成模后随机分为模型组和艾灸组,艾灸组干预14天后,无菌环境下剖开荷瘤部位将各组大鼠剥取肿瘤,称重,用抗体柱亲和纯化方法从艾灸组、模型组来源的胃肿瘤大鼠肿瘤中提取HSP70-PCs。（2）从成年大鼠骨髓及脾脏获取树突状细胞与T细胞,各分组为盐水组、模型组与艾灸组,每组6孔加入培养板,相应干预72h后测量OD值;孔板加入Walker-256细胞,按照效靶比1:20,1:40接种T细胞,并加入不同组别提取的HSP70-PCs,2.5 ug/ml,每组6孔,72h后测OD值;孔板加入Walker-256细胞,按效靶比1:20接种T细胞和DC,并加入不同组提取的HSP70-PCs,每组6孔,72h后测OD值。（3）将体重160～180g大鼠18只,分别于右后肢腹股沟处注射Walker256细胞5×106个/ml,0.2ml/部位。7日后,成模大鼠随机分为盐水组、模型组、艾灸组,模型组和艾灸组分别于两侧后肢腹股沟皮下注射模型和艾灸来源的HSP70-PCs蛋白溶液共10ug（20ug/ml,0.5ml/只）,盐水组每周注射一次等量的生理盐水作对照,每7日注射1次,共注射3次。于第28日禁食不禁水12小时后眶内采血,采血后处死动物,无菌条件下切开荷瘤部位皮肤,称取瘤体重量。流式细胞仪检测外周血中CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T细胞比例,HE法观察walker-256细胞瘤组织形态,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:（1）模型组HSP70-PCs含量为14.2ug/克组织,总量102.24ug;艾灸组为72ug/克组织,总量972ug。0.01),艾灸组细胞数明显多于模型组（P<0.01）;培养2日后两组细胞数仍明显多于对照组（P<0.01）,但艾灸组与模型组之间无明显差异（P>0.05）;培养3日后,各组细胞数无差异（P>0.05）。T细胞培养3日后,与对照组比较,艾灸组T细胞光密度稍增加（P<0.05）,但与模型组无差异（P>0.05）。T细胞与Walker-256癌细胞混养效靶比1:20时,模型组、艾灸组光密度相比对照组明显降低（P<0.05）;效靶比1:40时,艾灸组光密度明显降低,与对照组仍有差异（P<0.05）,但与模型组无差异（P>0.05）。T细胞、DC与Walker-256癌细胞混养时,与对照组比较,艾灸组样本的光密度下降,差异显着（P<0.01）,但与模型组无差异（P>0.01）。组大鼠去脏器体质量相比模型组明显增加（P<0.01）、胸腺质量与脾脏指数增加（P<0.05）;与对照组比较,模型组血中CD4+T细胞数量及CD4+/CD8+比值上升（P<0.01）,艾灸组CD8+T细胞数显着上升（P<0.01）,CD4+/CD8+比值稍下降（P<0.05）;艾灸组CD4+T细胞数较模型组明显减少,CD8+T细胞数增加,CD4+/CD8+比值下降（均P<0.01）;结论:1.HSP70-PCs提取物回输对荷瘤大鼠肿瘤增长具有抑制作用,而艾灸组提取物干预后抑制作用更明显。2.艾灸干预后肿瘤组织的HSP70-PCs提取物能加速免疫细胞的增殖,并促进淋巴细胞反应对Walker-256癌细胞的杀伤作用。3.艾灸干预后肿瘤组织的HSP70-PCs提取物回输后,能调节荷瘤大鼠的免疫功能。
潘洁,宋慧东,王巧瑜,萧间开[2]（2020）在《HSP70-肝癌抗原肽复合物修饰DC瘤苗对CIK细胞增殖活性及表型变化的影响》文中研究指明目的研究热休克蛋白70（HSP70）-肝癌抗原肽（SMMC7721人肝癌细胞株）复合物修饰的树突状细胞（DC）对细胞因子诱导的杀伤（CIK）细胞的增殖活性及表型的影响。方法获取健康供者的外周血单个核细胞（PBMC）,培养2 h,贴壁细胞诱导分化DC,非贴壁细胞用于诱导培养CIK细胞,DC生长第7日开始负载HSP70（A组）、肝癌抗原肽（B组）、HSP70-肝癌抗原肽复合物（C组）,另设单纯DC组（D组）,流式细胞检测CD80、CD86的表达,体外构建HSP70-抗原肽复合物-DC瘤苗,并将其和CIK细胞按1∶10的比例混合培养5 d,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖能力,以流式细胞仪检测DC及CIK细胞膜表面分子表达。结果 HSP70-肝癌抗原肽复合物可促进DC成熟,DC表面分子CD86、CD80在C组表达均较D组高（P均<0.01）。HSP70-肝癌抗原肽复合物-DC瘤苗可明显刺激CIK细胞的增殖。HSP70-肝癌抗原肽复合物-DC瘤苗与CIK共培养可使CIK细胞CD3+CD8+、CD3+CD56+的表达提高,与单纯培养CIK细胞比较差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 HSP70-肝癌抗原肽复合物能提高DC表面分子CD80、CD86等表达,诱导DC的成熟,HSP70-抗原肽复合物-DC瘤苗与CIK细胞共培养可明显增加CIK细胞的增殖活性,提高CIK细胞CD3+CD8+、CD3+CD56+的表达。
张瑶尧[3]（2019）在《人肝癌相关抗原SMP30联合HSP70L1修饰树突状细胞诱生CTL体外抗肝癌作用的研究》文中认为目的:制备负载人肝癌相关抗原SMP30和HSP70L1的DC,探讨其诱生的CTL的体外抗肝癌作用。方法:（1）用基因重组技术将SMP30、HSP70L1基因连接到慢病毒载体上,构建SMP30、HSP70L1双基因（SMP30-HSP70L1）重组慢病毒、SMP30重组慢病毒、HSP70L1重组慢病毒,用荧光稀释法对其进行滴度复检。（2）Ficoll梯度密度离心法从HLA-A2阳性健康成人外周血分离单个核细胞,细胞因子GM-CSF和IL-4诱导生成DC,用流式细胞术鉴定。（3）共分为6个组实验:分别用SMP30-HSP70L1重组慢病毒、SMP30重组慢病毒、HSP70L1重组慢病毒、空载慢病毒转染DC和肝癌组织总蛋白（经验证含SMP30、HSP70L1蛋白）致敏DC作为实验组,单纯DC作为空白对照组,即:SMP30-HSP70L1组、SMP30组、HSP70L1组、空载慢病毒组、肝癌组织总蛋白组、空白对照组。（4）对各组DC进行检测:Western blot检测SMP30蛋白和HSP70L1蛋白的表达情况,DC的表面免疫分子CD80和CD86的表达情况用流式细胞术来检测,ELISA检测各组DC细胞因子IL-1、IL-12和IFN-γ的分泌量。（5）用人CD3+T细胞磁珠分选试剂盒分离得到自体T淋巴细胞,流式细胞术检测其纯度。将T淋巴细胞与上述各组DC共培养诱导生成CTL。ELISA检测各组CTL细胞因子IFN、TNF的分泌量。CCK8检测各组CTL的增殖状况。（6）将各组CTL与人肝癌细胞SMMC7721共培养,用流式细胞术检测各组CTL的体外抗肝癌作用。结果:（1）SMP30 与 HSP70L1 融合（SMP30-HSP70L1）重组慢病毒、SMP30重组慢病毒、HSP70L1重组慢病毒构建成功,滴度复检的结果显示病毒滴度约为3×108TU/ml。（2）成功诱导培养人外周血DC,用重组慢病毒转染DC后,WB结果显示:SMP30-HSP70L1组和SMP30组DC的SMP30蛋白表达水平明显高于其他组DC,SMP30-HSP70L1组和HSP70L1组DC的HSP70L1蛋白的表达水平高于其他组DC,P<0.05,差异有统计学意义;流式细胞术结果显示SMP30-HSP70L1组DC的CD86表达率高于HSP70L1组、空载慢病毒组和空白对照组DC（P<0.05）,与肝癌组织总蛋白组DC之间没有统计学差异;各实验组DC间的表面免疫分子CD80的表达率没有统计学差异;ELISA结果显示:SMP30-HSP70L1组DC分泌细胞因子IL-1的量高于SMP30组、HSP70L1组、空载慢病毒组和空白对照组（P<0.05）,与肝癌组织总蛋白组DC无统计学差异;SMP30-HSP70L1组DC细胞因子IL-12和IFN-γ的分泌量高于HSP70L1组、空载慢病毒组和空白对照组DC（P<0.05）,与肝癌组织总蛋白组、SMP30组DC之间不存在统计学差异。（3）流式实验结果显示:通过免疫磁珠法筛选得到的T淋巴细胞的纯度为 93.1%;SMP30-HSP70L1 组 DC 诱生的 CTL 分泌的 TNF-α、IL-12 除了与肝癌组织总蛋白组无统计学差异外,均高于其他各组（P<0.05）;SMP30-HSP70L1组DC诱生的CTL分泌的IFN-α、IFN-y高于空白对照组和空载慢病毒组（P<0.05）,与另外3组无统计学差异;CCK8细胞增殖检测实验的结果发现SMP30-HSP70L1组高于空白对照组、空载慢病毒组、70慢病毒组和30慢病毒组（P<0.05）,与肝癌组织总蛋白组无统计学差异。（4）流式检测CTL的杀伤作用,结果为:①当效靶比（E/T）=15:1时,SMP30-HSP70L1组DC诱生的CTL对肝癌细胞SMMC7721的杀伤率（14.50±0.33）%高于SMP30组、HSP70L1组、空载慢病毒组以及空白对照组（P<0.05）,与肝癌组织总蛋白组（14.25±0.64）%之间没有统计学差别;②当效靶比（E/T）=30:1时,SMP30-HSP70L1组DC诱生的CTL对肝癌细胞SMMC7721的杀伤率（50.53±0.2）%高于空载慢病毒组、HSP70L1组和空白对照组（P<0.05）,与肝癌组织总蛋白组（50.38±0.48）%、SMP30组（46.42±2.14）%之间没有统计学差别。结论:除了肝癌组织总蛋白组外,与SMP30重组慢病毒、HSP70L1重组慢病毒、空载慢病毒转染DC各实验组相比,人肝癌相关抗原SMP30和HSP70L1共同修饰DC,能对DC的成熟产生更好促进作用,更有效地刺激T淋巴细胞的增殖与活化,效靶比为15:1时,CTL在体外能更好地杀伤肝癌细胞SMMC7721。
罗善明[4]（2009）在《sCD40L联合HSP70-H22肽复合物刺激DC诱导特异性抗肝癌免疫的研究》文中进行了进一步梳理目的:探讨受sCD40L与TB.HSP70-H22肽联合刺激的DC在体内外诱导的特异性抗肝癌免疫方法:1.取小鼠骨髓于培养7d分为未刺激组、sCD40L组、TB.HSP70-H22肽组、sCD40L+TB.HSP70-H22肽组4组,分别给与相应干预,24h后,取上清ELISA法检测IL-12、IL-10,FACS检测CD40、CD80;混合淋巴细胞反应（MLR）检测刺激指数（SI）,MTT法检测对肝癌细胞特异性杀伤率;2.建立小鼠肝癌模型,完全随机分为5组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组）,分别给予生理盐水和以上四种干预获得的DC干预,第21日,测肿瘤湿质量,ELISA法测血清IL-10、INF-γ。结果:1.和未刺激组比较,各组的IL-10水平均降低,TB.HSP70-H22肽组、sCD40L+TB.HSP70-H22肽组的CD40、CD80、IL-12、SI与H22细胞特异性杀伤率升高,差异均具有统计学意义（p<0.05）;sCD40L组的SI与H22细胞特异性杀伤率的差异无统计学意义（p>0.05）;2.和sCD40L组比较,TB.HSP70-H22肽组IL-10降低,SI和H22细胞特异性杀伤率升高,差异均具有统计学意义（p<0.05）,CD40、CD80、IL-12差异无统计学意义; sCD40L+TB.HSP70-H22肽组IL-10降低,CD40、CD80、IL-12、SI与H22细胞特异性杀伤率升高,差异均具有统计学意义（p<0.05）;3.和TB.HSP70-H22肽组比较,sCD40L+TB.HSP70-H22肽组的IL-10降低,CD40、CD80、IL-12、SI与H22细胞特异性杀伤率升高,差异均具有统计学意义（p<0.05）;4.与Ⅰ组比较,Ⅳ、Ⅴ组肿瘤湿质量和IL-10降低, INF-γ升高,差异具有统计学意义（p<0.05）,Ⅱ、Ⅲ组各项指标差异均无统计学意义;5.与Ⅱ组比较,Ⅳ、Ⅴ组肿瘤湿质量和IL-10降低,INF-γ升高,差异均具有统计学意义（p<0.05）,Ⅲ组各项指标差异均无统计学意义（p>0.05）;6.与Ⅲ组比较,Ⅳ、Ⅴ组肿瘤湿质量和IL-10降低,INF-γ升高,差异均具有统计学意义（p<0.05）;7.与Ⅳ组比较,Ⅴ组肿瘤湿质量和IL-10降低,INF-γ升高,差异均具有统计学意义（p<0.05）。结论:受sCD40L与TB.HSP70-H22肽复合物联合刺激后的DC被充分激活,能诱导强有力的特异性抗肿瘤细胞免疫,对H22瘤细胞产生强大的杀伤作用,显着抑制肝癌的生长。
王艳霞[5]（2008）在《热休克蛋白70、葡萄糖调节蛋白94和免疫球蛋白G在胎盘肿瘤中的表达、共定位及其意义的研究》文中研究指明热休克蛋白（ heat shock protein,HSP ）是细胞受到各种刺激时产生的一类具有重要生理功能和高度保守的多肽类蛋白质分子家族,普遍存在于原核和真核生物细胞中,在应激状态下可被诱导表达。在哺乳动物的细胞中,热休克蛋白被分为Hsps和Grps,HSP70和GRP94分别是他们中的一员,在正常细胞的生长和发展的过程中,HSP70和GRP94持续地处于低表达状态,但当处于应激状态时将持续高表达。研究已经发现在肿瘤细胞中在没有任何刺激下HSP70和GRP94都将高表达并且与肿瘤的发生发展有关系。在过去免疫球蛋白G被认为是人类免疫系统最普遍和最重要的蛋白且只能由分化成熟的B淋巴细胞分泌,最近的研究发现一些人类肿瘤也能产生IgG。HSP70在葡萄胎中的表达以及HSP70与IgG在肝癌共定位的关系已有相关文献的报道,但关于HSP70,GRP94和IgG在胎盘肿瘤的表达以及HSP70和GRP94分别与IgG的关系尚未见报道。本课题研究目的:（1）.探讨HSP70,GRP94和IgG在胎盘肿瘤中的表达及意义。（2）.研究HSP70,GRP94与IgG的共定位关系及其意义,为肿瘤细胞内免疫机制的存在提供一定的依据。方法: （1）.利用免疫组化研究HSP70,GRP94和IgG在胎盘肿瘤中的表达,同时利用Image-ProPlus进行抗原表达量的分析。（2）.利用免疫荧光双标,激光共聚焦显微镜分析并初步证实在胎盘肿瘤组织和绒毛膜癌细胞系中存在HSP70,GRP94和IgG的共定位。（3）.利用RT-PCR证明HSP70,GRP94和IgG的基因表达。结果:免疫组化的结果显示39例葡萄胎有31例表达HSP70,阳性率为79.4%,有34例表达GRP94,阳性率为87.1%,有35例表达IgG,阳性率为89%。20例绒毛膜癌中有15例表达HSP70,阳性率为75%,有16例表达GRP94,阳性率为80%,有18例表达IgG,阳性率为90%。HSP70在胞浆胞核中均表达,主要表达在胞核中,GRP94和IgG主要表达在胞浆中,而且HSP70,GRP94在绒毛膜癌中细胞的表达要比在葡萄胎中细胞的表达强（P = 0.03,P = 0.04）,同时也发现在葡萄胎中HSP70在细胞滋养层细胞比合体滋养层细胞表达强（P< 0.01）,GRP94和IgG是合体滋养层细胞比细胞滋养层细胞表达要强（P< 0.01）。另外还发现在20例绒毛膜癌中HSP70,GRP94和IgG表达都比癌旁组织表达强（P< 0.01）,这些结果表明HSP70,GRP94的表达可能与肿瘤的良恶性程度有关系。59例胎盘肿瘤组织中42例有HSP70和IgG的共表达,48例有GRP94和IgG的共表达,通过免疫荧光发现在部分胎盘肿瘤细胞中可见HSP70,GRP94分别与IgG的共定位,为了排除他们可能来自非特异吸收,我们在体外培养了绒毛膜癌细胞,也发现存在HSP70,GRP94和IgG的共定位,同时利用RT-PCR证明了HSP70,GRP94和IgG存在基因的表达。结论:HSP70,GRP94在胎盘肿瘤的表达与胎盘肿瘤的分化程度有关系,初步证实了HSP70,GRP94和IgG在胎盘肿瘤中的共定位关系,可能与胎盘肿瘤的生存和发展有关。
古学文[6]（2008）在《白花蛇舌草诱导HSP70表达对H22肝癌细胞移植瘤免疫作用的影响》文中认为恶性肿瘤是严重威胁人类健康的一类常见疾病,寻找有效的抗癌药物和方法,是世界医学面临的重要课题。祖国医学认为热毒是恶性肿瘤的主要病因病理之一,正气虚衰、热毒内聚是癌症的重要病理基础,热毒与痰湿或水湿胶结成为癌症的主要病机。本课题组近年从热休克蛋白（heat shock protein HSP）与中医热证的关系着手进行了一系列研究,提出清热解毒类中药白花蛇舌草可能通过诱导HSP70免疫原性发挥其抗肿瘤的作用,并从免疫学角度研究白花蛇舌草对恶性肿瘤HSP70免疫原性的诱导机制。前期实验主要通过观察荷瘤鼠腹水H22肝癌细胞HSP70表达及外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞表达,从整体方面研究发现清热解毒类中药白花蛇舌草可能通过诱导HSP70免疫原性发挥其抗肿瘤的作用。随着医学的发展,对HSP70研究的逐渐深入,人们发现HSP70在肿瘤特别是在恶性肿瘤中有较高表达。故近年来将其用在肿瘤方面的研究也越来越多,尤其是在肿瘤免疫方面的研究。目前主要观点认为HSP70可以携带多种肿瘤抗原肽,这些抗原肽被称为“热休克蛋白70多肽复合物”（HSP70-PC）,主要起“分子伴侣”的作用,将肿瘤多肽分子直接或间接呈递给机体T淋巴细胞,从而引起机体对肿瘤细胞的特异性免疫反应。近年来,分子生物学技术被广泛应用于肿瘤的研究,人们已经认识到肿瘤的发生与纽胞基因组的变化密切相关。主要观点认为是由于控制细胞生长和分化的基因失活所致。P16是近年发现的一种抑癌基因,正常情况下P16蛋白通过与细胞周期关键酶周期素依赖性激酶4（CDK4）结合,拮抗CDK4的作用,从而阻止细胞由G1期进入S期（DNA合成期）,使细胞增殖受阻。P16基因蛋白失活,就会引起细胞周期失控,从而引起癌变。目前研究发现在大多数肿瘤中有P16基因的突变和缺失,说明P16基因功能的失活可导致肿瘤细胞的无限性生长。因此,进一步明确P16基因与肿瘤的关系有助于揭示肿瘤发生机制,对中医临床的诊断、治疗和预后等方面都有着重要的意义。本部分课题主要承接前面的实验,目的:探讨清热解毒类中药白花蛇舌草可能通过诱导HSP70、P16的表达而发挥其免疫原性抗肿瘤的作用及抑制和杀灭肿瘤细胞的作用,并从免疫学、分子生物学的角度研究白花蛇舌草对恶性肿瘤HSP70、P16的诱导机制。方法:本实验承接前期实验,首先采取经中药治疗后的小鼠腹水肝癌细胞各分为封闭组和未封闭组,封闭组给予HSP70单克隆抗体封闭癌细胞表达的HSP70抗原,未封闭组用经中药治疗后的H22肝癌细胞,以相同剂量分别免疫小鼠两次后给小鼠接种体外培养的H22肝癌细胞,同时设1640缺省对照组。形成瘤体后制成石腊切片。经HE染色后对小鼠肿瘤组织、脾组织和胸腺组织进行病理形态学观察,采用免疫组化标记法对实体瘤组织中的CD4+、CD8+、HSP70、P16进行检测。结果:1、白花蛇舌草未封闭组肿瘤组织坏死灶较其它各组更为明显,并见较多淋巴细胞浸润;白花蛇舌草未封闭组胸腺皮质增厚;脾脏白髓增厚、组织致密,见大量巨噬细胞。白花蛇舌草封闭组,党参未封闭和封闭组胸腺及脾脏病理改变与空白对照组比较,除脾脏可见少量巨噬细胞外,未见其它明显不同。2、与空白对照组比较,白花蛇舌草未封闭组CD8+、封闭组CD4+表达明显上调、党参封闭组CD4+表达也明显上调;党参未封闭及封闭组CD4+、CD8+表达与空白对照组比较也有所增高,但差异无显着性意义;与白花蛇舌草封闭组比较,白花蛇舌草未封闭组CD8+表达明显上调。3、与空白对照组比较,白花蛇舌草未封闭组和党参未封闭组HSP70蛋白表达明显上调;与党参未封闭组比较,白花蛇舌草未封闭组HSP70蛋白表达上调更明显。4、与空白对照组比较,白花蛇舌草未封闭组、封闭组P16表达明显上调;党参未封闭组、封闭组P16表达也上调,但效果没有白花蛇舌草组明显。与空白对照组比较无明显改变,差异无显着性意义。结论::1、白花蛇舌草可诱导恶性肿瘤HSP70的高表达,增强机体的CD4+、CD8+CTL反应而达到对肿瘤的主动免疫杀伤作用。2、白花蛇舌草可诱导恶性肿瘤P16的高表达而达到有抑制癌细胞的增长的作用。3、经白花蛇舌草治疗后的具有HSP70、P16高表达的腹水肝癌细胞确可诱导小鼠对该肿瘤的主动免疫作用和抑制癌细胞的增长或直接杀灭癌细胞的作用,其机理可能通过提高机体CD4+、CD8+CTL反应和提高机体P16的表达而实现。
王斌[7]（2007）在《热疗联合免疫疗法治疗肝癌的实验研究》文中提出原发性肝癌是世界范围内常见的恶性肿瘤之一,每年大约有100万的新发病例,位居恶性肿瘤死亡率的第2位。我国是世界上肝癌的高发地区之一,全球每年新发的肝癌病例中45%在我国大陆,每年约有11万人死于肝癌,位居恶性肿瘤死亡率的第2位。目前,医学影像技术的不断提高使肝癌的诊断已不再是影响其预后的主要因素,关键的问题是肝癌的治疗。肝癌治疗最好的方法目前仍是手术治疗,但由于临床所见肝癌多已进入中晚期,而且肝癌病人约80%伴有肝硬化,能够实施根治性切除术的肝癌只是少数,据统计能做手术切除者不足25%,所以,选择合理的综合治疗手段延长中晚期肝癌患者的生存时间和改善生存质量是提高肝癌总体疗效的关键之一。对于不能手术切除的原发性肝癌的治疗方法主要有化疗、放射治疗、经皮股动脉穿刺插管肝动脉栓塞化疗、冷冻治疗、无水酒精瘤内注射治疗、微波固化治疗、电化疗治疗、多弹头射频治疗、免疫治疗、导向治疗、肝移植治疗、中医中药治疗等。肝癌的全身化疗总的疗效不十分满意,迄今无一种药物或联合化疗方案的有效率超过20%,也很少能延长生存期,所以,全身化疗治疗肝癌的疗效已基本否定。目前倡导区域化疗如经皮股动脉穿刺插管肝动脉栓塞化疗等。对放射治疗肝癌,以往认为价值不大,但随着放射技术的提高及临床经验的积累,放射治疗肝癌取得了一定的效果。其他疗法对肝癌的治疗虽然有一定效果,但总体疗效并不尽人意。为了寻找新的有效的肝癌治疗方法,我们探讨用热疗联合肿瘤疫苗的免疫疗法治疗肝癌,期望能对肝癌治疗疗效的提高有所帮助。在本研究中,我们探讨了热疗对热休克蛋白产生的影响;热疗对机体免疫功能的影响;热休克蛋白-肿瘤抗原肽复合物对肿瘤细胞的杀伤作用以及对机体免疫功能的增强作用等。从实验结果可看出,热疗可以促进热休克蛋白的产生,产生的热休克蛋白可以诱导增强机体的免疫功能,加热后产生的热休克蛋白-抗原肽复合物单独或与树突状细胞制备成肿瘤疫苗,对肿瘤细胞有明显的杀伤作用,同时可以增强机体的免疫功能。此实验结果表明:热疗联合免疫疗法治疗肝癌对肝癌患者是一种很好的有效的治疗方法。
隋春阳[8]（2007）在《TLR4受体信号传导通路参与人肝癌细胞株HepG-2分泌细胞因子机制的研究》文中研究表明目的原发性肝癌（下称肝癌）是严重威胁我国人民健康的恶性肿瘤之一。根据现有认识，病毒性肝炎、黄曲霉毒素和饮水污染是公认的肝癌三大相关因素，而这些因素可以导致体内长期慢性炎症的过程，从而有利于肿瘤的发生和发展。肿瘤能在人体内发生并持续发展，通常都伴随着宿主的免疫抑制。肿瘤有多种机制逃避体内的免疫监视，其中一个重要的机制就是分泌一些细胞因子例如TGF-β1、VEGF、IL-6等来抑制DC细胞的成熟和消弱T细胞的CTL作用，从而达到免疫耐受。然而，肿瘤细胞分泌免疫抑制细胞因子的机制尚不清楚。Toll样受体4（TLR4）是新近发现的天然免疫受体，它是一类模式识别受体，能够被微生物的特异性成分和某些宿主分子所激活，它们构成了防御很多病原体的第一道防线，在天然免疫系统中起着决定性的作用。目前研究表明脂多糖（LPS）和热休克蛋白70（HSP70）分别是TLR4的外源性和内源性配体。对TLR4受体传导通路的研究表明TLR4受体传导通路可以激活核因子KB（NF-κB），从而调解一些前炎性细胞因子的分泌。而这些细胞因子参与了肿瘤发生和发展，提示TLR4可能影响肿瘤的生长。最近的研究表明TLR4在许多肿瘤细胞表面均有表达，但是TLR4在肝癌细胞表面是否表达，TLR4的作用机制如何还不清楚。本研究我们首先研究肝癌细胞株HepG-2表面TLR4表达的情况，然后研究LPS刺激前后细胞因子分泌的改变情况，探讨TLR4的信号传导活化途径，最后研究TLR4内源性配体HSP70的作用途径。方法1．分别利用RT-RCR和Western-blot方法检测肝癌细胞株HepG-2细胞TLR4mRNA和TLR4蛋白的表达情况。2．利用免疫组化的方法观察TLR4受体在肝癌组织中的表达情况。3．利用RT-PCR和Western-blot方法分别检测和对比LPS刺激前后肝癌细胞株HepG-2中TGF-β1，VEGF，IL-6 mRNA和蛋白的表达情况。然后检测阻断TLR4受体后LPS刺激肝癌细胞株HepG-2后TGF-β1，VEGF，IL-6 mRNA和蛋白的表达情况。4．利用RT-PCR和Western-blot方法分别检测和对比LPS刺激前后肝癌细胞株HepG-2中NF-κB mRNA和蛋白的表达情况。然后检测阻断TLR4受体后LPS刺激肝癌细胞株HepG-2后NF-κB mRNA和蛋白的表达情况。5．HSP70-肿瘤肽复合物的纯化：肝癌组织应用裂解液进行匀浆，并高速离心制备总蛋白。上述的总蛋白依次进行ConA-Sepharose亲和层析和DEAE-Sephacel离子交换层析分离纯化。所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行蛋白分子量及性质鉴定，Bradford法测定蛋白浓度。6．利用RT-PCR和Western-blot方法分别检测和对比HSP70-肿瘤肽复合物刺激前后肝癌细胞株HepG-2中TGF-β1，VEGF IL-6 mRNA和蛋白的表达情况。然后检测阻断TLR4受体后HSP70-肿瘤肽复合物刺激肝癌细胞株HepG-2后TGF-β1，VEGF，IL-6 mRNA和蛋白的表达情况。7．利用RT-PCR和Western-blot方法分别检测和对比HSP70-肿瘤肽复合物刺激前后肝癌细胞株HepG-2中NF-κB mRNA和蛋白的表达情况。然后检测阻断TLR4受体后HSP70-肿瘤肽复合物刺激肝癌细胞株HepG-2后NF-κB mRNA和蛋白的表达情况。结果1．利用RT-PCR可以检测到肝癌细胞株HepG-2有TLR4 mRNA的表达；利用Western-blot可以检测到肝癌细胞株HepG-2有TLR4蛋白的表达。2．利用免疫组化表明肝癌组织中有TLR4的表达，其表达于细胞的细胞膜上，细胞浆中也可以有少量的表达，其阳性率约为76.7％（23/30）。3．LPS刺激肝癌细胞株HepG-2后TGF-β1，VEGF，IL-6 mRNA和蛋白的表达均增加，而阻断TLR4受体后TGF-β1，VEGF，IL-6 mRNA和蛋白又下降。4．LPS刺激肝癌细胞株HepG-2后NF-κB mRNA和蛋白的表达均增加，而阻断TLR4受体后NF-κB mRNA和蛋白又下降。5．分离、纯化得到的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、考马斯量蓝鉴定为单一带，分子量为70kD；Western blot结果证实为HSP70。每10g组织最终获得8mg的HSP70。6．HSP70肿瘤肽复合物刺激肝癌细胞株HepG-2后TGF-β1，VEGF，IL-6 mRNA和蛋白的表达均增加，而阻断TLR4受体后TGF-β1，VEGF，IL-6 mRNA和蛋白又下降。7．HSP70肿瘤肽复合物刺激肝癌细胞株HepG-2后NF-κB mRNA和蛋白的表达均增加，而阻断TLR4受体后NF-κB mRNA和蛋白又下降。结论1．肝细胞癌细胞株表面及人肝癌组织有TLR4的表达。2．作为TLR4的外源性配体，LPS可以活化细胞内的NF-κB信号传导系统及促进细胞因子TGF-β1，VEGF，IL-6的表达。3．使用ConA亲和层析和阴离子交换蛋白亲和层析二步蛋白纯化法可获得高纯度HSP70肽复合物。4．作为TLR4的内源性配体，HSP70同样可以活化细胞内的NF-κB信号传导系统及促进细胞因子TGF-β1，VEGF，IL-6的表达。
张赢予[9]（2007）在《特异性抗原激活的高效细胞毒性T淋巴细胞的实验研究》文中研究说明本研究采用分子生物学、免疫学和微生物发酵技术，从人外周血中分离单个核细胞，经（1）rhHSP70-肿瘤肽复合物对淋巴细胞的有效激活；（2）槲寄生发酵提取物激活的共刺激分子的协同作用；（3）CD3mAb及IL-2维持的大规模培养扩增，建立了特异性抗原激活的高效细胞毒性T淋巴细胞（SAA-CTL）的体外培养体系，经形态学观察、增殖动力学观察、免疫表型分析、细胞毒实验等一系列实验研究，结果表明，所建立的培养体系诱生了具有显着地特异性杀伤肿瘤细胞作用的淋巴细胞群，其免疫表型为CD3+CD4+、CD3+CD8+，且从20ml外周血中即可扩增出109数量级的细胞，探讨了该法作为肿瘤辅助疗法的可行性，为其广泛应用于临床提供了依据。
段春光[10]（2006）在《人免疫球蛋白G（IgG）多克隆、单克隆抗体的制备及IgG与HSP70在肿瘤细胞内共定位及其意义的研究》文中指出免疫球蛋白（IgG）是免疫系统中的重要分子，以往经典的免疫学理论认为IgG都是B淋巴细胞和浆细胞分泌的，而新近的研究表明上皮性肿瘤也能分泌IgG。同时以往的研究已证实，在肿瘤细胞中，热休克蛋白（HSP）高表达。我们在实际工作中发现IgG和HSP70的免疫组化染色表现非常相似，于是我们设想IgG和HSP70也许有相互关系，并在肿瘤免疫中互相作用。 本课题旨在探讨：肿瘤细胞分泌的IgG与热休克蛋白70（HSP70）的共定位关系，并初步提出在肿瘤细胞内可能存在细胞内免疫机制，讨论IgG和HSP70在细胞内免疫系统中的作用。目的：1．制备IgG的多克隆抗体；2．制备IgG的单克隆抗体；3．研究证实IgG和HSP70在肿瘤细胞中的共定位关系，为肿瘤细胞内免疫机制的存在提供初步证据。方法：1．用纯化的IgG以常规多克隆抗体制备方法制备兔抗人IgG的多克隆抗体，并纯化并对抗体特性进行鉴定；2．以纯化的IgG常规免疫、常
二、HSP70复合物抗人肝癌细胞免疫的初步研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、HSP70复合物抗人肝癌细胞免疫的初步研究（论文提纲范文）
（1）艾灸干预胃荷瘤大鼠提取HSP70-PCs并回输大鼠体内对肿瘤细胞的抑制作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一部分 :HSP70的提纯 |
| 1 实验材料 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 :艾灸后胃癌组织HSP70-PCs提取物对免疫细胞的影响及对肿瘤细胞的抑制效应 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 T细胞与肿瘤免疫 |
| 4.2 DC与肿瘤免疫 |
| 4.3 HSP70 体外对DC、T淋巴细胞的增殖作用 |
| 5 研究小结 |
| 第三部分 :艾灸后的胃癌组织HSP70-PCs提取物回输后对荷瘤大鼠的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 热休克蛋白70在治疗肿瘤中的应用 |
| 4.2 HSP70对胸腺、脾腺的影响 |
| 4.3 HSP70 对外周血中CD4+、CD8+T 细胞的影响 |
| 4.4 艾灸的热刺激效应能诱导HSP70高表达 |
| 5 小结 |
| 第四部分 讨论 |
| 1 中西医对于胃癌的认知 |
| 2 艾灸治疗癌症的依据和思路 |
| 3 从艾灸诱导HSP70产生思考艾灸抗肿瘤的机制 |
| 4 存在的问题与展望 |
| 第五部分 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 艾灸对患癌机体免疫细胞调节作用探讨 |
| 参考文献 |
（2）HSP70-肝癌抗原肽复合物修饰DC瘤苗对CIK细胞增殖活性及表型变化的影响（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 一、材料 |
| 二、方法 |
| 1.肿瘤抗原制备 |
| 2.SMMC-7721抗原肽与HSP70体外结合 |
| 3.DC的体外培养 |
| 4.CIK细胞的体外诱导和扩增 |
| 5.HSP70-肝癌抗原肽复合物修饰DC及检测细胞表型 |
| 6.DC与CIK细胞共培养 |
| 7.共培养后CIK细胞表型的测定 |
| 8.不同组DC对CIK细胞增殖活性的影响 |
| 三、统计学处理 |
| 结果 |
| 一、细胞的表型分析 |
| 1.DC表型分析 |
| 2.CIK表型分析 |
| 3.不同组别DC对CIK细胞增殖作用的影响 |
| 讨论 |
（3）人肝癌相关抗原SMP30联合HSP70L1修饰树突状细胞诱生CTL体外抗肝癌作用的研究（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 一、负载SMP30和HSP70L1 DC的制备和检测 |
| 1. 实验材料与设备 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 细胞的常规培养 |
| 2.2 重组慢病毒的构建、检测 |
| 2.2.1 构建重组慢病毒 |
| 2.2.2 荧光稀释法进行病毒滴度复检 |
| 2.3 肝癌组织总蛋白的提取与检测 |
| 2.3.1 肝癌组织总蛋白的提取 |
| 2.3.2 WB检测肝癌组织中SMP30和HSP70L1蛋白表达 |
| 2.4 负载SMP30-HSP70L1 DC的制备 |
| 2.4.1 HLA-A2~+志愿者的筛选 |
| 2.4.2 DC的体外诱导培养与鉴定 |
| 2.4.3 重组慢病毒转染DC实验 |
| 2.5 肝癌组织总蛋白致敏DC |
| 2.6 各组DC的检测 |
| 2.6.1 WB检测各组DC的SMP30和HSP70L1蛋白表达 |
| 2.6.2 流式细胞术检测各组DC表面分子 |
| 2.6.3 ELISA检测各组DC细胞因子的分泌 |
| 2.7 统计学方法 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 重组慢病毒滴度复检结果 |
| 3.2 肝癌组织中SMP30和HSP70L1蛋白的表达情况 |
| 3.3 HLA-A2~+志愿者的筛选结果 |
| 3.4 人外周血DC的培养、鉴定结果 |
| 3.5 重组慢病毒转染DC的结果图 |
| 3.6 各组DC疫苗检测结果 |
| 3.6.1 各组DC的SMP30和HSP70L1蛋白的表达情况 |
| 3.6.2 各组DC表面分子的表达情况 |
| 3.6.3 各组DC细胞因子的分泌情况 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 二、CTL的体外诱导与检测 |
| 1. 实验材料与设备 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 细胞的常规培养 |
| 2.2 T淋巴细胞的分离、培养与纯化 |
| 2.2.1 淋巴细胞的分离、培养 |
| 2.2.2 T淋巴细胞的纯化 |
| 2.2.3 流式细胞术检测T淋巴细胞的纯度 |
| 2.3 各组CTL的诱生及检测 |
| 2.3.1 CTL的激活、扩增 |
| 2.3.2 ELISA检测各组CTL细胞因子的分泌 |
| 2.3.3 CCK8法检测各组CTL的增殖 |
| 2.4 统计学方法 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 T淋巴细胞的纯度检测结果 |
| 3.2 各组CTL的检测结果 |
| 3.2.1 各组CTL细胞因子的分泌情况 |
| 3.2.2 各组CTL的增殖情况 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 三、CTL对肝癌细胞的体外杀伤实验 |
| 1. 实验材料与设备 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 细胞的常规培养 |
| 2.2 靶细胞的准备 |
| 2.3 效应细胞的准备 |
| 2.4 CTL杀伤实验 |
| 2.5 流式细胞术检测CTL杀伤效果 |
| 2.6 统计学方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（4）sCD40L联合HSP70-H22肽复合物刺激DC诱导特异性抗肝癌免疫的研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分HSP70-H22 肽复合物的制备和sCD40L 联合HSP70-H22 肽复合物致敏的DC 瘤苗的制备、鉴定、MLR、诱导特异性抗肝癌免疫 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 实验结果 |
| 3. 讨论 |
| 第二部分sCD40L 联合HSP70-H22 肽复合物致敏的DC 诱导体内抗肝癌免疫效应 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 实验结果 |
| 3. 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
（5）热休克蛋白70、葡萄糖调节蛋白94和免疫球蛋白G在胎盘肿瘤中的表达、共定位及其意义的研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 1. 热休克蛋白70 (HSP70) 的研究进展 |
| 2 葡萄糖调节蛋白94（GRP94 或GP96）的研究进展 |
| 3. 免疫球蛋白G在肿瘤中的研究进展 |
| 正文 |
| 实验一、HSP70,GRP94 和免疫球蛋白G在胎盘肿瘤细胞中的表达及意义 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二、HSP70,GRP94 和免疫球蛋白G在胎盘肿瘤细胞中共定位及意义 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
（6）白花蛇舌草诱导HSP70表达对H22肝癌细胞移植瘤免疫作用的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 第一节 中医对肿瘤病因病机及治则治法的认识 |
| 一、古代中医对肿瘤的认识 |
| 二、肿瘤的病因病机 |
| 三、肿瘤的中医治则治法 |
| 第二节 热休克蛋白与肿瘤 |
| 一、HSP家族的组成及结构功能概况 |
| 二、HSPS的生物学功能及作用特点 |
| 三、HSP70的特性 |
| 四、HSP在肿瘤中的表达及作用 |
| 五、HSP70在肝癌中的表达及其意义 |
| 六、HSPS在肿瘤诊断方面的作用 |
| 七、HSP肿瘤疫苗的临床应用 |
| 第三节 P16与肿瘤 |
| 一、P16基因抑制肿瘤的机制 |
| 二、P16基因在肿瘤中失活的机制 |
| 三、P16基因与肿瘤发生发展的关系 |
| 四、P16与肝癌 |
| 第四节 白花蛇舌草与恶性肿瘤 |
| 第五节 党参与肿瘤 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一节 本实验的主要研究内容及技术路线 |
| 一、研究内容 |
| 二、实验材料 |
| 三、实验方法 |
| 四、技术路线 |
| 第二节 H22肝癌细胞培养 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 第三节 动物模型的建立 |
| 一、腹水型动物模型的制备 |
| 二、实体瘤动物模型的制备 |
| 第四节 白花蛇舌草对H22肝癌细胞移植瘤的病理形态学的影响 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 第五节 白花蛇舌草对H22肝癌细胞移植瘤的免疫作用 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 第六节 白花蛇舌草对H22肝癌细胞移植瘤P16的影响 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 第三部分 讨论 |
| 一、HSP70与肿瘤免疫相关性的讨论 |
| 二、P16与肿瘤相关性的讨论 |
| 三、治则治法与方药选用讨论 |
| 四、实验方法及实验结果的讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）热疗联合免疫疗法治疗肝癌的实验研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| 英文缩写词 |
| 第一篇 前言 |
| 第二篇 文献综述 |
| 第一章 肿瘤热疗研究现状 |
| 肿瘤热疗学原理 |
| 1、肿瘤的 PH 值 |
| 2、肿瘤的血流 |
| 3、肿瘤热疗的细胞凋亡模型 |
| 4、热疗与放射敏感性 |
| 5、热疗与化疗敏感性 |
| 第二章 肿瘤免疫治疗现状 |
| 1. 特异性主动免疫治疗 |
| 2. 被动免疫治疗 |
| 第三章 热休克蛋白与肿瘤的相关性 |
| 第四章 肿瘤热疗与免疫 |
| 第五章 肝癌的治疗现状 |
| 1. 化疗 |
| 2. 放射治疗 |
| 3. 经皮股动脉穿刺插管 TACE |
| 4. 冷冻治疗 |
| 5. 无水酒精瘤内注射治疗 |
| 6. 微波固化治疗 |
| 7. 电化疗治疗 |
| 8. 多弹头射频治疗 |
| 9. 导向治疗 |
| 10. 基因治疗 |
| 11. 热疗治疗肿瘤 |
| 12. 免疫疗法 |
| 第三篇 实验研究 |
| 第一章小鼠肝癌细胞Hep-A-22 热休克蛋白70（HSP70）的诱导及表达 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第二章 肝癌细胞Hep-A-22 提取的HSP70 对肿瘤攻击小鼠的免疫保护作用 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三章 热疗对荷瘤小鼠免疫功能的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第四章 树突状细胞（dendritic cells，DCs）的体外诱导及鉴定 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第五章 人肝癌细胞（SMMC-7721）提取的HSP70 多肽复合物对DC 体外抗肿瘤作用的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨 论 |
| 第六章 热疗联合负载肝癌HSP70-抗原肽的树突状细胞肿瘤疫苗对肝癌的治疗研究 |
| 1. 材料和方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第四篇 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读博士论文期间发表的学术论文及其他成果 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 致谢 |
（8）TLR4受体信号传导通路参与人肝癌细胞株HepG-2分泌细胞因子机制的研究（论文提纲范文）
| 一、摘要 |
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 二、英文缩略语 |
| 三、论文 |
| 前言 |
| 论文一 TLR4受体在肝癌细胞株HepG-2的表达 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 实验结果(附论文图片) |
| 讨论 |
| 结论 |
| 论文二 TLR4外源性配体LPS对肝癌细胞株HepG-2细胞因子表达的影响及其作用机制 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 实验结果(附论文图片) |
| 讨论 |
| 结论 |
| 论文三 TLR4内源性配体HSP70对肝癌细胞株HepG-2细胞因子表达的影响及其作用机制 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 实验结果(附论文图片) |
| 讨论 |
| 结论 |
| 总结论 |
| 四、本研究创新性的自我评价 |
| 五、参考文献 |
| 六、附录 |
| 综述(附参考文献) |
| 在学期间的科研成绩 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（9）特异性抗原激活的高效细胞毒性T淋巴细胞的实验研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一章 文献回顾 |
| 第一节 肿瘤的过继性细胞免疫疗法 |
| 第二节 热休克蛋白70-肽复合物与肿瘤免疫 |
| 第三节 槲寄生与共刺激分子 |
| 第二章 rhHSP70-肽复合物诱导的特异性细胞免疫应答 |
| 第一节 材料与方法 |
| 第二节 实验结果 |
| 第三节 讨论 |
| 第三章 槲寄生发酵提取物的制备及免疫调节作用 |
| 第一节 材料与方法 |
| 第二节 实验结果 |
| 第三节 讨论 |
| 第四章 SAA-CTL培养体系的建立与鉴定 |
| 第一节 材料与方法 |
| 第二节 实验结果 |
| 第三节 讨论 |
| 研究总结 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间发表的学术论文及其他成果 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 致谢 |
（10）人免疫球蛋白G（IgG）多克隆、单克隆抗体的制备及IgG与HSP70在肿瘤细胞内共定位及其意义的研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 1 免疫球蛋白在肿瘤细胞中的表达及生物学活性的研究进展 |
| 2 热休克蛋白70的(HSP70)的研究进展 |
| 正文 |
| 一、抗人免疫球蛋白G的多克隆抗体的制备、纯化及鉴定 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 二、抗人免疫球蛋白G的单克隆抗体的制备、纯化及鉴定 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 三、人免疫球蛋白G和热休克蛋白70在肿瘤细胞内的共定位及其意义的研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
四、HSP70复合物抗人肝癌细胞免疫的初步研究（论文参考文献）
- [1]艾灸干预胃荷瘤大鼠提取HSP70-PCs并回输大鼠体内对肿瘤细胞的抑制作用[D]. 彭卓隽. 湖南中医药大学, 2020
- [2]HSP70-肝癌抗原肽复合物修饰DC瘤苗对CIK细胞增殖活性及表型变化的影响[J]. 潘洁,宋慧东,王巧瑜,萧间开. 新医学, 2020(02)
- [3]人肝癌相关抗原SMP30联合HSP70L1修饰树突状细胞诱生CTL体外抗肝癌作用的研究[D]. 张瑶尧. 广西医科大学, 2019(08)
- [4]sCD40L联合HSP70-H22肽复合物刺激DC诱导特异性抗肝癌免疫的研究[D]. 罗善明. 重庆医科大学, 2009(06)
- [5]热休克蛋白70、葡萄糖调节蛋白94和免疫球蛋白G在胎盘肿瘤中的表达、共定位及其意义的研究[D]. 王艳霞. 第四军医大学, 2008(04)
- [6]白花蛇舌草诱导HSP70表达对H22肝癌细胞移植瘤免疫作用的影响[D]. 古学文. 广州中医药大学, 2008(09)
- [7]热疗联合免疫疗法治疗肝癌的实验研究[D]. 王斌. 吉林大学, 2007(03)
- [8]TLR4受体信号传导通路参与人肝癌细胞株HepG-2分泌细胞因子机制的研究[D]. 隋春阳. 中国医科大学, 2007(05)
- [9]特异性抗原激活的高效细胞毒性T淋巴细胞的实验研究[D]. 张赢予. 吉林大学, 2007(05)
- [10]人免疫球蛋白G（IgG）多克隆、单克隆抗体的制备及IgG与HSP70在肿瘤细胞内共定位及其意义的研究[D]. 段春光. 第四军医大学, 2006(12)
标签：肝癌论文; 细胞免疫论文; 肿瘤免疫论文; 肝癌晚期治疗方法论文; 封闭治疗论文;